グルタミン酸受容体遺伝子GluR1,2の発現制御機構を司るシスエレメントの同定

谷氨酸受体基因 GluR1,2 表达控制机制的顺式元件的鉴定

• 批准号: 08780759
• 负责人: 岡戸 晴生
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Tokyo Metropolitan Institute for Neuroscience
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08780759/
• 关键词: グルタミン酸受容体; アデノウイルス; プロモータ; トラニスジェニックマウス; カルシウム結合タンパク

1、初代培養細胞にGluR2(α2)遺伝子発現の上流ゲノム領域の下流にレポータ遺伝子をもつプラスミドをリポフェクション法により一過性にトランスフェクションして、神経細胞特異的に機能しているゲノム領域を検索し、上流ゲノム領域500bpで神経細胞で繊維芽細胞株NIH3T3の10倍強く機能することを見い出した。さらに、転写開始領域を含む100bpが機能部位であることを明らかにした。現在ゲルシフトアッセイによって、原因結合蛋白の同定を試みている。2、GluR2(α2)遺伝子の上流ゲノム領域6Kbpにさらにイントロン、下流のゲノム部分を含めたコンストラクトを作製し、トランスジェニックマウスを作製中である。現在より時間のかからないトランジェントトランスジェニックマウスを系を導入することを試みている。3、GluR1,2の発現制御を細胞レベルで同時に明らかにするために、ラット大脳皮質のGluR1,2mRNAの発現を細胞レベルで解析し、GluR1^+/GluR2-はparvalbuminと、GluR1^+/GluR2^+はcarbindinD28Kと共存することを、3重染色法によって確かめた。今後この共存関係の機能的意義を追求したい。4、プロモータの解析にアデノウイルスを試み、げっ歯類の脳の中枢神経系の各部に外来遺伝子を導入することに成功した。

1, original culture cell に GluR2 (alpha 2) posthumous son 伝 発 is の upper ゲ ノ の ム field dirty に レ ポ ー タ posthumous son 伝 を も つ プ ラ ス ミ ド を リ ポ フ ェ ク シ ョ ン method に よ り transient に ト ラ ン ス フ ェ ク シ ョ ン し て, god 経 cell specific に し て い る ゲ ノ ム field を 検 し and high-class ゲ ノ ム field 500 bp で 経 fine god The で繊 germ bud cell line NIH3T3 has a <s:1> 10 times stronger く function する とを とを see く for く た. さ ら に, planning to write started を で む 100 bp が function parts あ る こ と を Ming ら か に し た. Now ゲ を シフトアッセ によって によって によって, cause-binding protein <s:1> sync を try みて る る る. 2, GluR2 (alpha 2) posthumous son 伝 の upper ゲ ノ ム area 6 KBP に さ ら に イ ン ト ロ ン, obscene の ゲ ノ ム part contains を め た コ ン ス ト ラ ク ト を as し, ト ラ ン ス ジ ェ ニ ッ ク マ ウ ス を cropping systems in で あ る. Now よ り time の か か ら な い ト ラ ン ジ ェ ン ト ト ラ ン ス ジ ェ ニ ッ ク マ ウ ス を department を import す る こ と を try み て い る. 3, GluR1, 2 の 発 now suppression を cells レ ベ ル で simultaneously に Ming ら か に す る た め に, ラ ッ ト big 脳 cortex の GluR1, 2 mrna の 発 now を cells レ ベ ル で analytical し, GluR1 ^ + / GluR2 は parvalbumin と, GluR1 ^ + / GluR2 ^ + は carbindin D28Kと coexists with する とを とを and triple staining によって confirms めた めた. In the future, the significance of <s:1> coexistence is related to the <s:1> function を pursuit た た. 4, プ ロ モ ー タ の parsing に ア デ ノ ウ イ ル ス を み, げ っ 歯 class の 脳 の central ministries god 経 is の に foreign heritage 伝 son を import す る こ と に successful し た.

项目成果

近藤真啓: "Changes in the expression level of glatamite recptor subnits" Japanese Journal of Physiology. 46. S88- (1996)

Masaki Kondo：“玻璃蛋白受体亚基表达水平的变化”日本生理学杂志 46. S88- (1996)。

近藤真啓: "Combinations of ANPA Receptor Subunit Expression in individual cortical - Neurons Correlate with Expression of Specific Calcium-Binding proteins" Journal of Nuuroscience. 17. 1570-81 (1997)

Masaki Kondo：“个体皮质中 ANPA 受体亚基表达的组合 - 神经元与特定钙结合蛋白的表达相关”Nuuroscience 杂志 17. 1570-81 (1997)。

岡戸晴生: "Plausible clillecnliel mechanism of adenovirus-mediated gene transfer into knious reginy of tenfral advance system" Neurosclence Research Suppl.20. 2801- (1996)

Haruo Okado：“腺病毒介导的基因转移到 Tenfral 高级系统的合理机制” Neurosclence Research Suppl.2801-（1996）。

岡戸晴生: "Gene transfer into neurons system using an adenovirus vector." Japanese Journal of Physiology. 46. S229- (1996)

Haruo Okado：“使用腺病毒载体将基因转移到神经元系统。”日本生理学杂志 46. S229-（1996）