Atd6L-Rab複合体による隔離膜形成機構の解明

阐明 Atd6L-Rab 复合物的隔离膜形成机制

• 批准号: 19044003
• 负责人: 福田 光則
• 金额: $ 4.61万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19044003/
• 关键词: オートファジー; オートファゴソーム; 隔離膜; Rab; Atg16L; 蛋白質分解; LC3; 膜輸送

オートファジー(自食)は真核生物に普遍的に見られる生理現象で、ユビキチン/プロテアソーム経路とは異なるタイプのタンパク質分解経路として近年注目を集めている。オートファジーは、二重膜構造を持つ隔離膜が伸長し、細胞質やオルガネラなどをとり囲み(オートファゴソームの形成)、ここにリソソームが融合することにより内容物が消化・分解される。オートファジーは非常にダイナミックな膜(小胞)輸送過程を伴うにも関わらず、隔離膜やオートファゴソームの膜の由来は全く分かっていない。そこで本研究課題では、真核生物に普遍的な膜輸送の制御因子である低分子量G蛋白質Rabに着目し、オートファゴソームの膜形成に関与するRabアイソフォームの同定を試みた。本年度は、NIH3T3細胞の細胞抽出液からGST pull-down法によりRab33Bが隔離膜の伸長に必須の役割を果たすAtg16LとGTP依存的に結合することを見いだした。興味深いことに、Atg16LのRab33B結合部位はAtg16Lの中央部分のcoiled-coil領域であり、この領域を細胞に過剰発現させるとオートファジーが強く阻害されることが明らかとなった(MOl. Biol. Cell(2008)19 : 2916-2925)。また、Rab33Bの活性化型固定化変異体の発現によりオートファジーが抑制されることも見いだした。この成果は、オートファジー制御因子(Atg)と膜輸送制御因子(Rab)が直接リンクする初めての事例であり(Autophagy(2008)4 : 824-826)、今後Atg16LのRabエフェクターとしての機能と、Atg16L-Rab33B複合体のオートファジーにおける役割をさらに検討していく予定である。

In recent years, attention has been focused on the physiological phenomenon of eukaryotes, which is common in eukaryotes. The structure of the membrane and the double membrane maintain the separation membrane for elongation, cytoplasm and growth, and the fusion of the contents. The origin of the membrane is very different from that of the membrane (cell). This study aims to investigate the role of low molecular weight G protein Rab as a regulatory factor for membrane transport in eukaryotes. This year, cell extracts from NIH 3T3 cells were extracted by GST pull-down method, and the results of isolation membrane elongation by Rab 33B and GTP dependent binding by Atg 16L were observed. Rab 33B binding site of Atg 16L is coiled-coil domain in central part of Atg 16L. Biol. Cell(2008)19 : 2916-2925)。The development of activated immobilized Rab 33b protein was investigated. The results of this study include the initial case of direct transfer control factor (Atg) and membrane transfer control factor (Rab)(Autophagy(2008)4 : 824-826), the future function of Rab 16L, and the future service of Atg 16L-Rab 33B complex.

项目成果

Cholesterol controls lipid endocytosis through rabll.

胆固醇通过rabll控制脂质内吞作用。

• 发表时间: 2007
• 期刊: Mol. Biol. Cell 18
• 作者: Takahashi;M.;Murate;M.;Fukuda;M.;Sato;S.B.;Ohta;A. & Kobayashi;T.
• 通讯作者: T.

Proteomic analysis of insulin secretory granules.

胰岛素分泌颗粒的蛋白质组学分析。

• 发表时间: 2007
• 期刊: Mol. Cell. Proteomics 6
• 作者: Brunner. Y.;Coute;Y.;Iezzi;M.;Foti. M.;Fukuda;M.;Hochstrasser;D.;Wollheim;C.B. & Sanchez. J.-C.
• 通讯作者: C.B. & Sanchez. J.-C.

Spatial segregation of degradation- and recycling-trafficking pathways in COS-1 cells

• DOI: 10.1016/j.bbrc.2007.06.101
• 发表时间: 2007-08-31
• 期刊: BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS
• 影响因子: 3.1
• 作者: Misaki, Ryo;Nakagawa, Takatoshi;Taguchi, Tomohiko
• 通讯作者: Taguchi, Tomohiko

Direct link between Atg protein and small GTPase Rab : Atgl6L functions as a potential Rab33 effector in mammals

Atg 蛋白和小 GTPase Rab 之间的直接联系：Atgl6L 在哺乳动物中充当潜在的 Rab33 效应子

• 发表时间: 2008
• 期刊: Autophagy 4
• 作者: Fukuda;M. & Itoh;T.
• 通讯作者: T.

Rab4 negatively regulates CFTR expression in the plasma membrane in human airway epithelial cells.

Rab4 负向调节人气道上皮细胞质膜中 CFTR 的表达。

• 发表时间: 2007
• 作者: Fukuda;M. & Swiatecka-Urban;A.
• 通讯作者: A.