細胞膜修飾剤を使った機能性タンパク質アンカーリング法による新規腫瘍免疫誘導法開発

利用细胞膜修饰剂的功能性蛋白锚定方法开发新型肿瘤免疫诱导方法

• 批准号: 15656208
• 负责人: 長棟 輝行
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15656208/
• 关键词: 樹状細胞; 樹状細胞養子免疫療法; 抗体; Fcレセプター; オプソニン化; CTL; 腫瘍免疫; 細胞膜修飾剤; 腫瘍免疫誘導; 抗原提示細胞; 細胞貪食能

悪性腫瘍に対する樹状細胞(DC)養子免疫療法における腫瘍特異的成熟樹状細胞の調製法及びその効果に関する研究成果である。前年度、フルオレセイン(FL)を結合させた細胞膜修飾剤Biocompatible Anchor for Membrane (BAM)をマウスTリンパ腫EL-4の細胞膜に結合させ、さらに抗FL抗体(マウスモノクローナル抗体IgGl)を結合させた抗体結合型EL-4は無処理のEL-4に比べてマウスマクロファージ細胞株WEHI-3に貪食が促進されたことを報告した。今年度はマウスマクロファージ細胞株の代わりにマウスから摘出した樹状細胞を用いる研究を始めた。(1)マウス大腿骨より骨髄細胞を採取し未成熟DCを誘導した。FLを結合させたBAMと抗FL抗体をつかって抗体結合型EL-4を作製した。このEL-4と未成熟DCを混合培養した結果、無処理のEL-4に比べ、抗体結合型EL-4の方がDCのEL-4細胞貪食活性を高めることがわかった。さらに抗体を結合したEL-4を貪食したDCは、DC成熟マーカーであるCD86及びMHC class II(I-A^b)の発現が増加していることも確認できた。(2)抗体を結合したEL-4を貪食したDCをマウス腹腔内へ投与し、EL-4特異的抗腫瘍活性をもつCTLを誘導した。このマウスからCTLを含む脾臓細胞を採取しEL-4細胞と混合培養したところ、EL-4に対して細胞傷害活性が認められた。これらの結果より、腫瘍細胞に対して結合性を持たない抗体をBAMにより腫瘍細胞に強制的に結合させることによってDCに貪食されやすい腫瘍細胞を調製することができた。さらにその腫瘍細胞を貪食したDCをマウス体内に投与することにより腫瘍特異的な細胞傷害活性をもつCTLを誘導できた。

The method of DC, the method of immunizing the mature cells and the results of research. In the previous year, cell membrane repair (Biocompatible Anchor for Membrane), cell membrane repair (BAM), cell membrane repair (Biocompatible Anchor for Membrane), cell membrane repair (BAM), cell membrane repair (EL-4), cell membrane repair, cell membrane repair, cell The combination of anti-FL antibody (anti-FL antibody) and antibody-conjugated EL-4 antibody (EL-4) was more sensitive than that of cell strain WEHI-3. This year, the plant has been studied for the first time in this year. The main results are as follows: (1) the thigh bone and bone marrow cells were selected to guide the immature DC cells. FL was combined with anti-FL antibody, anti-FL antibody, anti-FL antibody and anti-EL-4 antibody. The results of EL-4 immature DC mixed culture, the results of EL-4 assay, and the antibody-binding EL-4 assay DCXEL-4 showed high cell feeding activity. The combination of EL-4 antibody and CD86, DC mature antibody, and MHC class II (I-A ^ b) can be used to confirm that the antibody is positive. (2) Antibody conjugated with EL-4, dietary DC, and EL-4 specific antisera was administered intraperitoneally. CTL specific activity was detected. CTL contains spleen cells, EL-4 cells are mixed with EL-4 cells, and the cell damage activity is confirmed. The results of this study show that the combination of specific antibodies, BAM antibodies, DC cells, DC cells, antibodies, cells, cells. Please tell me that the DC cell is active in the body and the CTL cell is active in the body.