CaMキナーゼIIに特異的な阻害ペプチドの開発と応用

CaM激酶II特异性抑制肽的开发及应用

• 批准号: 08780573
• 负责人: 石田 敦彦
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Asahikawa Medical College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08780573/
• 关键词: CaMキナーゼII; 阻害ペプチド; cyclic ADP-ribose; Ca^<2+> release; PSD; グルタミン酸レセプター; Autoactivation

カルモデュリン依存性プロテインキナーゼII(CaMキナーゼII)の生理的役割を探る為、本酵素に高度に特異的な新規ペプチドAIPを開発し、これを用いて種々の生理的反応を詳細に解析した。本研究により、得られた主な知見は以下のとおりである。1、膵臓ランゲルハンス島β細胞のグルコース刺激によるインシュリン分泌反応についてAIPを系に添加して解析した。その結果、グルコース刺激の引金となる小胞体からのcyclic ADP-riboseによるCa^<2+>放出反応にCaMキナーゼIIが重要な役割を果たしていることが明らかとなった。2、CaMキナーゼIIは記憶のモデルとされるLTPに深く関わっていることが知られているが、この分子機構を探る為、シナプス後肥厚(PSD)におけるAMPAタイプグルタミン酸レセプターの種々のサブユニットのリン酸化をAIPを用いて解析した。その結果、PSDにおけるGluR1のCa^<2+>依存性のリン酸化にCaMキナーゼIIが重要な役割を果たしていることが示された。3、AIPによるCaMキナーゼIIの阻害機構を明らかにする為、本酵素の活性化機構を詳細に検討した。その結果、本酵素のThr^<286/287>の自己リン酸化がCa^<2+>/カルモデュリン非依存性活性の出現のみならず、全活性のfull-activationにも必須であることが明らかとなった。4、AIPの阻害力・特異性の向上を図る為、種々の残基の置換・欠失ペプチドを合成し、構造と機能の関係を検討した。本プロジェクトは現在、進行中である。

The enzyme is highly specific for the development of new enzyme selection protocols AIP, and the physiological response of the enzyme is analyzed in detail. This study was conducted in the following ways: 1. The analysis of AIP in β-cells stimulated by AIP secretion As a result of this, cyclic ADP-ribose is released from the small cell, CaM is released from the small cell, CaM is released from the small cell, and CaM is released from the small cell. 2. CaM II is deeply involved in the memory of LTP. However, it has been discovered that this molecular mechanism is explored and the acidity of AMPA's The results show that the PSD is sensitive to Ca^<2+> dependence of GluR1 on CaM ^<2+> and CaM ^<2 +>. 3. The inhibition mechanism of CaM II in AIP is discussed in detail. As a result, the enzyme's Thr^<286/287> self-acidification, Ca^<2+>/ 4. The relationship between resistance, specificity and function of AIP was discussed. This page is currently in progress.

项目成果

A.Ishida et al.: "Evidence that autophosphorylation at Thr-286/Thr-287 is required for full activation of calmodulin-dependent protein kinase II" Biochim. Biophys. Acta. 1311. 211-217 (1996)

A.Ishida 等人：“有证据表明 Thr-286/Thr-287 处的自磷酸化是钙调蛋白依赖性蛋白激酶 II 完全激活所必需的”Biochim。

Y.Hayashi et al.: "Calcium-and Calmodulin-Dependent Phosphorylation of AMPA Type Glutamate Receptor Subunits by Endogenous Protein Kinases in the Post-synaptic Density" Mol. Brain Res.(in press). (1997)

Y.Hayashi 等人：“突触后密度中内源蛋白激酶对 AMPA 型谷氨酸受体亚基的钙和钙调蛋白依赖性磷酸化”Mol。

A.Ishida et al.: "Novel Highly Specific and Potent Inhibitor of Calmodulin-dependent Protein Kinase II" Biochem. Biophys. Res. Commun.212. 806-812 (1995)

A.Ishida 等人：“新型高度特异性和有效的钙调蛋白依赖性蛋白激酶 II 抑制剂”Biochem。

S.Takasawa et al.: "Requirement of Calmodulin-dependent Protein Kinase II in Cyclic ADP-ribose-mediated Intracellular Ca2+Mobilization" J. Biol. Chem.270. 30257-30259 (1995)

S.Takasawa 等人：“环 ADP 核糖介导的细胞内 Ca2 动员中钙调蛋白依赖性蛋白激酶 II 的要求”J. Biol。

石田敦彦 他: "Ca^<2+>依存性プロテインキナーゼの構造と機能" CLINICAL NEUROSCIENCE. 14. 171-174 (1996)

Atsuhiko Ishida 等人：“Ca 2+ 依赖性蛋白激酶的结构和功能”临床神经科学。14. 171-174(1996)。