粘膜免疫を誘導する経口ワクチンビークルとしてのE型肝炎ウイルス様粒子の研究

戊型肝炎病毒样颗粒作为口服疫苗载体诱导粘膜免疫的研究

• 批准号: 11770164
• 负责人: 新倉 昌浩
• 金额: $ 0.9万
• 依托单位: National Institute of Infectious Diseases
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11770164/
• 关键词: E型肝炎ウイルス; 経口ワクチン; 粘膜免疫; ウイルス様粒子

昨年度の研究からE型肝炎様ウイルス粒子(HEV-VLP)を形成するdORF2のC末端には、安定に抗原エピトープを挿入することができることが明らかとなり、12アミノ酸よりなる抗原エピトープを持つキメラVLPが大量に精製できるようになった。本年度はこのキメラVLPの性状と経口投与による免疫効果を検討するとともに、更に長いアミノ酸配列を挿入する可能性についても検討した。このキメラVLPは電子顕微鏡レベルで抗原エピトープのないHEV-VLPと同様の形態を示した。また、挿入エピトープに対する抗体によってキメラVLPが免疫沈降したことから、C末端に挿入したアミノ酸配列はVLP表面に露出していると考えられた。このキメラVLPを50μgづつ2週間おきに4回経口投与したところ、消化管洗浄液及び血清中に初回接種後2週目から抗原エピトープに対する特異的抗体が認められ、特に消化管洗浄液中には極めて高濃度の抗体が検出された。さらに、これらの抗体のアイソタイプを検討したところ、血清中では初回接種後8週目でもIgMと若干のIgAのみが認められたのに対し、消化管洗浄液中ではIgA、IgG1及びIgMが認められた。これらの結果は、キメラHEV-VLPを経口投与することにより、挿入した抗原エピトープに対する粘膜免疫を誘導できることを示している。これらの成績はJournal of Virologyに投稿中である。一方、HEV-VLPに挿入可能なアミノ酸の大きさを検討するため、12アミノ酸の抗原エピトープの更にC末端側に15アミノ酸よりなるHIVのV3ループ由来抗原エピトープを付加したところ、計27アミノ酸をC末端に持つキメラVLPが精製できた。この結果は、HEV-VLPは少なくとも2つ以上の抗原エピトープを付加してもVLPを形成できることを示し、その経口投与による強力な粘膜免疫誘導能と相まって将来的に有望な経口粘膜免疫用ビークルであると考えられた。

In last year's study, hepatitis E virus particles (HEV-VLP) formed dORF2 C-terminal particles, diazepam antigens, hepatitis E, hepatitis E, hepatitis E This year, the oral administration of VLP traits is related to immunization. The results show that there is a significant increase in the possibility that acid will be added. The VLP microphone, the antigen, the antigen, the HEV-VLP, the same type of display. The antibody, antibody, VLP immunoprecipitation, C-terminal immunoprecipitation, C-terminal immunoprecipitation, acid collocation, VLP surface exposure, antibody antibody, antibody antibody, antibody After 2 minutes of oral administration of 50 μ g VLP