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軟骨成長因子エコジェニン/CTGFによる生体デザインを目指す研究

使用软骨生长因子 Ecogenin/CTGF 进行生物设计研究

基本信息

批准号：
13877311
负责人：
滝川正春
金额：
$ 1.09万
依托单位：
Okayama University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

项目摘要

・ヒト軟骨細胞様細胞株HCS-2/8では、低酸素下では、エコジェニン/CTGFのmRNAと蛋白の増加が起こり、MMPsとTIMPとの比がmRNA並びに蛋白レベルで上昇した。即ち、低酸素が軟骨組織のリモデリングを促し軟骨形成を促進することを示唆した。・エコジェニン/CTGFによる生体デザインを目指す一つの手法として、同因子の発現を転写レベルで調節する方法がある。そこで、軟骨由来HCS-2/8細胞におけるCTGFの構成的高発現を支えている領域を探索し、既知のTGF-β応答領域以外に新規のエレメントであるtranscription enhancer dominat in chondrocytes(TRENDIC)を見いだした。また、HCS-2/8細胞の核抽出液中にこのTRENDICに結合する軟骨特異的核内因子が存在することを見いだした。さらに、HCS-2/8細胞のcDNA発現ライブラリーを作成し、TRENDICと結合するタンパク質を3種類クローニングした。・CTGFは成長軟骨細胞に対しては分化を肥大化まで促進するが、関節軟骨細胞に対してはプロテオグリカンやII型コラーゲン合成を促進するものの肥大化までは促進しないことを見いだし、内軟骨性形成だけでなく関節軟骨の形成にも有用であることを示した。・骨折時に肥大軟骨細胞だけでなく、幼弱な骨芽細胞がエコジェニン/CTGFを発現することから同因子を膜性骨化を促進する手段としても用い得ることを示した。・エコジェニン/CTGFに特徴的な4つのモジュールについて各モジュール毎の組み換え体蛋白質を、Brevibacillus choshinensisを用いて作成し、軟骨細胞、血管内皮細胞等に対する作用を検討し、モジュール毎に異なる生物活性があることを見いだした。以上の知見はエコジェニン/CTGFにより生体デザインを目指すための萌芽的研究として貴重な情報を提供したものと言える。

・Hydro chondrocyte cell line HCS-2/8では, low acid hormone HCS-2/CTGF mRN The increase of A protein and the increase of MMPs and TIMP are higher than that of mRNA and protein. That is, the cartilage tissue with low acid content is stimulated by the cartilage formation and the cartilage formation is promoted.・Economic/CTGF biotech Technique is the same as the method of adjusting the method of the same factor. Exploring the field of Takaharu's current branch consisting of HCS-2/8 cells derived from cartilage and CTGF Transcription of new regulations outside the field of known TGF-β response enhancer dominat in chondrocytes(TRENDIC)を见いだした. In the nuclear extract of HCS-2/8 cells, TRENDIC binds to the cartilage-specific nuclear factor.さらに, HCS-2/8 cells' cDNA 発成ライブラリーを, TRENDIC's combination of 3 types of クローニングした.・CTGF is used to promote the differentiation and hypertrophy of chondrocytes and to promote the growth and differentiation of articular chondrocytes. Adult promotion, hypertrophy, promotion of growth, growth promotion, inner softness Bone formation and articular cartilage formation are useful.・Hypertrophied chondrocytes and weak osteoblasts during fractures (CTGF) The same factor is used to promote membranous ossification and the method is used to express it.・エコジェニン/CTGFに特徴's な4つのモジュールについてeach モジュール毎の集团みchangeえbodyproteinを、Brvibacillus Choshinensis is made of いて, chondrocytes, vascular endothelial cells, etc. It has a に対する effect and a を検し, a モジュール毎にisoなるbioactive があることを见いだした. The above information is provided by the research on the germination of the knowledge and knowledge of CTGF and the precious information provided by CTGF.