麻疹ウイルスの感染補助因子の構造と機能の解析

麻疹病毒感染辅因子的结构与功能分析

• 批准号: 09771958
• 负责人: 村上 祐介
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09771958/
• 关键词: 補体レセプター; CD46; 麻疹ウイルス; 感染機構; 霊長類; 感染

霊長類の補体制御因子MCP(membranecofactorprotein,CD46)は細胞外領域にSCRと呼ばれる構造単位を4個とO結合型糖鎖が付加したSer-Thr(ST^A,ST^B,ST^C)に富むドメインを有し,SCRを介して補体制御活性のみならず麻疹ウイルス(MV)に対するレセプター活性を示す。これまでの研究で,下等な霊長類に属するマーモセット由来の細胞株(B95a)の高いMV感受性にはMCPだけが関与しているのではなく,その他の補助因子も必要である可能性を見出している。本研究の目的は,MCP以外の未知因子の実体を解明する手がかりを得ることにある。平成9年度から2年間にわたり得られた研究成果を要約すると,1) これまでに単離したB95a-MCPはSTがBタイプのアイソフォーム(ST^B体)であったため,強いMVレセプター活性を示す他のMCP分子種の存在を想定し,B95a細胞のcDNAライブラリーを再探索したところ,新たにST^C体を得ることに成功した。このST^C体を発現するCHO細胞株を樹立してMV感染について検討したところ,本邦でMVワクチンとして用いられているCAM株にはヒトMCPを発現するCHO細胞と同程度の感染性を示すが,MV野生株であるNagahata株には感染性を全く示さないことを明らかにした。2) 最近提唱されたヒトMCP上のMV結合部位を構成するアミノ酸残基群をB95a-MCPのST^C体に置換導入した変異体でも,Nagahata株に対するレセプターとしての機能は回復しないことを明らかにした。以上の知見は,B95a-MCPはST^C体ではCAM株に対するMVレセプターとして機能するが,ST^C体であってもその分子上にNagahata株との相互作用部位が存在しないため,MVレセプターとして機能し得ないことを示唆する。これは,B95a細胞におけるNagahata株の感染には,MCP以外の未知因子が関与すること,加えてこの因子がMCPの補助因子として働くのではなく,単独でNagahata株の感染レセプターとして機能する可能性を強く示唆するものであった。

MCP(membrane cofactor protein, CD46) is an extracellular domain protein that contains four O-binding glycoproteins (ST^A,ST^B,ST^C) that are involved in the regulation of SCR activity and the regulation of SCR activity (MV). In this study, the possibility of high MV susceptibility to MCP in the cell line (B95a) derived from the lower growth category was revealed. The purpose of this study is to clarify the mechanism of unknown factors other than MCP. In the first two years of 2009, the research results were obtained. 1) The B95a-MCP gene was successfully isolated from the B95a-MCP gene (ST^B body), indicating the existence of other MCP molecular species, and the cDNA sequence of B95a cells was re-explored. The CHO cell lines that developed the ST^C strain were established to detect MV infection, while the CAM strain that developed the MCP in our country showed the same degree of infectivity in CHO cells, and the Nagahata strain showed full infectivity in MV wild strains. 2)Recently, the MV binding site on the MCP has been transformed into a new variant of B95a-MCP, and the function of Nagahata strain has been restored. The above findings indicate that B95a-MCP has the ability to interact with the ST^C strain on the molecular level of the CAM strain, and that the ST^C strain has the ability to interact with the MV strain. However, the infection of Nagahata strain B95a cells is related to unknown factors other than MCP, and the addition of such factors as MCP helper factors is not possible, but only the possibility of Nagahata strain infection is strong.

项目成果

Murakami,Y et al: "Molecular cloning of membrane cofactor protein(MCP;CD46)on B95a cel,an Epsren Barr rirus-transformed marmoset B cell the:B95a MCP is susceptible to infection by the CAM but not the Nagahata Strain of the measles virus." Biochemical Jour

Murakami,Y 等人：“B95a 细胞（Epsren Barr rirus 转化的狨猴 B 细胞）上膜辅因子蛋白（MCP；CD46）的分子克隆：B95a MCP 易受 CAM 感染，但不易被麻疹长畠株感染

Murakami,Y et al.: "Effect of mutations at the residnes R25,D27,P69,and N70 of B95a-MCP on receptor activities for the measles viruses Nagahata wild-type strain and CAM vaccine strain" International Journal of Moleculer Medicine. 3. 25-32 (1999)

Murakami,Y 等人：“B95a-MCP 残基 R25、D27、P69 和 N70 突变对麻疹病毒 Nagahata 野生型株和 CAM 疫苗株受体活性的影响”《国际分子医学杂志》。