低分子量Gタンパク質Rabをゲノムワイドで網羅的に解析するツールの開発

开发低分子量 G 蛋白 Rab 的全面全基因组分析工具

• 批准号: 17657067
• 负责人: 福田 光則
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Tohoku University (2006)The Institute of Physical and Chemical Research (2005)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17657067/
• 关键词: 低分子量G蛋白質; Rab; Rabエフェクター; 膜輸送; dominant active; dominant negative; ゲノムワイド; 網羅的解析

真核細胞生物の細胞内はさらに膜で包まれたオルガネラにより満たされており、主に膜輸送を介してオルガネラ同士で頻繁に物質のやり取りを行っている。低分子量Gタンパク質Rabファミリーは膜輸送に関与する分子群としては最大のもめで、哺乳動物においては約60種類ものアイソフォームが存在している。各々のRabは特定の膜輸送を制御すると考えられているが、12番以降のRabアイソフォームになるといつどこで何を運ぶのかに関してはほとんど解明されていない。Rabは活性化型固定化(domihant active, DA)変異体あるいは不活性化型固定化(dominant negative, DN)変異体を作成することが出来るため、特走の膜輸送に対する影響を検討することが可能であるが、ある種の受容体が未知のRabにより細胞膜に輸送される場合には、60種類全てのRabクローンに対してDA/DN変異体を作成する必要があり、60種類のうちどのRabが関与するのかを調べることはこれまで不可能であった。このため世界的にRabを綢羅的に解析するツールのニーズが高まってきている。そこで本研究ではマウス及びヒトに存在する60種類のRabを全てクローニングし、これらのRabの機能を網羅的に解析するツーノレ(「Rab bank」)を作成することを目指した。本年度は、これまでに作成したRabの網羅的廨析ツールを利用し、実際に内分泌細胞(PC12細胞)からのホルモン分泌に関わるRabのスクリーニングを行った。その結果、60種類のRabのうちPC12細胞のホルモン顆粒上にはRab3AとRab27Aの二種類のRabが存在し、お互いに協調的にホルモン顆粒の細胞膜へめ繋ぎ止めやホルモンの放出に関与することを明らかにすることができた(J. Cell Scl.(2006)119:2196-2203)。

Eukaryotic cell biology の intracellular は さ ら に membrane で package ま れ た オ ル ガ ネ ラ に よ り against た さ れ て お り, main に membrane transport を interface し て オ ル ガ ネ ラ with frequent "で に material の や り take り を line っ て い る. Low molecular weight G タ ン パ ク qualitative Rab フ ァ ミ リ ー は membrane transport に masato and す る molecular group of と し て は biggest の も め で, mammals に お い て about 60 kinds も は の ア イ ソ フ ォ ー ム が exist し て い る. Each 々 の Rab は specific の membrane transport を suppression す る と exam え ら れ て い る が, 12 times in の Rab ア イ ソ フ ォ ー ム に な る と い つ ど こ で what を luck ぶ の か に masato し て は ほ と ん ど interpret さ れ て い な い. Rab ある active domihant active (DA) variant ある ある ある inactive dominant negative DN) - variant を made す る こ と が out る た め, walk の membrane transport に す seaborne る influence を beg す 検 る こ と が may で あ る が, あ る kind の is let body が unknown の Rab に よ り membrane に conveying さ れ る occasions に は, 60 species て の Rab ク ロ ー ン に し seaborne て DA/DN - variant を made す る necessary が あ の り, 60 species The うち <s:1> <s:1> <s:1> Rabが is impossible であった with the する <s:1> を を を tuning べる と と と れまで れまで れまで れまで れまで れまで れまで れまで れまで れまで れまで れまで れまで であった. こ の た め world に Rab を silk of analytical す に る ツ ー ル の ニ ー ズ が high ま っ て き て い る. そ こ で this study で は マ ウ ス and び ヒ ト に exist す る 60 kinds の Rab を full て ク ロ ー ニ ン グ し, こ れ ら の Rab の function を snare に parsing す る ツ ー ノ レ (" Rab bank ") を made す る こ と を refers し た. This year は, こ れ ま で に made し た Rab の Xie analysis of snare ツ ー ル を using し (PC12 cells), the event be に endocrine cells か ら の ホ ル モ ン secretion に masato わ る Rab の ス ク リ ー ニ ン グ を line っ た. そ の results, 60 species の Rab の う ち PC12 cells の ホ ル モ ン particles on に は Rab3A と Rab27A の two kinds の Rab が し, お mutual い に coordinated に ホ ル モ ン particles の membrane へ め 繋 ぎ check め や ホ ル モ ン の release に masato and す る こ と を Ming ら か に す る こ と が で き た (j. Cell Scl.(2006)119:2196-2203.

项目成果

Neuronal calcium sensor-1 (NCS-1) and PI4Kβ stimulate ERK1/2 signaling by accelerating recycling through endocytic recycling compartment (ERC).

神经元钙传感器-1 (NCS-1) 和 PI4Kβ 通过内吞回收室 (ERC) 加速回收来刺激 ERK1/2 信号传导。

• 发表时间: 2006
• 期刊: Mol. Biol. Cell 17
• 作者: Kapp-Barnea;Y.;Ninio-Many;L.;Hirschberg;K.;Fukuda;M.;Jeromin;A.;Sagi-Eisenberg;R.
• 通讯作者: R.

Slp4-a/granuphilin-a interacts with syntaxin-2/3 in a Munc18-2-dependent manner

• DOI: 10.1074/jbc.m505759200
• 发表时间: 2005-11-25
• 期刊: JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY
• 影响因子: 4.8
• 作者: Fukuda, M;Imai, A;Shimomura, H
• 通讯作者: Shimomura, H

Distinct developmental expression of synaptotagmin I and IX in the mouse brain

• DOI: 10.1097/01.wnr.0000198435.14142.be
• 发表时间: 2006-02-06
• 期刊: NEUROREPORT
• 影响因子: 1.7
• 作者: Fukuda, M

Distinct Rab27A binding affinities of Slp2-a and Slac2-a/melanophilin: Hierarchy of Rab27A effectors

• DOI: 10.1016/j.bbrc.2006.03.001
• 发表时间: 2006-05-05
• 期刊: BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS
• 影响因子: 3.1
• 作者: Fukuda, M

Rab3A and Rab27A cooperatively regulate the docking step of dense-core vesicle exocytosis in PC12 cells

• DOI: 10.1242/jcs.02962
• 发表时间: 2006-06-01
• 期刊: JOURNAL OF CELL SCIENCE
• 影响因子: 4
• 作者: Tsuboi, Takashi;Fukuda, Mitsunori
• 通讯作者: Fukuda, Mitsunori