神経機能発現におけるRabシグナリングネットワークの解析

Rab信号网络在神经功能表达中的分析

• 批准号: 20022004
• 负责人: 福田 光則
• 金额: $ 2.56万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20022004/
• 关键词: 神経細胞; 極性形成; 突起伸長; Rab; Rabエフェクター; 軸索; 樹状突起; 膜輸送

低分子量G蛋白質Rabは真核細胞に普遍的な膜輸送の制御因子で、哺乳動物においては60種類以上の異なるアイソフォームが存在することが知られている。RabはGTPを結合した活性化型とGDPを結合した不活性化型の二つの状態をとり、活性化型のGTP-Rabがエフェクター(effector)と呼ばれるパートナー分子と特異的に結合することにより膜輸送を促進すると考えられている。我々はこれまでシナプス小胞の輸送におけるRab27の役割を明らかにしているが(PMS(2008)105 : 16003-16008)、神経細胞の極性形成(輸送)におけるRabアイソフォームの役割は、Rabの種類数が非常に多いこともあり、ほとんど解明されていない。そこで本研究では、当研究室で独自に開発した『Rabの網羅的解析ツール(Rab panel)』を用い、軸索あるいは樹状突起特異的な膜輸送に関与するRabアイソフォームの同定とその機能解析を行い、神経細胞の極性形成におけるRabシグナリングネットワークの全貌の解明を目指した。本年度はまず、(1)緑色蛍光蛋白質(GFP)をタグした60種類のRabを神経成長因子で神経細胞様に分化させたPC12細胞に導入し、突起形成・伸長に影響を及ぼすRabアイソフォームのスクリーニングに着手するとともに、(2)酵母two-hybrid法及びGST pull-down法によりRabエフェクターの網羅的スクリーニングを行った。これまでのスクリーニングで、神経突起の伸長を促すRabアイソフォームや30種類を超える新規のRabエフェクター候補分子を同定することに成功している(Mol. Cell. Proteomics(2008)7 : 1031-1042 ; Mol. Biol. Cell(2008)19 : 2916-2925)。

Low molecular weight G protein Rab は eukaryotic cells に common な membrane transport の suppression factor で, mammals に お い て は over 60 kinds の different な る ア イ ソ フ ォ ー ム が exist す る こ と が know ら れ て い る. Rab は GTP を made combining し た activation type と を combined GDP し た activation type の two つ の state を と り, active type の GTP - made Rab が エ フ ェ ク タ ー (effector) と shout ば れ る パ ー ト ナ と specific に ー molecules combine す る こ と に よ り membrane transport を promote す る と exam え ら れ て い る. I 々 は こ れ ま で シ ナ プ ス vesicular の conveying に お け る Rab27 の "を cut Ming ら か に し て い る が (PMS (2008) 105: 16003-16008), "god 経 cell polarity の form (delivery) に お け る Rab ア イ ソ フ ォ ー ム の cut は, Rab の species number が very に more い こ と も あ り, ほ と ん ど interpret さ れ て い な い. Youdaoplaceholder0 た で で this study で で when the research laboratory で independently に developed た "Analysis of Rab Snares そ た た (Rab. Panel) "を い, axon あ る い は dendritic protrusions specific な membrane transport に masato and す る Rab ア イ ソ フ ォ ー ム の with fixed と そ の function analytical を い, god 経 cell polarity の form に お け る Rab シ グ ナ リ ン グ ネ ッ ト ワ ー ク の whole の interpret を refers し た. This year は ま ず, (1) the green light 蛍 protein (GFP) を タ グ し た 60 kinds の Rab を others god 経 growth factor で 経 cells differentiation さ に せ た に import し PC12 cells, formation, elongation に influence を and ぼ す Rab ア イ ソ フ ォ ー ム の ス ク リ ー ニ ン グ に to す る と と も に, two (2) the yeast - hybr Id and び GST pull down method に よ り Rab エ フ ェ ク タ ー の snare of ス ク リ ー ニ ン グ を line っ た. こ れ ま で の ス ク リ ー ニ ン グ で, god 経 protuberant の elongation を promote す Rab ア イ ソ フ ォ ー ム や 30 kinds を super え る new rules の Rab エ フ ェ ク タ molecular を ー alternate with fixed す る こ と に successful し て い る (Mol. Cell. Proteomics 7 (2008) : 1031-1042; Mol. Biol. Cell(2008)19:2916-2925.

项目成果

The exocytosis regulator synaptotagmin V controls phagocytosis in macrophages

胞吐调节剂突触结合蛋白 V 控制巨噬细胞的吞噬作用

• 发表时间: 2008
• 期刊: J. Immunol 181
• 作者: Vinet;A.E;Fukuda;M. & Descoteaux;A.
• 通讯作者: A.