アラキドン酸代謝酵素と細胞骨格の相互作用の解析

花生四烯酸代谢酶与细胞骨架相互作用分析

• 批准号: 11771448
• 负责人: 中谷 良人
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: Showa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11771448/
• 关键词: 細胞質ホスホリパーゼA_2; ビメンチン; プロスタグランジン; 相互作用タンパク質; C2ドメイン; カルシウムイオン

アラキドン酸代謝系の開始酵素である細胞質ホスホリパーゼA_2(cPLA_2)と細胞骨格系タンパク質であるビメンチンとの結合部位をFar-Western法で検索した結果、cPLA_2のC2ドメインとビメンチンのヘッドドメインを介することが明らかとなった。そこで、構成的にcpLA_2とビメンチンを発現し、細胞内カルシウムイオン濃度上昇にともないプロスタグランジンE_2を産生する細胞株であるラット線維芽細胞3Y1にビメンチンのへッドドメインのみの部分に相当するcDNAを遺伝子導入し高発現細胞株を樹立した。本細胞株をカルシウムイオノフォアA23187で刺激しアラキドン酸代謝反応を解析した。その結果、ビメンチンヘッドドメイン高発現株は親株細胞と比較してアラキドン酸遊離反応ならびにプロスタグランジンE_2合成反応が顕著に減弱した。本現象はビメンチンへッドドメインによるdominant negative効果のためであると考えている。

The results of Far-Western method for detecting the binding sites of cytosol and cytosol in the initiation enzymes of the acid metabolizing system were as follows: 1. The binding sites of cytosol and cytosol in the initiation enzymes of the acid metabolizing system of cPLA_2 (cPLA_2) were as follows: The expression of the cDNA gene was introduced into the cell line 3Y1, and the cell line was established. The cell line A23187 was stimulated to analyze acid metabolism. As a result, the expression of E_2 synthesis in the mutant cells was reduced compared with that in the parent cells. This phenomenon is the dominant negative effect of the negative effect.

项目成果

Nakatani Y., et al.: "Identification of a cellular protein that functionally interacts with the C2 domain of cytosolic phospholipase A_2α."J. Biol. Chem.. 275. 1161-1168 (2000)

Nakatani Y. 等人：“与胞质磷脂酶 A_2α 的 C2 结构域功能性相互作用的细胞蛋白的鉴定。J. Biol. 275. 1161-1168 (2000)