軟骨細胞分化の運命決定と関節防御ーＣＣＮ３分子機能の新局面

软骨细胞分化和关节保护的命运决定——CCN3分子功能的新方面

• 批准号: 13F03412
• 负责人: 滝川 正春
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Okayama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2013
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2013-04-01 至 2016-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13F03412/
• 关键词: 軟骨; CCN3/nov; 変形性関節症; 細胞外マトリックス; 低出力超音波パルス; プロテオグリカン; ルブリシン; 修復・再生; CCN3/Nov; 発現誘導; テネイシン; 軟骨形成; CCN3; 誘導性発現

１）CCN3の過剰発現がラット初代関節軟骨細胞の単層培養系で分化形質の発現を促進したので､関節軟骨ペレット培養系でもこの点を確認した。その結果、ペレットがCCN3過剰発現細胞では対照に比べやや大きくなり、組織標本を作製してトルイジンブルー染色を行うと、CCN3過剰発現ペレットでは対照に比べ、濃く染色されその領域も広かった。即ち、CCN3過剰発現でin vitroでの軟骨形成の促進がみられた。２）ヒト組み換えGST-CCN3タンパク質とその対照としてのヒト組み換えGSTタンパク質を徐放剤としてのgelatin hydrogelに吸着させ、ラット膝関節腔に投与し、その1日後にモノヨード酢酸（MIA）を同ラット膝関節に投与して、変形性関節症を誘発したところ、ヒト組み換えGST-CCN3タンパク質前投与群ではMIAによる関節軟骨のプロテオグリカンの分解が抑えられていることがトルイジンブルー染色で確認できた。また、tidemarkのintegrityも、GST-CCN3タンパク質の投与群では、対照のMIA単独処置群に比べ高かった。さらに、関節軟骨表層のマーカー分子であるlubricinは、MIA投与により変形性関節症を誘発すると消失するのに対し、CCN3タンパク質を前投与することにより、この消失が防御でき、lubricinが関節表層を綺麗に覆っていることが免疫染色で観察できた。すなわち、CCN3は関節軟骨の分化形質を促進する作用を有し、MIA誘導性実験的変形性関節症を防御する作用があることが明らかとなった。以上の結果は、前年度および前々年度に報告した結果と併せて一つの論文に纏めて、国際誌に投稿し、現在revise中である。

1) CCN3 の before turning 発 now が ラ ッ ト original masato section chondrocytes の 単 layer culture system で differentiation character の 発 を now promote し た の で, masato cartilage ペ レ ッ ト training department で も こ の point を confirm し た. そ の results, ペ レ ッ ト が CCN3 before turning 発 now cells で は polices according to に than べ や や big き く な り, tissue specimens を cropping し て ト ル イ ジ ン ブ ル ー dyeing line を う と, CCN3 turning 発 now ペ レ ッ ト で は as に is thicker than べ, seaborne く dyeing さ れ そ の field も hiroo か っ た. That is, ち, excessive CCN3 occurs でin vitroで <s:1> chondrogenesis <e:1> promotes がみられた. 2) ヒ み ト group in え GST - CCN3 タ ン パ ク qualitative と そ の polices according to と し て の ヒ み ト group in え GST タ ン パ ク qualitative を Xu Fang tonic と し て の gelatin Hydrogel に sorption さ せ, ラ ッ ト knee masato section cavity に cast with し, そ の 1st に モ ノ ヨ ー ド boggy acid (MIA) を ラ ッ ト knee masato section に cast with し て, - morphic masato knot を 発 lure し た と こ ろ, ヒ み ト group in え GST - CCN3 タ ン パ ク mass before and the group of で は MIA に よ る masato section cartilage の プ ロ テ オ グ リ カ ン の decomposition が え suppression ら れ て い る こ と が ト ル イ ジ ン ブ ル ー dyeing で confirm で き た. Youdaoplaceholder0, tidemark <s:1> integrity <e:1>, GST-CCN3タ タ パ パ the combination group of gamma and gamma で った, contrast <s:1> MIA単 the single treatment group に is higher than べ った. さ ら に, masato cartilage surface の マ ー カ ー molecular で あ る lubricin は, MIA cast and に よ り - morphic masato knot を 発 lure す る と disappear す る の に し, seaborne CCN3 タ ン パ ク qualitative を before and す る こ と に よ り, こ の disappear が defense で き, lubricin が masato section surface を beautiful に fu っ て い る こ と が immune dyeing で Youdaoplaceholder0 check で た た. す な わ ち, CCN3 は masato の section cartilage differentiation character を promote す る role を し, MIA induced be 験 variations of morphic masato knot を defense す る role が あ る こ と が Ming ら か と な っ た. は の results above, the former annual お よ び 々 annual に report before し た results と and せ て a つ の paper に bound め て, international volunteers contribute に し, now revise で あ る.

项目成果

関節軟骨におけるCCN3の新機能

CCN3在关节软骨中的新功能

• 发表时间: 2015
• 作者: ジャヌネ ダニーロ、Abd El-Kader;T.;青山絵理子、西田 崇、久保田聡、滝川正春
• 通讯作者: 青山絵理子、西田 崇、久保田聡、滝川正春

岡山大学歯学部先端領域研究センター

冈山大学牙科学院高级研究中心

CCN2は筋芽細胞の初期分化を促進するが、後期分化を抑制する。

CCN2促进成肌细胞的早期分化，但抑制晚期分化。

• 发表时间: 2014
• 作者: 西田 崇;久保田聡;青山絵理子;ダニーロ ジャヌネ;カレン ライアン;滝川正春
• 通讯作者: 滝川正春

Introducing CCN2 independent modules as a regenerative therapy for osteoarthritis and futher selecting the most suitable among them.

引入CCN2独立模块作为骨关节炎的再生疗法，并进一步在其中选择最合适的模块。

• 发表时间: 2015
• 作者: Abd El-Kader;T.;Nishida;T.;Hattori;T.;Aoyama;E.;Janune;D.;Hara;E. S.;Ono M.;Tabata;Y.;Kuboki;T.;Kubota;S.;Takigawa;M.
• 通讯作者: M.

Assessment of the regenerative effects of CCN2 independent modules on chondrocytes in vitro and osteoarturiritis models in vivo

评估CCN2独立模块对体外软骨细胞和体内骨关节炎模型的再生作用

• 发表时间: 2014
• 作者: Abd El Kdaer T;Kubota S;Nishida T;Hattori T;Aoyama E;Janune D;Hara ES;Ono M;Tabata Y;Kuboki T;Takigawa M
• 通讯作者: Takigawa M