セルサージェリーによる遺伝子発現制御技術の開発

利用细胞手术开发基因表达控制技术

• 批准号: 05F05426
• 负责人: 長棟 輝行
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05F05426/
• 关键词: セルサージェリー; ナノ針; 原子間力顕微鏡; 単一組胞操作; 遣伝子導入; 単一細胞操作; 遺伝子導入; ナノニードル; 遺伝子発現をオン; オフ制御

遺伝子導入が難しいと言われている初代培養間葉系幹細胞では70%以上の高効率遺伝子導入が可能であった。ナノニードルからの遺伝子の拡散を解析し、リアルタイムでのDNA拡散を観察することが可能であった。さらにナノニードルを用いた遺伝子導入を行った直後の細胞を回収し、導入された遺伝子の量について詳しい解析を行った結果、ナノニードルでのDNA導入ではDNAの量が細胞一つにあたり10^4程度であることが明らかになった。既存のDNA導入方法では細胞一つあたりのDNA導入量が10^5〜10^6に対して、1/10〜1/100の導入量でも高効率のDNA導入に成功した。特に単一細胞操作であるマイクロインジェクションの7倍以上のDNA導入率を達成することが可能であった。本研究成果によって今まで明らかになっていない新たな事実を発見することが可能であった。外来遺伝子導入では導入される遺伝子の量が非常に多いことがあきらかになった。理論的にはワンコピーのDNAが核の中に導入されれば遺伝子発現が起こらないといけない。しかしながら、実際の遺伝子導入では10^5〜10^6のDNAが導入されても発現効率はそれほど高くはない。その理由としては導入された外来遺伝子が核の中のピストン蛋白質により凝縮され、発現不活性化がおこると考えられる。

The rate of infection is higher than 70% in the primary culture of the first generation. I don't know. I don't know. This is the first time that you enter the line with your computer. After that, the cell will reply to you, and then you will need to analyze the results of the row. You will need to know how to DNA the results of the row. You will need to know how to do this. The existing "DNA" entry method "cell-by-cell" DNA input "10 ^ 5-10 ^ 6", "1" 10 "1" 1 "100"input"high" rate "DNA" into "success". This is a special example of cell operation, which is more than 7 times the DNA enrollment rate. The results of this study show that it is possible to learn more about the new situation. The amount of money from foreign countries is very high. In the theory, there are some problems in the core of the DNA system. Enter 10 ^ 5-10 ^ 6 DNA and enter the rate of 10 ^ 5 ~ 10 ^ 6. The reason is that the reason is that the protein is not activated in the nucleus of the exotic plant.

项目成果

High efficient gene transfer technique into human cell using nanoneedle and analysis of transferred DNA

使用纳米针将高效基因转移到人体细胞中并分析转移的 DNA

• 发表时间: 2006
• 期刊: Biosensors 2006
• 作者: Sung-Woong Han;Chikashi Nakamura;Yosuke Imai;Rika Fujita;Noriyuki Nakamura;Teruyuki Nagamune;Jun Miyake
• 通讯作者: Jun Miyake

A bio-molecular delivery and slngle cell analysis system using a nanoneedle and an AFM

使用纳米针和 AFM 的生物分子递送和单细胞分析系统

• 发表时间: 2007
• 作者: Sung-Woong Han;Chikashi Nakamura;Yosuke Imai;Teruyuki Nagamune;Jun
• 通讯作者: Jun

A low invasive gene transfer of single cell using nanon eedle operated by AFM

使用 AFM 操作的纳米针进行单细胞低侵入性基因转移

• 发表时间: 2006
• 期刊: 43^<rd> Japanese Petide Symposium/4^<th> Peptide Engineering Meeting
• 作者: Chikashi Nakamura;Sung Woong Han;Yosuke Imai;Rika Fujita;Teruyuki Nagamune;Jun Miyake
• 通讯作者: Jun Miyake

ナノ針を用いた高効率で量的制御が可能なヒト培養細胞への遺伝子導入法の開発

开发利用纳米针将高效且定量可控的基因转移到人类培养细胞中的方法

• 发表时间: 2006
• 期刊: 日本生物工学会第58回講演要旨集
• 作者: 中村 史;韓 成雄;今井陽介;木原隆典;壽 典子;大串 始;長棟輝行;三宅 淳
• 通讯作者: 三宅 淳

A low invasive and high efficient gene delivery method into a single cell using nanoneedle and AFM

使用纳米针和 AFM 将基因导入单细胞的低侵入性和高效基因传递方法

• 发表时间: 2006
• 期刊: EABS＆BSJ2006
• 作者: Sung-Woong Han;Takanori Kihara;Yosuke Imai;Hideki Kamiishi;Sayaka Kaneko;Noriko Kotobuki;Ohgushi;Hajime;Teruyuki Nagamune;Chikashi Nakamura;Jun Miyake
• 通讯作者: Jun Miyake