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RNA干渉を用いたCCN遺伝子ファミリーの包括的機能解析とその応用

RNA干扰技术对CCN基因家族的综合功能分析及其应用

基本信息

批准号：
16659511
负责人：
滝川正春
金额：
$ 2.05万
依托单位：
Okayama University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16659511/
关键词：
CCNファミリー CCN2 CTGF CCN1 Cry61 CCN3 Nov CCN4 WISP1 軟骨細胞細胞分化遺伝子発現 RNAi Cyr61 骨芽細胞

项目摘要

・マウス15日胚の頸骨成長板軟骨におけるCCNファミリータンパク質の局在を免疫染色で調べたところ、成長板に6つのメンバーすべての分布がみられた。しかし、その分布には差異があり、CCN2/CTGFとCCN5は肥大軟骨細胞層全域で強染し、CCN1/Cyr61とCCN4/WISP1は前肥大化軟骨細胞層で強染し石灰化層では染色性が減弱した。一方、CCN3と6は前肥大化軟骨細胞層で強染し、肥大軟骨細胞層で一旦染色性が減弱したのち再び石灰化層で染色性が増強した。・ヒト軟骨細胞様細胞株HCS2/8で、CCNファミリーのmRNAレベルをRT-PCRで調べたところ、すべてのメンバーが定量可能なレベルで発現していた。特に、CCN2が顕著に高く、続いてCCN1とCCN6が高発現していた。・マウス軟骨細胞、骨芽細胞および線維芽細胞の3種の細胞でCCNファミリーの発現を比較したところ、CCN2は軟骨細胞にほぼ特異的に、CCN4と6は軟骨細胞と骨芽細胞とで強く発現しており、CCN4は線維芽細胞で強い発現が見られた。CCN1およびCCN5の発現は3種の細胞間で大差は無かった。・軟骨培養細胞において、軟骨分化を促進させるデキサメサゾンにより、CCN2のみならずCCN1,4および5の発現も転写段階で亢進することを見出した。・CCN2のノックアウトマウスから初代軟骨細胞を分離培養し、他のCCNファミリーメンバーの発現を調べたところ、CCN3は著明に上昇し、CCN6は著明に低下していた。また、線維芽細胞の場合ではCCN1,3,4および6で著明な低下が見られた。即ち、これらのCCNメンバーの発現がCCN2により調節されていること、またその調節機構には組織特異性が見られることが明らかになった。

・The neck bone growth plate cartilage of the 15-day embryo of the masu is inをImmunostaining でべたところ, growth plate に 6 つのメンバーすべての distribution がみられた.しかし、そのDistribution にはDIFFERENCEがあり、CCN2/CTGFとCCN5は Hypertrophic chondrocyte layer full area でstrong stainingし、CC N1/Cyr61 and CCN4/WISP1 showed strong staining in the prehypertrophic chondrocyte layer and weakened staining in the calcareous layer. On the one hand, CCN3 and 6 showed strong staining in the prehypertrophic chondrocyte layer, and once the hypertrophic chondrocyte layer stained, it weakened and then in the calcareous layer, the staining became stronger.・Hydrochondrocyte cell line HCS2/8, CCNファミリーのmRNAレベルをR T-PCR can be adjusted easily and quantitatively, and it can be used quantitatively. Special, CCN2 and CCN2 are high and high, and CCN1 and CCN6 are high and high.・Machochondrocyte, bone bud cell およびline dimensional bud cell の3 kinds of cells でCCN ファミリーの発appear を comparison したところ, CCN2 は chondrocyte The cells are specific, CCN4 is specific for chondrocytes and osteoblasts, and the cells are strong and strong, and CCN4 is specific for fibroblasts. CCN1 and CCN5 have shown that there is no big difference between the three types of cells.・Cartilage culture cells, cartilage differentiation promotion, cartilage differentiation promotion, CCN 2のみならずCCN1, 4および5の発appears も転WRits the stage of で Hyperactivity することを见出した.・CCN2のノックアウトマウスからIsolation and culture of primary chondrocytes, other CCNファミリーメThe ンバーの発appears to adjust the べたところ, CCN3 shows the rising light, and CCN6 shows the rising light.また、The situation of line-dimensional bud cells is ではCCN1,3,4および6で明な下下が见られた. Namely, ち, これらのCCNメンバーの発成がCCN2により Regulation されていること, またその regulatory mechanism には tissue specific が见られることが明らかになった.

项目成果

期刊论文数量（30）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Effect of connective tissue growth factor (CCN2/CTGF) on proliferation and differentiation of mouse periodontal ligament-derived cells.

DOI：
10.1186/1478-811x-3-11
发表时间：
2005-10-05
期刊：
Cell communication and signaling : CCS
影响因子：
0
作者：
Asano M;Kubota S;Nakanishi T;Nishida T;Yamaai T;Yosimichi G;Ohyama K;Sugimoto T;Murayama Y;Takigawa M
通讯作者：
Takigawa M

CCNファミリー:その構造と機能。

CCN家族：其结构和功能。