糸状菌におけるマルトース輸送系の分子生物学的解析
丝状真菌麦芽糖转运系统的分子生物学分析
基本信息
- 批准号:07760080
- 负责人:
- 金额:$ 0.7万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
- 财政年份:1995
- 资助国家:日本
- 起止时间:1995 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
本研究は糸状菌における、マルトースの細胞内への取り込み機構を解析し、マルトースのシグナルの細胞内への伝達機構を解明することを目的としたものである。申請者らは糸状菌Aspergillus nidulansの細胞抽出液よりアフィニテイーカラム(アミロースカラム)に特異的に結合し、マルトースで溶出される分子量80Kのタンパク質の同定に成功した。1.このアミロースカラムを用いて、80Kタンパク質の精製に成功し、約20マイクログラムのタンパク質試料を得た。2.精製80Kタンパク質のN末端アミノ酸配列の決定を試みたところ、十分なタンパク質量の試料を用いても不成功に終わり、そのN末端が修飾されていることが示唆された。そこでこの80Kタンパク質をV8プロテアーゼで部分消化し、ペプチド断片を得、このペプチドを用いてアミノ酸シークエンシングを行った。その結果、一つのペプチドのN末端アミノ酸配列は、SHCQALVGDKILMと決定された。この配列は酵母のグリコーゲンブランチングエンザイムと非常に高い相同性を示した。このアミノ酸配列をもとにDNAを合成し、現在、Aspergillus nidulansの_cDNAライブラリーより、グリコーゲンブランチングエンザイム遺伝子をクローニングすることを検討している。3.プロトプラストを用いた放射性マルトース取り込みの解析4.あるいは可溶化・再構成系を用いたマルトーストランスポーターの解析については行うことができなかった。
The aim of this study is to analyze the intracellular mechanisms of bacterial growth and development, and to clarify the intracellular mechanisms of growth and development. The applicant successfully identified the specific binding and dissolution of Aspergillus nidulans cell extract with molecular weight of 80K. 1. The quality of the sample was successfully refined at 80K. About 20 K. 2. The determination of the N-terminal acid alignment of the purified 80K sample was unsuccessful in the determination of the N-terminal modification of the sample. The 80K quality of the product is partially eliminated, and the product is selected and used. As a result, the N-terminal acid alignment of a selected species, SHCQALVGDKILM, was determined. This arrangement of yeast is very similar to that of yeast. The DNA sequence of Aspergillus nidulans was synthesized and analyzed. 3. The analysis of radioactivity in the middle of the structure 4. The analysis of solubility in the middle of the structure
项目成果
期刊论文数量(3)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
加藤雅士: "麹菌の遺伝子利用の最先端" New Food Industry. 37. 17-24 (1995)
加藤正史:“曲霉的前沿基因利用”《新食品工业》37. 17-24 (1995)。
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Yoshino,S.: "Two family G xylase genes of Chaetomium gracile and expression in Aspergillus nidulans." Carrent genetics. (印刷中).
Yoshino, S.:“细毛壳的两个 G 家族木糖酶基因及其在构巢曲霉中的表达。”(正在出版)。
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Kato.M.: "Effeicient production of casoxin D,a bradykinin agonist peptide from derived human casein,by Bacillus brevis." Bioscience,Biotechnology and Biochemistry. 59. 2056-2059 (1995)
Kato.M.:“通过短芽孢杆菌从人酪蛋白中高效生产酪蛋白 D,这是一种缓激肽激动剂肽。”
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- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
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