麹菌タカアミラーゼA遺伝子の転写制御因子に関する分子生物学的解析

曲霉塔卡淀粉酶A基因转录调节因子的分子生物学分析

基本信息

  • 批准号:
    09760080
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.41万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
  • 财政年份:
    1997
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1997 至 1998
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

糸状菌CCAAV結合蛋白質の精製とその遺伝子の取得;糸状菌A.nidulansの核内に存在するAnCPの精製法を再点検し、より回収率のよい条件の検討を行った。DNA最終的に約200倍の精製に成功した。酵母のCCAAT結合因子HAPのサブユニットをコードするHAP3遺伝子と相同性の高いhapC遺伝子が、オーストラリアのHynes博士らのグループにより偶然に取得された。同グループと共同でhapC遺伝子をもとにリコンビナント蛋白質を作製し解析を行ったところ、HAPCが,AnCPのサブユニットであることが明かとなった。AnCPは酵母HAP複合体ファミリーに属する転写促進因子であることが強く示唆された。デンプン応答エレメント及びその結合因子の解析;シス領域の解析の過程でCCAAT配列よりもさらに下流にデンプンによるTAAの誘導に関わるシスエレメントの存在が示唆されていた。タカアミラーゼAプロモーターの上流欠失変異の解析より、転写開始点上流の-214から-202の間の領域にデンプン応答に必要なシスエレメントの存在することが示唆された。また、ゲルシフト法およびDNaseIフットプリント法による解析から、さらにその下流の領域(-197から-174)に結合する因子の存在が示された。AnCP遺伝子の解析;HAPC以外のサブユニットHAPB,HAPEについても、大腸菌内で過剰発現に成功し、精製したりコンビナントタンパク質を用いて、CCAAT配列結合タンパク質の再構成に成功した。細胞内の局在、AnCPと相互作用する因子に関しても検討を行なったが、明瞭な結果を得るには至らなかった。転写制御因子の利用;転写因子の利用に関しては、詳細な結果を出すには至らなかった。
The purification of CCAAV-binding protein and the acquisition of protein from A.nidulans; the purification of AnCP from A.nidulans; and the study of the conditions for recovery. DNA was finally purified about 200 times more successfully. The yeast CCAAT binding factor HAP was accidentally obtained from the HAP3 gene and the highly identical HAP C gene. In the same way, we can analyze the protein production, HAPC and AnCP. AnCP yeast HAP complex is a strong promoter of HAP. The analysis of CCAAT binding factors and the analysis of CCAAT binding factors in different domains show that CCAAT binding factors exist in different domains. The analysis of the difference between the upper stream and the lower stream at the start point of writing is carried out in the field between-214 and-202. The presence of the factor in the downstream domain (-197-174) is indicated by the presence of the factor in the downstream domain (-174). Analysis of AnCP gene; HAPB,HAPE,HAPE, HAPE, In the cell, AnCP and interaction factors are involved in the study of behavior and results. The use of control factors; the use of control factors related to, and detailed results of,

项目成果

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专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
S.Mimura: "Derepression of the xylanase-encoding cgxA gene of Chaetomium gracile Aspergillus nidulans." Microbilogical Research. 印刷中. (1999)
S.Mimura:“微毛壳曲霉的木聚糖酶编码 cgxA 基因的去抑制。微生物研究”(1999 年)。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
M.Kato: "An Aspergillus nidulans nuclear protein,AnCP,involved in enhancement of Taka-amylase A,binds to the CCAAT-containing taaG2,amdS and gatA promoters." Molecular and General Genetics. 254. 119-126 (1997)
M.Kato:“构巢曲霉核蛋白 AnCP 参与 Taka-淀粉酶 A 的增强,与含有 CCAAT 的 taaG2、amdS 和 gatA 启动子结合。”
  • DOI:
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    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
M.Kato: "An Aspergillus nidulans nuclear protein, AnCP, involved enhancement of Taka-amylase, A, binds to the CCAAT-containing taaG2, amdS and gatA promorters." Molecular and General Genetics. 254. 119-126 (1997)
M.Kato:“构巢曲霉核蛋白 AnCP 涉及 Taka-淀粉酶 A 的增强,与含有 CCAAT 的 taaG2、amdS 和 gatA 启动子结合。”
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    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
加藤雅士: "CCAAT配列による転写促進メカニズムは下等・高等真核生物において統一的に理解できるか? 進む糸状菌における広域転写促進因子-CCAAT配列結合タンパク質の解析" 化学と生物. 36. 72-74 (1998)
加藤正史:“在低等和高等真核生物中能否以统一的方式理解CCAAT序列的转录促进机制?丝状真菌中广谱转录启动子的分析进展——CCAAT序列结合蛋白”化学与生物学36。 72-74(1998)
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    0
  • 作者:
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加藤雅士: "CCAAT配列による転写促進メカニズムは下等・高等真核生物において統一的に理解できるか?進む糸状菌における広域転写促進因子-CCAAT配列結合タンパク質の解析" 化学と生物. 36. 72-74 (1998)
Masashi Kato:“可以在低等和高等真核生物中以统一的方式理解 CCAAT 序列的转录促进机制吗?丝状真菌中广谱转录启动子的进展 - CCAAT 序列结合蛋白的分析”化学与生物学 36。 72-74(1998)
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