軟骨細胞分化の運命決定と関節防御ーＣＣＮ３分子機能の新局面

软骨细胞分化和关节保护的命运决定——CCN3分子功能的新方面

基本信息

批准号：
13F03412
负责人：
滝川正春
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Okayama University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2013
资助国家：
日本
起止时间：
2013-04-01 至 2016-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

１）CCN3の過剰発現がラット初代関節軟骨細胞の単層培養系で分化形質の発現を促進したので､関節軟骨ペレット培養系でもこの点を確認した。その結果、ペレットがCCN3過剰発現細胞では対照に比べやや大きくなり、組織標本を作製してトルイジンブルー染色を行うと、CCN3過剰発現ペレットでは対照に比べ、濃く染色されその領域も広かった。即ち、CCN3過剰発現でin vitroでの軟骨形成の促進がみられた。２）ヒト組み換えGST-CCN3タンパク質とその対照としてのヒト組み換えGSTタンパク質を徐放剤としてのgelatin hydrogelに吸着させ、ラット膝関節腔に投与し、その1日後にモノヨード酢酸（MIA）を同ラット膝関節に投与して、変形性関節症を誘発したところ、ヒト組み換えGST-CCN3タンパク質前投与群ではMIAによる関節軟骨のプロテオグリカンの分解が抑えられていることがトルイジンブルー染色で確認できた。また、tidemarkのintegrityも、GST-CCN3タンパク質の投与群では、対照のMIA単独処置群に比べ高かった。さらに、関節軟骨表層のマーカー分子であるlubricinは、MIA投与により変形性関節症を誘発すると消失するのに対し、CCN3タンパク質を前投与することにより、この消失が防御でき、lubricinが関節表層を綺麗に覆っていることが免疫染色で観察できた。すなわち、CCN3は関節軟骨の分化形質を促進する作用を有し、MIA誘導性実験的変形性関節症を防御する作用があることが明らかとなった。以上の結果は、前年度および前々年度に報告した結果と併せて一つの論文に纏めて、国際誌に投稿し、現在revise中である。

1）在关节软骨颗粒培养系统中证实了这一点，因为CCN3的过表达促进了大鼠原发性关节软骨细胞的单层培养系统中分化性状的表达。结果，在过表达CCN3的细胞中，颗粒比对照组中的颗粒稍大，并且在制备组织样品并进行甲苯胺蓝色染色时，将沉淀物染色比对照组染色，并且该区域宽。也就是说，CCN3的过表达在体外促进了软骨形成。 2）人类重组GST-CCN3蛋白及其对照人重组GST蛋白被吸附到明胶水凝胶作为持续释放剂中，并在大鼠膝关节腔中施用，一天后，单二二乙酸（MIA）被施用到大鼠膝关节中，以引发骨骨关节。甲苯胺蓝色染色证实，MIA抑制了人类重组GST-CCN3蛋白预授予的组中蛋白聚糖的降解。另外，在GST-CCN3蛋白处理的基团中，Tidemark的完整性也高于单独对照MIA治疗的组。此外，关节软骨表面中的标记分子润滑素在MIA诱导骨关节炎时消失，而CCN3蛋白的预先给药可以防止这种失踪，并且通过免疫抑制剂表面覆盖了浮雕的表面。换句话说，已经揭示了CCN3具有促进关节软骨的区分特征的作用，并具有保护MIA诱导的实验性骨关节炎的作用。以上结果将上述结果概括为一篇论文，以及上一年和上一年报告的结果，并已提交给国际期刊，目前正在修订中。

项目成果

期刊论文数量（0）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

CCN3の抗線維化効果に伴うCCNファミリー遺伝子発現プロファイルの変化

CCN 家族基因表达谱的变化与 CCN3 的抗纤维化作用相关

DOI：
发表时间：
2013
期刊：
影响因子：
0
作者：
Janune Danilo、Abd El Kdaer;Tarek、久保田聡、西田　崇、服部高子、青山絵理子、窪木拓男、滝川正春
通讯作者：
Tarek、久保田聡、西田　崇、服部高子、青山絵理子、窪木拓男、滝川正春

関節軟骨におけるCCN3の新機能

CCN3在关节软骨中的新功能

DOI：
发表时间：
2015
期刊：
影响因子：
0
作者：
ジャヌネ　ダニーロ、Abd El-Kader;T.;青山絵理子、西田　崇、久保田聡、滝川正春
通讯作者：
青山絵理子、西田　崇、久保田聡、滝川正春

岡山大学歯学部先端領域研究センター

冈山大学牙科学院高级研究中心

DOI：
发表时间：
期刊：
影响因子：
0
作者：
通讯作者：

CCN2は筋芽細胞の初期分化を促進するが、後期分化を抑制する。

CCN2促进成肌细胞的早期分化，但抑制晚期分化。

DOI：
发表时间：
2014
期刊：
影响因子：
0
作者：
西田　崇;久保田聡;青山絵理子;ダニーロ　ジャヌネ;カレン　ライアン;滝川正春
通讯作者：
滝川正春

In vitro transfection with and expression of CCN family of genes. In Methods in Molecular Biology - CCN Proteins: Methods and Protocols (ed. M. Takigawa)

CCN 基因家族的体外转染和表达。

DOI：
发表时间：
2016
期刊：
影响因子：
0
作者：
Shimoda;M Maeda;K. Almofty;S. A. Singh;S. K. Eid;M. M. A. Sakaguchi;N.;Janune D. and Takigawa M.
通讯作者：
Janune D. and Takigawa M.