顎関節腔内滑膜病変に対するGDF-5遺伝子導入による修復効果

GDF-5基因转移对颞下颌关节间隙滑膜病变的恢复作用

基本信息

批准号：
15659488
负责人：
瀬戸かん一
金额：
$ 2.05万
依托单位：
Tsurumi University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

顎関節腔内病変の発生原因には、咀嚼筋の異常収縮、顎位、咬合位の変化などによる負荷にて生じた起炎物質による破壊が考えられる。順序として、線維軟骨で構成された関節円板、側頭骨、下顎頭表面の滑膜、そして下顎骨であり、最終的に変形性関節症へと病態は移行する。こうした腔内病変の進行を阻止すべく、腔内洗浄やヒアルロン酸ナトリウムやステロイドなどの注射を行っているが持続的効果は期待できない。そこでこうした起炎物質を洗浄した後に、滑膜や円板に対し組織修復を促進する遺伝子の導入治療を行い、持続的に滑膜修復を行うことが本法の目的である。平成16年度は、平成15年度に行ったin vitroの結果を受けてin vivoにおける効果を観察した。in vivo(家兎)における実験は以下に示すとおり遂行され、下記の結果を得た。化学的に誘導した家兎顎関節滑膜炎の作成(土生ら、口腔科学会雑誌51巻2号95-103に準ずる)は、順調に行われた。GDF-5/Tat-PNAの性能の比較を行う前に、リコンビナントGDF-5を関節腔内注射により添加し、その効果を観察した。経時的に開放下、細径関節鏡視により滑膜表面を観察する系、注射後1週間、2週間、3週間でアグリカン、I型コラーゲン、II型コラーゲン、コンドロカルシンの組織発現を免疫染色で観察する系、電子顕微鏡で観察する系、滑液中のサイトカイン量の変化を、ELISA法などを用いて定量的に評価する系の4つの系を各n=5にて行い、データを採取した。また、関節円板、下顎頭滑膜の変化を免疫組織化学的染色法により詳細に観察した。しかし、関節腔内は、繊維性組織ならびに軟骨組織に充たされ、関節表面のみの修復はなされず、I型コラーゲン、II型コラーゲンの双方の発現が観察された。そのため、GDF-5/Tat-PNAの遺伝子導入には至らなかったが、導入に成功すれば滑膜表面のみの修復の可能性は高まることが予想される。

周期内关节病变的原因可能是由于咀嚼肌的收缩异常引起的，或者是由于下巴和咬合位置的变化而导致的负载引起的。该顺序是由纤维球杆菌，颞骨，下颌头表面的滑膜和下颌骨的关节盘，最终导致骨关节炎。为了防止这些腔内病变的进展，正在给出腔内灌溉和透明质酸钠和类固醇的注射，但不能预期它会持续作用。因此，该方法的目的是在洗涤这些物质后执行基因转移到滑膜和椎间盘。在2004年，我们观察到体内对2003年进行的体外结果的影响。如下所示，进行了体内实验（兔）的实验，并获得了以下结果。颞下颌关节的化学诱导滑膜炎（根据Douo等人，《口腔科学学会杂志》第51卷，第2期，第95-103页）。在比较GDF-5/TAT-PNA的性能之前，通过关节内注射添加重组GDF-5及其有效性。在四个系统中收集数据：一种随着时间的时间打开并使用狭窄关节镜检查观察滑膜表面的系统，该系统可在注射后1、2和3周观察Aggrecan，I型，I型，II型胶原蛋白和软骨素的组织表达，该系统通过注射的系统，该系统通过II II，II，II，II，typer collarcin和Chonder的系统表达。使用电子显微镜观察，以及使用ELISA方法等定量评估滑液中细胞因子量的变化的系统，并收集了数据。此外，通过免疫组织化学染色详细观察了关节盘和下颌滑膜的变化。然而，关节腔充满了纤维组织和软骨组织，并且单独在关节表面没有修复，并且观察到I型和II型胶原蛋白的表达。因此，尽管未实现GDF-5/TAT-PNA基因转移，但预计如果成功引入了基因，则仅修复滑膜表面的可能性将增加。