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時間軸に沿った核での物質動態可視化技術の開発

开发沿时间轴可视化原子核内物质动力学的技术

基本信息

批准号：
17050004
负责人：
三輪佳宏
金额：
$ 3.97万
依托单位：
University of Tsukuba
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17050004/
关键词：
蛍光タンパク質タンパク質分解イメージング遺伝子発現

项目摘要

本研究では、細胞内の核での物質動態を解析する方法を確立することを目的として、蛍光イメージングの技術開発を行うとともに、解析のための新しい装置の利用方法も考案することを目指した。17年度に開発したKaede変異体をさらに改良し、低バックグラウンドでタンパク質問相互作用を可視化することに成功した。これを核内に運び込まれる転写因子群をモデル系として具体的な応用を進めた。その結果、転写因子RunxとCBFβの相互作用を時間経過を追って可視化したところ。また各種核内受容体の検出にも応用する。細胞内での核へのタンパク質の移動を定量的に解析する手段が確立されれば、ダイナミクスを解析する上で非常に有用であると期待される。そこでフローサイトメーターで蛍光を測定する際に、FL-AとFL-Wという複数のパラメーターを組み合わせた解析手段を用いることにより、生きたままの動物細胞において、細胞核への蛍光局在の程度を簡便かつ定量的に測定する手法を確立した。さらに高い解像度で解析するためには、細胞の進行方向についてレーザーが絞り込まれていることが重要であることも明らかにし、4倍程度の精度を実現できることも示した。この方法は解析ばかりでなく、目的とする局在を示す細胞を選択的に回収し、さらなる実験に用いることを可能にするため、遺伝子機能の高度な解析や創薬のための新たなスクリーニング法に発展できるものであり、この内容は特許として出願した。

In this study, the methods of dynamic analysis of intracellular nuclear chemicals are used to ensure that the purpose of this study is to ensure that the technology is used, and that the use of new equipment is analyzed. In the course of the year, the improvement of the Kaede system and the improvement of the interaction between the two systems can be improved. In the nuclear environment, we need to write the factor group. The system is specific. The results and writing factors of Runx-CBF β-interaction have been traced over time to make a real-time response. All kinds of nuclear receptacles are used to test the use of drugs. The method of quantitative analysis is used to make sure that the information is available, and that the analysis is very useful. This is due to the measurement of light, FL-A, FL-W, complex, complex, and so on. In this paper, we use the analytical method to determine the quantity of the cell, the cell and the nucleus. The resolution of the high resolution resolution is very high, and the direction of the cell is very high. The accuracy is 4 times higher than that of the high resolution. The method is used to analyze the information, the destination office is to display the selected information, the computer is used to analyze the information that may be used, and the sub-machine is capable of analyzing the information in a high level. The new method shows that the information is displayed and the content is displayed.