骨髄細胞移植による、移植腎再生治療の試み

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GFP陽性ラット骨髄細胞の同系GFP陰性ラット腎障害モデルラットへの移植実験と、障害修復機序、血管内皮細胞キメリズムの検討、腎移植モデルにおける検討。(1)GFP性ラットから陰性ラットへの骨髄移植モデルの確立。GFP陰性ラットに非致死レベルの全身放射線照射を行い、GFP陽性ラットから分離精製した骨髄細胞を経静脈的に移植した。本法により安定して骨髄が生着するラットモデルを確立した。(2)GFP骨髄移植ラットに対する片腎の虚血再潅流モデルの作成。(1)で作成したラットに片腎の虚血再潅流障害を起こさせるモデルを確立した本実験では虚血を加えないもう片腎をコントロールに用いて解析した。(3)GFP骨髄移植・虚血再灌流障害ラットモデルにおける血管内皮再生の研究モデル動物を定時的にsacrificeし、摘出腎切片を蛍光顕微鏡で観察し、GFP陽性細胞が障害部位に入り込んでいることを確認した。さらに血管内皮細胞マーカーとの二重染色により、GFP陽性細胞が血管内皮細胞に分化していることを示唆するデータを得た。(4)再生血管の微小循環系の解析上記モデルにおいて、実体顕微鏡による腎微小循環の可視化と血流速度の定量化に成功した。測定が安定して行える条件が設定でき、さまざまな虚血条件と骨髄細胞移植の条件下で再生血管の微小循環を解析し、シクロスポリンによる影響について新知見を得た。(5)GFP陰性ラット腎のGFP陽性ラットへの腎移植モデルの検討ラット移植腎における障害血管への骨髄由来細胞の修復機転についての解析・検討を行った。