パッチクランプ法を用いたグルタミン酸トランスポーター制御機構の電気生理学的解析

膜片钳法谷氨酸转运蛋白控制机制的电生理分析

• 批准号: 08770069
• 负责人: 酒井 規雄
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Kobe University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08770069/
• 关键词: 神経伝達物質トランスポーター; プロテインキナーゼC; 神経変性疾患; 神経細胞死; 神経可塑性

神経変性疾患におけるグリア細胞局在型グルタミン酸トランスポーターの変化神経変性疾患の細胞死の機構を明らかにするためにパーキンソン病・及び、多系統萎縮症患者死後脳におけるグリア細胞局在型グルタミン酸トランスポーター(GLT-1,GLAST-1)の変化をそれぞれのポリクローナル抗体を用いて検討した。パーキンソン病では、GLT-1,GLAST-1の免疫反応は有意な変化を認めなかったが、多系統萎縮症では黒質において両免疫反応は低下しており、グリア細胞局在型グルタミン酸トランスポーターの減少が認められた。多系統萎縮症の神経細胞死にグリア細胞局在型グルタミン酸トランスポーターの関与が示唆された。神経伝達物質トランスポーターのリン酸化による制御と細胞骨格蛋白との関与セロトニントランスポーター(SET)の取り込み活性に対する各種リン酸化酵素活性化剤、阻害剤また、各種蛋白質脱リン酸化酵素阻害薬の効果を検討した。また、SETのCキナーゼ(PKC)の予想リン酸化部位を他のアミノ酸に置換した変異トランスポーターを作製し、それら薬物の効果を検討した。これらの結果により、PKCの活性化あるいは1型、2A型脱リン酸化酵素の阻害により、SET活性は有意に抑制され、その効果はPKCによるSETの直接のリン酸化によるものではないことが示唆された。また、SET活性はリン酸化を介し、細胞骨格蛋白であるアクチンの重合、解離によっても制御されることがことが示唆された。

In the case of neurodegenerative diseases, the cellular death mechanism of neurodegenerative diseases is clearly identified. In the case of multiple system atrophy patients, the cellular death mechanism of neurodegenerative diseases (GLT-1,GLAST-1) is identified by antibodies. The immune response of GLT-1,GLAST-1 in multiple system atrophy is reduced. The immune response of GLT-1, GLAST-1 is reduced. Multiple System Atrophy (MSA) is a disease characterized by neuronal cell death, cell division, and cell death. To investigate the effects of inhibitors and inhibitors of various kinds of protein deacidification enzymes on the activation and inhibition of protein deacidification enzymes in relation to the activity of SET. The effect of the acid substitution on the desired acid site of the SET (PKC) is discussed. As a result, PKC activity is inhibited by type 1 and type 2A deacidifying enzymes. SET activity is inhibited by type 1 and type 2A deacidifying enzymes. The activity of SET is regulated by the regulation of the recombination and dissociation of cellular proteins.

项目成果

Sakai,N.: "Electrophysiological and pharmacological characteristics of ionotropic glutamate receptors in medial vestibular nucleus neurons : A whole cell patch clamp study in acutely dissociated neurons." Jpn.J.Pharmacol.72. 335-346 (1996)

Sakai，N.：“内侧前庭核神经元离子型谷氨酸受体的电生理学和药理学特征：急性分离神经元的全细胞膜片钳研究。”

Itouji,A.: "Neuronal and glial localization of GABA transporters(GAT1 and GAT3)in the rat cerebellum." Mol.Brain.Res.37. 309-316 (1996)

Itouji,A.：“大鼠小脑中 GABA 转运蛋白（GAT1 和 GAT3）的神经元和胶质细胞定位。”

Obata,H.: "GABA ergic neurotransmission in rat taste buds ; Immunocytochemical study for GABA transporter subtypes" Mol.Brain.Res.(in press.). (1997)

Obata,H.：“大鼠味蕾中的 GABA 能神经传递；GABA 转运蛋白亚型的免疫细胞化学研究”Mol.Brain.Res.（正在出版）。

Koga,T.: "Presynaptic and Ca^<2+>-independent PKC subspecies modulates NMDAR1 current." Neuro Report. 7. 477-480 (1996)

Koga,T.：“突触前和 Ca^2 独立的 PKC 亚种调节 NMDAR1 电流。”

Sakai,N.: "Modulation of serotonin transporter activity by a PKC activator and an inhibitor of type 1 and 2A serine/threonine phophatases." J.Neurochem.(in press.). (1997)

Sakai,N.：“通过 PKC 激活剂和 1 型和 2A 型丝氨酸/苏氨酸磷酸酶抑制剂调节血清素转运蛋白活性。”