軟骨成長因子エコジェニン/CTGFによる生体デザインを目指す研究

使用软骨生长因子 Ecogenin/CTGF 进行生物设计研究

• 批准号: 13877311
• 负责人: 滝川 正春
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Okayama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-13877311/
• 关键词: 結合組織成長因子(CTGF); エコジェニン; 遺伝子発現; 軟骨細胞; シスエレメント; 低酸素; 骨折治癒; 組み換え体タンパク質; MMPs

・ヒト軟骨細胞様細胞株HCS-2/8では、低酸素下では、エコジェニン/CTGFのmRNAと蛋白の増加が起こり、MMPsとTIMPとの比がmRNA並びに蛋白レベルで上昇した。即ち、低酸素が軟骨組織のリモデリングを促し軟骨形成を促進することを示唆した。・エコジェニン/CTGFによる生体デザインを目指す一つの手法として、同因子の発現を転写レベルで調節する方法がある。そこで、軟骨由来HCS-2/8細胞におけるCTGFの構成的高発現を支えている領域を探索し、既知のTGF-β応答領域以外に新規のエレメントであるtranscription enhancer dominat in chondrocytes(TRENDIC)を見いだした。また、HCS-2/8細胞の核抽出液中にこのTRENDICに結合する軟骨特異的核内因子が存在することを見いだした。さらに、HCS-2/8細胞のcDNA発現ライブラリーを作成し、TRENDICと結合するタンパク質を3種類クローニングした。・CTGFは成長軟骨細胞に対しては分化を肥大化まで促進するが、関節軟骨細胞に対してはプロテオグリカンやII型コラーゲン合成を促進するものの肥大化までは促進しないことを見いだし、内軟骨性形成だけでなく関節軟骨の形成にも有用であることを示した。・骨折時に肥大軟骨細胞だけでなく、幼弱な骨芽細胞がエコジェニン/CTGFを発現することから同因子を膜性骨化を促進する手段としても用い得ることを示した。・エコジェニン/CTGFに特徴的な4つのモジュールについて各モジュール毎の組み換え体蛋白質を、Brevibacillus choshinensisを用いて作成し、軟骨細胞、血管内皮細胞等に対する作用を検討し、モジュール毎に異なる生物活性があることを見いだした。以上の知見はエコジェニン/CTGFにより生体デザインを目指すための萌芽的研究として貴重な情報を提供したものと言える。

Others in cell lines, ヒ ト cartilage cells HCS - 2/8 で は, low acid element under で は, エ コ ジ ェ ニ ン / CTGF の mRNA と protein の rights and an が こ り, MMPs と TIMP と の than が mRNA and び に protein レ ベ ル で rise し た. That is, ち, low-acid が cartilage tissue リモデリ リモデリ グを グを promotes the formation of cartilage, を promotes する する とを and incites た. · エ コ ジ ェ ニ ン / CTGF に よ る raw body デ ザ イ ン を refers a つ す の gimmick と し て, with factor の 発 を now planning to write レ ベ ル で adjust す る method が あ る. そ こ で HCS - 2/8 of the origins, cartilage cells に お け る CTGF の constitute of high 発 now を え て い を る field exploring し, both known の TGF - beta 応 answer field outside に new rules の エ レ メ ン ト で あ る transcription enhancer dominat in chondrocytes(TRENDIC)を see を だ た た. ま の た, HCS - 2/8 cell nuclear extract に こ の TRENDIC に combining す る cartilage specific exist within the nuclear factor が す る こ と を see い だ し た. さ ら に, HCS - 2/8 cell の cDNA 発 now ラ イ ブ ラ リ ー を し, consummate TRENDIC と combining す る タ ン パ ク qualitative を 3 kinds ク ロ ー ニ ン グ し た. , CTGF は growth cartilage cells に し seaborne て は differentiation を fat russsian ま で promote す る が, masato chondrocytes に し seaborne て は プ ロ テ オ グ リ カ ン や II コ ラ ー ゲ ン synthetic を promote す る も の の fat russsian ま で は promote し な い こ と を see い だ し, within cartilage formation だ け で な く masato の section cartilage formation に も useful で あ る こ と を shown し た. · に hypertrophy when fracture chondrocytes だ け で な く, indecisive な bone bud cells が エ コ ジ ェ ニ ン / CTGF を 発 now す る こ と か ら with factor を membranous ossification を promote す る means と し て も use い る こ と を shown し た. · エ コ ジ ェ ニ ン / CTGF に な 4 of 徴 つ の モ ジ ュ ー ル に つ い て each モ ジ ュ ー ル their の group み を, Brevibacillus え body protein Choshinensis を with い て made し, cartilage cells, endothelial cells and に す seaborne る role を beg し 検, モ ジ ュ ー ル their に different な る bioactive が あ る こ と を see い だ し た. Above の knowledge は エ コ ジ ェ ニ ン / CTGF に よ り raw body デ ザ イ ン を refers す た め の germination studies と し て な intelligence を provide valuable し た も の と said え る.

项目成果

Gen Yoshimichi: "CTGF/Hcs24 interacts with the cytoskeletoal protein actin in chondrocytes"Biochem.Bophys.Res.Commun. 299. 755-761 (2002)

Gen Yoshimichi：“CTGF/Hcs24 与软骨细胞中的细胞骨架蛋白肌动蛋白相互作用”Biochem.Bophys.Res.Commun。

Takanori Eguchi, et al.: "A novel cis-element that enhances connective tissue growth factor gene expression in chondorocytic cells"Biochem.Biophys.Res.Commun.. 395. 445-451 (2002)

Takanori Eguchi 等人：“一种增强软骨细胞中结缔组织生长因子基因表达的新型顺式元件”Biochem.Biophys.Res.Commun.. 395. 445-451 (2002)

Seiji Kondo et al.: "Connective tissue growth factor increased by hypoxia may initiate angiogenesis in collaboration with matrix metalloproteinases"Carcinogenesis. (印刷中). (2002)

Seiji Kondo 等人：“缺氧增加的结缔组织生长因子可能与基质金属蛋白酶协同启动血管生成”（正在出版）。

Takashi Nishida, et al.: "CTGF/Hcs24, a hypertrophic chondrocyte specific gene product, stimulates the proliferation and expression of the cartilage phenotype but not hypertrophy or calcification or articular cartilage in culture"J.Cell.Physiol.. 192. 55-

Takashi Nishida 等人：“CTGF/Hcs24 是一种肥大软骨细胞特异性基因产物，可刺激软骨表型的增殖和表达，但不会刺激培养物中的肥大或钙化或关节软骨”J.Cell.Physiol.. 192. 55-

Satoshi Kubota et al.: "Novel mode of processing and secretion of connective tissue growth factor/ecogenin (CTGF/Hcs24) in chondrocytic HCS-2/8 cells"Bone. 29. 155-161 (2001)

Satoshi Kubota 等人：“软骨细胞 HCS-2/8 细胞中结缔组织生长因子/生态原蛋白 (CTGF/Hcs24) 的加工和分泌的新模式”Bone。