c-mycによる熱ショックタンパク質70(hsp70)遺伝子の発現制御と細胞周期

c-myc 对热休克蛋白 70 (hsp70) 基因表达和细胞周期的调节

• 批准号: 08772076
• 负责人: 平 敬宏
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08772076/
• 关键词: c-myc; 転写制御; エンハンサー; 熱ショックタンパク質; 細胞周期; 癌遺伝子

1、hsp70遺伝子上のC-MYC複合体認識配列MYC Bの解析前年度までにhsp70遺伝子プロモーター上のC-MYC複合体認識配列MYC Bはエンハンサーとして機能するすることを報告した。今年度、更にこの配列がhsp70遺伝子のG1期での発現を担っているエンハンサーであることを明らかにした。すなわち、MYC Bに変異を導入したhsp70遺伝子プロモーターはG1期での発現がなくなること、MYC BをS期で発現するPCNA,cyclinA遺伝子プロモーターに連結すると新たにG1期に発現ピークが出現することから明らかとなった。2、MYC Bに結合するタンパク質因子の同定とcDNAクローニングMYC B配列は他のエンハンサーであるCAAT配列と一部重複して存在する。そこで、これらの配列に結合するタンパク質cDNAクローニングをまず酵母One-hybrid systemにより行った。得られたpositive clonesをさらにtwo-hybris systemによりC-MYCと結合するものを更にスクリーニングしたところ、得られたcDNAはラットCBF-Cのヒトホモログであった。CBFはA,B,Cの3量体より構成され、CBF-Bが直接CAAT配列に結合する。酵母内にはCBF-A,B,Cのホモログが存在するために、酵母内でC-MYC,CBF-C,CBF-A,B酵母ホモログの結合によりCBF-Cが単離されたと考えられる。C-MYC,各CBFを大腸菌内で発現後、精製したタンパク質を用いて、in vitroで結合実験を行ったところ、C-MYCはCBF複合体形成を拮抗的に阻害することが判明した。CAAT配列はhsp70遺伝子の転写を正に制御するが、ここにC-MYCを導入すると転写抑制する現象を一致する。これはhsp70発現制御に関して重要な知見といえる。

1. The C-MYC complex on the hsp70 gene is recognized and arranged MYC B in the year before the analysis. The C-MYC complex on the hsp70 gene is recognized and arranged MYC B in the year before the analysis. This year, the new arrangement of hsp70 gene G1 phase of the development of the new generation MyC B, PCNA, cyclin A, hsp70, hsp70, hsp 70, 2. MYC-B binding sequence is identical to cDNA binding sequence, MYC-B binding sequence is identical to cDNA binding sequence, and CAAT binding sequence is identical to cDNA binding sequence. This is a One-hybrid system that combines all kinds of DNA sequences. C-MYC is the most important component of the two-hybris system. CBF is composed of A,B,C and CBF-B is directly CAAT. CBF-A,B,C and C are present in yeast, and C-MYC,CBF-C,CBF-A,B are present in yeast. C-MYC, CBF in Escherichia coli after the development, purification, use, in vitro, the combination of C-MYC CBF complex formation and resistance to the harm identified CAAT alignment is consistent with HSP70 gene positive control, C-MYC import and write suppression. The hsp70 is the most important part of the system.

项目成果

Maeda, J.: "AMY-1, a novel C-MYC binding protein that stimulates transcription and transforming activities of C-MYC" Nature. (in press.). (1997)

Maeda, J.：“AMY-1，一种新型 C-MYC 结合蛋白，可刺激 C-MYC 的转录和转化活性”Nature。

Nagakubo, D.: "DJ-1, a novel oncogene product which transforms mouse NIH3T3 cells in cooperation with H-ras." Biochem. Biophy. Res. Comm.(in press.). (1997)

Nagakubo, D.：“DJ-1，一种新型癌基因产物，可与 H-ras 配合转化小鼠 NIH3T3 细胞。”

Taira, T.: "A novel G1/S-specific enhancer identified in the human heat shock protein 70 gene" J. Biol. Chem.(in press.). (1997)

Taira, T.：“在人类热休克蛋白 70 基因中鉴定出一种新型 G1/S 特异性增强子”J. Biol。

Tsuchiya, T.: "Ku antigen binds to Alu family DNA and represses transcription." J. Biol. Chem.(in press). (1997)

Tsuchiya, T.：“Ku 抗原与 Alu 家族 DNA 结合并抑制转录。”

Iida, M.: "Induction of apoptosis by MSSP, C-MYC binding proteins." Biol. Pharm. Bull.20. 10-14 (1997)

Iida, M.：“MSSP、C-MYC 结合蛋白诱导细胞凋亡。”