おとり型核酸医薬と非ウイルスベクターの遺伝子導入法開発による新規がん治療戦略

基于诱饵型核酸药物的新型癌症治疗策略以及使用非病毒载体的基因转移方法的开发

• 批准号: 13218073
• 负责人: 森下 竜一
• 金额: $ 4.86万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13218073/
• 关键词: がん; 遺伝子治療; デコイ; NFkB; HVJ

我々は、転写抑制法としておとり型核酸医薬(デコイ)法を考案し、転写因子の直接制御を成熟個体で示してきたが、がん治療への応用は未だ十分でない。そこで、本研究ではデコイのがん治療への応用とそのストラテジーの開発を行う。また、デコイの臨床応用の上で必要不可欠な投与法の検討も行い、がん特異的な導入法の確立を目指す。その結果、1)転写調節因子NFkBに対するデコイの静脈投与は、マウス細網肉腫M6036の静脈播種による肝転移を有意に抑制した。更に、MMCとの併用はMMCの副作用(骨髄抑制など)を増加させることなく、肝転移を抑制した。更に、血管新生抑制に焦点を絞り、マトリックス分解酵素阻害に最適なデコイの設計を行い、NFkBとetsのダブルデコイにより単独に比べ、MMP-1阻害作用が有意に増強できることを見出した。2)プラスミドDNAをマイクロバブル(オプチゾン)に封入後、超音波照射により培養細胞及び生体局所において遺伝子導入効率が増強することを明らかにした。更に、がん抑制遺伝子p53を治療用遺伝子導入として同法で導入した結果、血管平滑筋細胞増強が抑制されることを明らかにした。また、本法は、核酸医薬の投与にも応用可能で、E2Fデコイの血管壁への導入を行った結果、マイクロバブルー超音波を用いることにより、血管平滑筋細胞の増殖を抑制できることも明らかになった。

The direct control of gene expression in mature individuals by gene expression inhibition and gene therapy has been investigated. This study aims to explore the development of therapeutic methods for patients with acute respiratory syndrome. It is necessary for clinical application to conduct research and establish specific introduction methods. The results are as follows: 1) The regulatory factor NFkB is responsible for the intentional inhibition of liver migration in the vein of M6036. In addition, MMC and MMC have increased side effects (bone marrow inhibition) and liver metastasis inhibition. Furthermore, angiogenesis inhibition focuses on optimal design of NFkB and its enzymes, and MMP-1 inhibition is intentionally enhanced. 2) The efficiency of gene introduction into cultured cells and organisms increased after encapsulation with ultrasound irradiation. In addition, inhibition of gene p53 for therapeutic gene introduction results in vascular smooth muscle cell enhancement This method can be applied to the administration of nucleic acid drugs, the introduction of E2F into the vascular wall, the application of ultrasound, the inhibition of proliferation of vascular smooth muscle cells, etc.

项目成果

Miyata T, Yamamoto S, Sakamoto K, Morishita R, Kaneda Y.: "Novel immunotherapy for peritoneal dissemination of murine colon cancer with macrophage inflammatory protein-1b mediated by a tumor-specific vector, HVJ catinonic liposomes"Cancer Gene Therapy. 8.

Miyata T、Yamamoto S、Sakamoto K、Morishita R、Kaneda Y.：“用肿瘤特异性载体 HVJ 卡汀尼克脂质体介导的巨噬细胞炎症蛋白 1b 进行小鼠结肠癌腹膜播散的新型免疫疗法”癌症基因疗法。

Otomo T, Yamamoto S, Morishita R, Kaneda Y.: "EBV replicon vector system enhances transgene expression in vivo : applications to gene therapy for cancer"The Journal of Gene Medicine. 3. 345-352 (2001)

Otomo T、Yamamoto S、Morishita R、Kaneda Y.：“EBV 复制子载体系统增强体内转基因表达：在癌症基因治疗中的应用”基因医学杂志。

Kawamura I, Morishita R(equal first author), Tsujimoto S, Manda T, Tomoi M, Tomita N, Goto T, Ogihara T, Kaneda Y.: "Intravenous injection of oligodeoxynucleotides to the NF-kappaB binding site inhibits hepatic metastasis of M5076 reticulosarcoma in mice"

Kawamura I、Morishita R（同一第一作者）、Tsujimoto S、Manda T、Tomoi M、Tomita N、Goto T、Ogihara T、Kaneda Y.：“向 NF-κB 结合位点静脉注射寡脱氧核苷酸可抑制 M5076 的肝转移

Yoshimura S, Morishita R, Hayashi K, Yamamoto K, Nakagami H, Kaneda Y, Sakai N, Ogihara T.: "Inhibition of intimal hyperplasia after balloon injury in rat carotid artery model using cis-element "decoy"of nuclear factor-kB binding site as a novel molecular

Yoshimura S、Morishita R、Hayashi K、Yamamoto K、Nakagami H、Kaneda Y、Sakai N、Ogihara T.：“使用核因子-kB的顺式元件“诱饵”抑制大鼠颈动脉模型球囊损伤后的内膜增生

Kawauchi M, Suzuki J, Wada Y, Morishita R, Kaneda Y, Isobe M, Amano J, Takamato S.: "Downregulation of nuclear factor kappa B expression in primate cardiac allograft arteries after E2F decoy transfection"Transplant Proc.. 33. 451 (2001)

Kawauchi M、Suzuki J、Wada Y、Morishita R、Kaneda Y、Isobe M、Amano J、Takamato S.：“E2F 诱饵转染后灵长类心脏同种异体移植动脉中核因子 kappa B 表达的下调”移植程序.. 33. 451