グルタミン酸受容体遺伝子の特異的発現制御を司るシスエレメントの同定

控制谷氨酸受体基因特异性表达的顺式元件的鉴定

基本信息

项目摘要

GluR1遺伝子の上流3kbpのコンストラクトについては、8系統のマウスが得られ、脳での発現を解析した。T199は海馬CAl-3、海馬台、MHb、視床、T201は主に大脳皮質体性感覚野、T206は小脳顆粒細胞、血管、中隔野、MHbに発現を認めた。T205については海馬、大脳皮質、上丘、小脳顆粒細胞で発現を認めた。S77は大脳皮質体性感覚野に発現するというT201と非常に類似した発現パターンを示した。このことは、GluR1遺伝子の上流3kbpのコンストラクトは大脳皮質体性感覚野で機能する特徴をもっていることを示唆している。また、このパターンは内在性のGluR1の発現パターンとは異なることから、内在性のGluR1の発現パターンを再現するためには、さらに広いゲノム領域が必要であることが明らかとなった。GluR2遺伝子の転写制御機能もトランスジェニックマウスを用いて解析した。第一エクソンの5'領域を含む6.1kbpでは、小脳顆粒細胞で発現があるものが、8系統中2系統検出された。また、1系統では、海馬の歯状回では発現を認めたが、CA領域での発現は少なかった。内在性のGluR2遺伝子はプルキンエ細胞、海馬CA領域に強い発現があるので、この6.1kbpは、内在性のパターンを再現するのに不十分である。そこで第一イントロンまでを含む6.9kbpのコンストラクトを作製し、トランスジェニックマウスを作製した。8系統中7系統で海馬CA1、歯状回において発現を認めた。さらに、大脳皮質感覚領においてCalbindinD28陽性細胞でGluR2(+)、parvalbumin陽性細胞でGluR2(-)という特徴が再現されていることを2重染色法を用いて確かめた。したがって、第一イントロンを含む0.8kbpは細胞タイプ特異的な発現に重要であることが明らかとなった。
GluR1 posthumous son 伝 の upper 3 KBP の コ ン ス ト ラ ク ト に つ い て は, 8 system の マ ウ ス が have ら れ, 脳 で の 発 now を parsing し た. T199 <s:1> hippocampal CAl-3, hippocampal platform, MHb, optic bed, T201 <s:1> main に large 脳 dermatisome 覚 field, T206 <s:1> small 脳 granulosa cells, blood vessels, septum field, MHbに present を cognition めた. T205に に に て て を を in the hippocampus, large 脳 cortex, superior colliculus and small 脳 granulosa cells で show を recognition めた. S77 は big 脳 skin plastid sexy 覚 wild に 発 now す る と い う T201 と very similar し に た 発 now パ タ ー ン を shown し た. こ の こ と は, GluR1 but 伝 の upper 3 KBP の コ ン ス ト ラ ク ト は big 脳 skin function of plastid sexy 覚 wild で す る, 徴 を も っ て い る こ と を in stopping し て い る. ま た, こ の パ タ ー ン は internality の GluR1 の 発 now パ タ ー ン と は different な る こ と か ら, internality の GluR1 の 発 now パ タ ー ン を reappearance す る た め に は, さ ら に hiroo い ゲ ノ が ム field necessary で あ る こ と が Ming ら か と な っ た. GluR2 's 伝 sub-rhymes 転 write the control function of <s:1> トラ トラ スジェニッ <s:1> ウスを ウスを ウスを use て て to analyze た た. First エ ク ソ ン の 5 'field contains を む 6.1 KBP で は, small 脳 granulosa cells で 発 now が あ る も の が, 8 system 2 system 検 さ れ た. ま た, 1 system で は, haima の 歯 gyrus で は 発 を now recognize め た が, CA で の 発 は now less な か っ た. Traces of internality の GluR2 伝 son は プ ル キ ン エ cells, hippocampal CA strong に い 発 now が あ る の で, こ の 6.1 KBP は, internality の パ タ ー ン を reappearance す る の に not quite で あ る. First イ そ こ で ン ト ロ ン ま で を contain む 6.9 KBP の コ ン ス ト ラ ク ト を as し, ト ラ ン ス ジ ェ ニ ッ ク マ ウ ス を cropping し た. Among the 8 systems, the 7 systems で hippocampal CA1 and 歯 gyrus にお て present を recognition めた. さ ら に, greater sense 脳 cortex 覚 に お い て CalbindinD28 positive cells で GluR2 positive (+), parvalbumin cells で GluR2 (-) と い う, 徴 が reappearance さ れ て い る こ と を 2 heavy staining を with い て か indeed め た. し た が っ て, first イ ン ト ロ ン を contain む 0.8 KBP は cells タ イ プ specific な 発 に now important で あ る こ と が Ming ら か と な っ た.

项目成果

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Okada H., Miwa A., Okabe S.: "Functional analysis of the regulatory regions for the GluR2 gene expression using transgenic mice"Japanese Journal of Physiology. Supple (in press). (2000)
Okada H.、Miwa A.、Okabe S.:“使用转基因小鼠对 GluR2 基因表达的调节区域进行功能分析”日本生理学杂志。
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