新規抗MRSA薬ダプトマイシンによる横紋筋融解症発現機構に関する研究

抗MRSA新药达托霉素致横纹肌溶解的机制研究

• 批准号: 24929002
• 负责人: 石川 修平
• 金额: $ 0.32万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-24929002/
• 关键词: ダプトマイシン; 横紋筋融解症; モノカルボン酸輸送担体(MCT)

【研究目的】本研究では、重篤な副作用として横紋筋融解症の発現が報告され、臨床において注意喚起されている、新規抗MRSA治療薬ダプトマイシン(DAP)に着目し、骨格筋細胞毒性発現機構の解明を目的とした。【研究方法】骨格筋細胞へのDAPによる直接障害性を評価するため、ヒト横紋筋肉腫由来細胞(RD細胞)を用いて、下記の実験を行った。(1)DAP単独ならびにDAPとシンバスタチン同時処理による骨格筋細胞毒性の検討RD細胞を薬物処理した後、MTT assay法を用いて、細胞死を評価した。(2)DAPの細胞内外濃度の推移薬物処理したRD細胞の処理液(A:細胞外液)を回収し、残った細胞から破砕液(B:細胞内液)を作成し、サンプル(A)、(B)をHPLCで測定した。(3)DAPがモノカルボン酸輸送担体(MCT)の発現に与える影響RD細胞を薬物処理した後、細胞からタンパク質を抽出し、骨格筋細胞内の乳酸量の恒常性に寄与するMCTの発現量をWestern blot法で測定した。【研究結果】(1)DAP単独処理は、軽度ではあるが有意な骨格筋細胞への直接障害性を示した(時間依存的な毒性の増強は認められなかった)。また、シンバスタチンの併用はDAPの骨格筋細胞障害を増強させる傾向を示した。(2)DAPのほとんどは細胞外液から検出され、処理後72時間までその比率は変化せず、細胞内の蓄積性は観察されなかった。(3)DAPは乳酸の細胞外排泄に寄与するトランスポーターであるMCT-4の発現量を有意に低下させた。【研究成果】本研究によってDAPの骨格筋障害は濃度依存的なものであり、時間依存的な障害を示さない可能性が示唆された。また、DAPの濃度が20μg/ml(臨床上、横紋筋融解症の発現リスクの上昇が報告されている濃度域)以上において、シンバスタチンの併用が有意に骨格筋細胞障害を増強することが明らかとなった。さらに、DAPの細胞内蓄積性が認められなかったことから、DAPの骨格筋細胞障害は細胞膜を標的とした機序である可能性があり、DAPが細胞膜上のMCT-4の発現量の低下させることで、細胞内の乳酸蓄積量上昇による酸性化を引き起こすことが、骨格筋障害の機序の一つである可能性が示唆された。

[objective] the purpose of this study is to report the side effects of transverse tenolysis, to pay attention to the onset of shock, the new anti-MRSA treatment protocol (DAP), and the cellular toxicity of bone lattice. the purpose of the study is to understand the purpose of this study. [research methods] RD cells (RD cells) were used to directly block the harmful effects of bone latticed tendons (bone bars) and transverse tendons. (1) at the same time, DAP was used to analyze the cytotoxicity of bone lattices, the cytotoxicity of RD cells, and the MTT assay method was used to detect the cytotoxicity of RD cells. (2) the DAP solution (A: extracellular solution), the residual liquid (B: intracellular fluid), the HPLC solution (A), the extracellular fluid (A), the (3) after the acid delivery system (MCT) of the DAP was detected and the RD cells were treated, the cells were extracted, the intracellular lactic acid content was constant, and the MCT was measured by Western blot method. [results] (1) DAP intended to test the direct harmfulness of skeletal reinforcement cells (time-dependent toxicity test). Please use the DAP bone lattice to show the damage to the cell. (2) DAP was used to detect the concentration of extracellular fluid, 72 hours after treatment, and the intracellular concentration was detected actively. (3) DAP lactic acid and extracellular excretion are intentionally lower than those of the control group. [research results] in this study, DAP was used to evaluate the degree-dependent and time-dependent barriers of bone reinforcement in order to show the possibility of failure. The temperature is 20 μ g

项目成果

抗MRSA治療薬ダプトマイシンの骨格筋細胞毒性に関する基礎的検討

抗MRSA治疗药物达托霉素骨骼肌细胞毒性的基础研究

• 发表时间: 2013
• 作者: 成重友莉;尾川理恵;辰島瑶子;福井史織;江頭伸昭;光安正平;坂井真樹;桑城貴弘;井無田麻衣子;大石了三;石川修平
• 通讯作者: 石川修平