In situハイブリダイゼーションによるプロスタグランジンレセプターの眼内局在

通过原位杂交进行前列腺素受体的眼内定位

• 批准号: 08771487
• 负责人: 高松 倫也
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08771487/
• 关键词: プロスタグランジンE; In situハイブリダイゼーション; RHAプローブ; マウス

1.研究目的:プロスタグランジンとその誘導体の眼内での作用部位を解明するために、そのレセプターの局在を研究、解明する。2.方法と対象:杉本らの方法(1994年)に準じて、プロスタグランジンEレセプターの各サブタイプに対してIn situハイブリダイゼーションを行った。(1)マウスのプロスタグランEの各サブレセプターであるEP1,EP2,EP3,EP4の各レセプターに対するDNAテンプレートと放射性同位元素を結合させた核酸を用いてRNAプローブを調整する。(2)8週齢のオスマウスの眼球の凍結乾燥切片を作成する。(2)作成した凍結乾燥切片に対してRNAプローブをもちいてIn situハイブリダイゼーションを行う。(4)ハイブリダイゼーション後の切片に乳剤感光を行い、感光したRNAプローブの結合部位を観察することによって各レセプターサブタイプの局在を同定する。3.結果:毛様体において、4つのすべてのサブタイプのレセプターのシグナルがみられた。特に、EP1とEP4のレセプターサブタイプは、毛様体筋に相当する部分で強いシグナルがみられた。その他の眼組織では、網膜の内顆粒層で、EP3およびEP4のレセプターサブタイプの弱いシグナルがみられた。4.結論:毛様体筋の弛緩収縮は房水動態、ことにブドウ膜強膜流出路に対して重要な影響を及ぼすと考えられる。EP4サブタイプはアデニル酸シクラーゼと結合することが知られており、毛様体筋の弛緩に影響していると考えられる。一方、EP1サブタイプはカルシウムイオンの流入や細胞内カルシウムイオンの遊離によって、毛様体筋の収縮を促すと考えられる。毛様体で、EP1とEP4の両方のサブタイプに強いシグナルがみられたことから、プロスタグランジンEが毛様体筋の収縮と弛緩の双方に影響して、特にブドウ膜強膜流出路の房水流出の調節に関与している可能性が考えられた。

1. Research purpose: To understand the action site of prostatins and prostatins in the eye, and to study and understand the role of prostatins. 2. Method: The method of Sugimoto (1994) was used to analyze the relationship between the content and the quality of the products. (1)Each of EP1,EP2,EP3 and EP4 has its own DNA profile, binding to radioactive isotopes and regulation of RNA profiles. (2)8 A freeze-dried section of the eyeball was prepared. (2)In case of frozen dried sections, (4)After cutting, the milk is exposed to light, and the binding site of the RNA is observed. 3. Results: The hair is in the middle of the body, and the hair is in the middle of the body. In particular, EP1 and EP4 have been selected for the first time. Other eye tissues, inner granular layer of retina, EP3, EP4, etc. 4. Conclusion: The relaxation and contraction of hair tendon have important influence on aqueous humor dynamics and membrane outflow pathway. EP4: The effect of hair relaxation on the skin and muscles On the other hand, EP1 is a kind of protein that can be used to stimulate the growth of human hair. The possibility of the regulation of aqueous humor outflow through the membrane outflow pathway of trichomes, EP1 and EP4 is examined.