ラット小腸粘膜および培養細胞中のGlutathioneS-transferaseの研究

大鼠小肠粘膜及培养细胞中谷胱甘肽S-转移酶的研究

• 批准号: 08770402
• 负责人: 佐藤 隆
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Toho University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08770402/
• 关键词: GlutathioneS-transferase(GST); 小腸粘膜; 発癌物質; 免疫組織化学

ラットを使用し、発癌物質を経口投与した場合の小腸でのGlutathioneS-transferase(GST)の変化を経時的に免疫組織化学的に検討した。さらに小腸粘膜内のGSTの酵素活性を測定した。発癌物質はDiethylnitrosamine(DEN)を含む水を自由飲水させ、3日、1・4・8週目に、全小腸を摘出した。口側の上部小腸と肛側の下部小腸をそれぞれ一部ホルマリン固定し、残りを各々scrapingして粘膜部分を分離、ホモジネートを作製後遠心してサイトゾールを得た。GST活性は1-chloro-2,4-dinitrobenzeneを基質として分光学的方法で測定した。上部小腸では3日、1・4週でコントロール群と比べGST活性に変化が見られなかったが。8週で著明な上昇が見られた。しかし、下部小腸では経過中GST活性に変化は見られなかった。そこで各々のホルマリン固定標本を用いて、GST各アイソザイムの分布を免疫組織化学的に検討した。正常コントロールでは上部小腸でGST-Ya,Ypが陽性、下部小腸でGST-Yaが陰性、GST-Ypのみ陽性を示した。同様にDEN投与8週ではGSTアイソザイムの分布および染色強度に変化は見られず、上部小腸のcryptの細胞核のGST-Yp染色強度の増加傾向をわずかにみとめた。以上より、発癌物質DENに対する生体の防御反応の一つとして、上部小腸のGST、特にGST-Ypが重要な役割を成している。

Youdaoplaceholder0 the に immunohistochemical に検 of <s:1> immunohistochemical た of <s:1> <s:1> in the た small intestine で with <s:1> glutathions-transferase (GST) <s:1> transformation を was carried out using ラットを and carcinogenic substances を. The activity of <s:1> GST czyme in the さらに small intestinal mucosa を determination た た. Carcinogenic substance を Diethylnitrosamine(DEN)を containing む water を free drinking water させ, 3 days, 1 · 4 · 8 weeks に, whole small intestine を extracted た. Mouth side の upper small intestine と anus side の lower intestine を そ れ ぞ れ a ホ ル マ リ ン fixed し and residual り を each 々 scraping し て mucosal part を separation, ホ モ ジ ネ ー ト を system before telecentric し て サ イ ト ゾ ー ル を た. The activity of GST was determined by <s:1> 1-chloro-2,4-dinitrobenzeneを matrix と <s:1> て て by the optical method で of <s:1> た. The upper small intestine で は 3, 1, 4 weeks で コ ン ト ロ ー と ル group than に べ GST activity - the が see ら れ な か っ た が. At 8 weeks, で indicates that な rises が see られた. The に changes in the activity of GST in the で で passage of the lower small intestine are found in られな った った. そ こ で each 々 の ホ ル マ リ ン fixed specimens を い て, GST ア イ ソ ザ イ ム の distribution を immunohistochemical に beg し 検 た. Normal コ ン ト ロ ー ル で は upper small intestine で GST - Ya, Yp が, lower intestine で GST - Ya が negative, GST - Yp の み positive を shown し た. With others in に DEN and eight weeks with で は GST ア イ ソ ザ イ ム の distribution お よ び staining intensity に variations change は see ら れ ず, the upper small intestine の crypt の nucleus の GST Yp staining intensity の rights and tendency を わ ず か に み と め た. Above よ り, 発 carcinoma DEN に す seaborne る raw body の defense against 応 の a つ と し て, the upper small intestine の GST, に GST - cut を Yp が important な service into し て い る.