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デグロン制御技術を応用した細胞内シグナル伝達解析システムの開発

デグロン制御技術を応用した細胞内シグナル伝達解析システムの開発
应用降解决定子控制技术开发细胞内信号转导分析系统
批准号：
17657062
负责人：
三輪 佳宏
金额：
$2.24万
依托单位：
University of Tsukuba
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2005
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
2005 至 2006
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17657062/
关键词：
蛍光タンパク質タンパク質分解イメージング遺伝子発現

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本研究では、タンパク質機能解析のための細胞内レベルコントロール方法として、Tetデグラトン技術を総合的に確立することを目指した。18年度より解析を進めているMAPキナーゼの他に、遺伝子そのものの組み替えによる機能発現調節系を薬剤依存的に自在にコントロールできる系を構築することを目的として、リコンビナーゼCreにも応用を進めた。ドキシサイクリンの添加の有無によって分解が制御され、細胞内レベルが変動するCre融合タンパク質を構築することができた。これと並行して、loxPでの組換えによって異なる波長特性の蛍光タンパク質が発現するレポーターベクターを構築し、同時に細胞に導入して解析したところ、ドキシサイクリン依存的に組換えを誘導することができた。しかし、非誘導時にもある程度の組換え細胞がみられ、制御の厳密性において不十分な結果であった。そこで、より厳密なコントロールを実現するために、転写・分解二重制御系の開発に取り組んだ。その結果、非誘導時の組換えを10分の1以下に減少させることに成功した。これはもちろん転写のみで制御した場合と比較してもはるかに高い精度でコントロールできていた。さらに、ドキシサイクリンの添加後に、どのくらいの時間で組換えが完了できるか、について詳細な時間経過を解析したところ、数日以上の時間を必要とすることが明らかとなった。そこで、今後はより短時間の発現誘導によって、組換えを確実に完了させることができるような改良が必要であることが明らかとなった。
期刊论文(2)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
デグラトン・プローブ-タンパク質分解を応用した分子イメージング法
Degraton 探针 - 应用蛋白质降解的分子成像方法
DOI： --
发表时间： 2005
期刊： 高分子 54巻8号
影响因子： --
作者： [田中順子, 三輪佳宏]
通讯作者： 三輪佳宏
Constitutive Expression of Thrombospondin 1 in MC3T3-E1 Osteoblastic Cells Inhibits Mineralizaion
MC3T3-E1 成骨细胞中血小板反应蛋白 1 的组成型表达抑制矿化
DOI： --
发表时间： 2006
期刊： Journal of cellular physiology 209・2
影响因子： --
作者： [Giraldez, A.J, 金森 章, J.-F.Yu, Akemichi Ueno]
通讯作者： Akemichi Ueno
Establishment of model animals for analyzing collagen in three-dimensional construction, tissue maintenance and fibrosis
新規細胞質品質管理システムの分子機構の解明
  • 批准号：
    20059006
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 资助金额：
    $3.71万
  • 财政年份：
    2008
  • 负责人：
    三輪 佳宏
  • 依托单位：
    University of Tsukuba
生体内DNA組み替えの光制御技術の開発
  • 批准号：
    20650061
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
  • 资助金额：
    $2.11万
  • 财政年份：
    2008
  • 负责人：
    三輪 佳宏
  • 依托单位：
    University of Tsukuba
マウス個体イメージングによる薬物動態の数理モデル解析
  • 批准号：
    20016001
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 资助金额：
    $5.12万
  • 财政年份：
    2008
  • 负责人：
    三輪 佳宏
  • 依托单位：
    University of Tsukuba
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