細胞膜・分泌タンパク質のゴルジ体非依存的輸送経路の解析

细胞膜/分泌蛋白的高尔基独立转运途径分析

• 批准号: 15659012
• 负责人: 鈴木 利治
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15659012/
• 关键词: JIP; キネシン; 分泌タンパク; 微小管; 膜タンパク質; 小胞体; 小胞輸送; ゴルジ体; 分泌タンパク質

I型膜タンパク質は、アミノ末端側に20数個の疎水性アミノ酸に富むシグナルペプチド配列を持ち、生合成途中からこの配列を用いて小胞体に入り、続いてゴルジ体を経て小胞輸送により細胞膜に輸送される。研究代表者はアルツハイマー病の原因遺伝子であるI型膜タンパク質APPの細胞内代謝経路を解析した結果、APPの細胞内輸送には細胞質ドメインが重要であり、細胞質ドメインと相互作用するタンパク質を単離したところX11L, JIP, FE65など複数のタンパク質を得た。これらがAPPの輸送にどのように関係しているのか細胞に発現させて解析したところ、JIPはさらキネシンモーター分子と結合することが明らかになり、キネシンはJIPを介してAPPに結合し、ゴルジ体以降の小胞輸送を微小管依存的に行っていることを生化学的解析および全反射顕微鏡を用いた観察から明らかにした。一方X11Lを発現した細胞では、APPの局在がゴルジマーカータンパク質の局在とは異なる細胞質局在を示した。実験に用いた細胞は非神経細胞であり、X11Lは神経アダプター分子であることから、非神経細胞でも発現しているX11L2を用いて同様な解析を行ったところX11と同じ結果を得た。X11Lを発現した細胞ではJIP/KLCとは異なる経路でゴルジ体を介さずにAPPを細胞膜まで輸送した。X11LはPTBドメインを介してAPPと直接結合するので、X11Lが結合するAPPファミリー分子およびX11Lが結合しない他の膜タンパク質を用いて同様な解析を試みており、ゴルジ体非依存的輸送経路の普遍性を実証すべくデータを蓄積中である。

Type I membrane タ ン パ ク は, ア ミ ノ end side に 20 several の 疎 water-based ア ミ ノ acid に rich む シ グ ナ ル ペ プ チ ド match column を hold ち, biosynthesis way か ら こ の matched with column を い て small cell body に into り, 続 い て ゴ ル ジ body を 経 て vesicular transport に よ り membrane に conveying さ れ る. Research representatives は ア ル ツ ハ イ マ ー disease cause of の survived 伝 で あ る type I membrane タ ン パ ク quality APP の cell metabolism 経 road を parsing し た results, APP の intracellular delivery に は cytoplasm ド メ イ ン が important で あ り, cytoplasmic ド メ イ ン と interaction す る タ ン パ ク qualitative を 単 from し た と こ ろ X11L, JIP, FE65な パ complex number タ パ パ pendular mass を た. こ れ ら が APP の conveying に ど の よ う に masato is し て い る の か cells に 発 now さ せ て parsing し た と こ ろ, JIP は さ ら キ ネ シ ン モ ー タ ー molecular と す る こ と が Ming ら か に な り, キ ネ シ ン は JIP を interface し て APP に し, ゴ ル ジ body in の vesicular transport を tiny pipe line dependent に っ て い る こ と を biochemical The analysis of science: および total reflection 顕 micromirror を use および た観 to observe た観 ら light ら に に た た. Party X11L を 発 now し た cells で は, APP の bureau in が ゴ ル ジ マ ー カ ー タ ン パ ク qualitative の bureau in と は different な る cytoplasm bureau in を shown し た. Be 験 に with い は た cells not god 経 cells で あ り, X11L は god 経 ア ダ プ タ ー molecular で あ る こ と か ら, non god 経 cells で も 発 now し て い る X11L2 を with い て with others in line analytical を な っ た と こ ろ X11 と with た を じ results. X11L を 発 now し た cells で は JIP/KLC と は different な る 経 road で ゴ ル ジ body を interface さ ず に APP を membrane ま で conveying し た. X11L は PTB ド メ イ ン を interface し て APP と directly combined す る の で, X11L が combining す る APP フ ァ ミ リ ー molecular お よ び X11L が combining し な い he の membrane タ ン パ ク qualitative を with い て with others in analytical を な try み て お り, ゴ ル ジ body not dependent of conveying 経 road の universality を card be す べ く デ ー タ を accumulation in で あ る.

项目成果

Araki, Y., Suzuki, T.et al.: "Novel cadherin-related membrane proteins, Alcadeins, enhance the X11-like protein mediated stabilization of amyloid b-protein precursor metabolism."J.Biol.Chem.. 278. 49448-49458 (2003)

Araki, Y., Suzuki, T.等人：“新型钙粘蛋白相关膜蛋白 Alcadeins 可增强 X11 样蛋白介导的淀粉样蛋白 b 蛋白前体代谢的稳定性。”J.Biol.Chem.. 278. 49448

Modulation of Amyloid Precursor Protein Cleavage by Cellular Sphingolipids*

• DOI: 10.1074/jbc.m309832200
• 发表时间: 2004-03
• 期刊: Journal of Biological Chemistry
• 影响因子: 4.8
• 作者: N. Sawamura;Mihee Ko;Wenxin Yu;K. Zou;K. Hanada;Toshiharu Suzuki;J. Gong;K. Yanagisawa;M. Michikawa

Facilitation of stress-induced phosphorylation of β-amyloid precursor protein family members by X11-like/Mint2 protein.

X11-like/Mint2 蛋白促进应激诱导的 β-淀粉样蛋白前体蛋白家族成员的磷酸化。

• 发表时间: 2004
• 期刊: Journal of Biological Chemistry 279
• 作者: Taru;H
• 通讯作者: H

Sawamura, N., Suzuki, T., et al.: "Modulation of amyloid precursor protein cleavage by cellular Sphingolipids."J.Biol.Chem.. (in press). (2004)

Sawamura, N.、Suzuki, T. 等人：“细胞鞘脂对淀粉样前体蛋白裂解的调节”。J.Biol.Chem..（出版中）。

Inomata, H., Suzuki, T., et al.: "A scaffold protein JIP-1b enhances amyloid precursor protein phosphorylation by JNK and its association with kinesin light chain 1."J.Biol.Chem.. 278. 22946-22955 (2003)

Inomata, H.、Suzuki, T. 等人：“支架蛋白 JIP-1b 通过 JNK 增强淀粉样前体蛋白磷酸化及其与驱动蛋白轻链 1 的关联。”J.Biol.Chem.. 278. 22946-22955