麻疹ウイルスの感染補助因子の構造と機能の解析

麻疹病毒感染辅因子的结构与功能分析

• 批准号: 09771958
• 负责人: 村上 祐介
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09771958/
• 关键词: 補体レセプター; CD46; 麻疹ウイルス; 感染機構; 霊長類; 感染

霊長類の補体制御因子MCP(membranecofactorprotein,CD46)は細胞外領域にSCRと呼ばれる構造単位を4個とO結合型糖鎖が付加したSer-Thr(ST^A,ST^B,ST^C)に富むドメインを有し,SCRを介して補体制御活性のみならず麻疹ウイルス(MV)に対するレセプター活性を示す。これまでの研究で,下等な霊長類に属するマーモセット由来の細胞株(B95a)の高いMV感受性にはMCPだけが関与しているのではなく,その他の補助因子も必要である可能性を見出している。本研究の目的は,MCP以外の未知因子の実体を解明する手がかりを得ることにある。平成9年度から2年間にわたり得られた研究成果を要約すると,1) これまでに単離したB95a-MCPはSTがBタイプのアイソフォーム(ST^B体)であったため,強いMVレセプター活性を示す他のMCP分子種の存在を想定し,B95a細胞のcDNAライブラリーを再探索したところ,新たにST^C体を得ることに成功した。このST^C体を発現するCHO細胞株を樹立してMV感染について検討したところ,本邦でMVワクチンとして用いられているCAM株にはヒトMCPを発現するCHO細胞と同程度の感染性を示すが,MV野生株であるNagahata株には感染性を全く示さないことを明らかにした。2) 最近提唱されたヒトMCP上のMV結合部位を構成するアミノ酸残基群をB95a-MCPのST^C体に置換導入した変異体でも,Nagahata株に対するレセプターとしての機能は回復しないことを明らかにした。以上の知見は,B95a-MCPはST^C体ではCAM株に対するMVレセプターとして機能するが,ST^C体であってもその分子上にNagahata株との相互作用部位が存在しないため,MVレセプターとして機能し得ないことを示唆する。これは,B95a細胞におけるNagahata株の感染には,MCP以外の未知因子が関与すること,加えてこの因子がMCPの補助因子として働くのではなく,単独でNagahata株の感染レセプターとして機能する可能性を強く示唆するものであった。

Royal factor MCP 霊 long class の filling system, membranecofactorprotein, CD46 は extracellular に SCR と shout ば れ る tectonic 単 A を four と O lock type combined with sugar が pay し た Ser - Thr (ST ^ A, ST ^ B, ST ^ C) に rich む ド メ イ ン を し, SCR を interface し て complement The control activity of <s:1> みならず measles ウ を ス ス ス(MV)に against するレセプタ を を shows す. で こ れ ま で の study, inferior な に 霊 long found す る マ ー モ セ ッ ト origin の cell lines (B95a) の high い MV susceptibility に は MCP だ け が masato and し て い る の で は な く, そ の he の subsidy factor も で necessary あ る を likely see the し て い る. The objective of this study is, and the <s:1> unknown factors <e:1> other than MCP are を to clarify the する hand が を を を to る とにある とにある とにある. In the Heisei 9 fiscal year, ら, and in the 2 years, にわた にわた obtained られた research results を offer すると,1) こ れ ま で に 単 from し た B95a - MCP は ST が B タ イ プ の ア イ ソ フ ォ ー ム (ST) ^ B で あ っ た た め, strong い MV レ セ プ タ ー active を す his の MCP molecules exist の を し scenarios, B95a cell の cDNA ラ イ ブ ラ リ ー を to explore し た と こ ろ, new た に ST ^ C body を have る こ と に success Youdaoplaceholder0 た. こ の ST ^ C body を 発 now す る CHO cell lines を set し て MV infection に つ い て beg し 検 た と こ ろ, state で MV ワ ク チ ン と し て in い ら れ て い る CAM plants に は ヒ ト MCP を 発 now す る CHO cells と の infectious を and shown the same extent す が, MV wild strains で あ る Nagahata strains に は infectious を く and shown all さ な Youdaoplaceholder0 とを ら た に た た. 2) recently to sing さ れ た ヒ ト MCP の MV on combining site を constitute す る ア ミ ノ acid residues of を B95a - MCP の ST ^ C body に replacement import し た - variant で も, Nagahata strains に す seaborne る レ セ プ タ ー と し て の reply function は し な い こ と を Ming ら か に し た. Above の knowledge は B95a - MCP は ST ^ C body で は CAM plants に す seaborne る MV レ セ プ タ ー と し て function す る が, ST ^ C body で あ っ て も そ の molecule に Nagahata strains と の interaction part が exist し な い た め, MV レ セ プ タ ー と し て function し must な い こ と を in stopping す る. こ れ は B95a cell に お け る Nagahata strains の infection に は, MCP outside の unknown factor が masato and す る こ と, plus え て こ の factor が MCP の subsidy factor と し て 働 く の で は な く, 単 alone で Nagahata strains の infection レ セ プ タ ー と し て function す る strong possibility を く in stopping す る も の で あ っ た.

项目成果

Murakami,Y et al: "Molecular cloning of membrane cofactor protein(MCP;CD46)on B95a cel,an Epsren Barr rirus-transformed marmoset B cell the:B95a MCP is susceptible to infection by the CAM but not the Nagahata Strain of the measles virus." Biochemical Jour

Murakami,Y 等人：“B95a 细胞（Epsren Barr rirus 转化的狨猴 B 细胞）上膜辅因子蛋白（MCP；CD46）的分子克隆：B95a MCP 易受 CAM 感染，但不易被麻疹长畠株感染

Murakami,Y et al.: "Effect of mutations at the residnes R25,D27,P69,and N70 of B95a-MCP on receptor activities for the measles viruses Nagahata wild-type strain and CAM vaccine strain" International Journal of Moleculer Medicine. 3. 25-32 (1999)

Murakami,Y 等人：“B95a-MCP 残基 R25、D27、P69 和 N70 突变对麻疹病毒 Nagahata 野生型株和 CAM 疫苗株受体活性的影响”《国际分子医学杂志》。