课题基金 / 基金详情

ラフトを定量的に解析する方法の開発と応用

ラフトを定量的に解析する方法の開発と応用
筏定量分析方法的开发及应用
批准号：
17659053
负责人：
藤本 豊士
金额：
$2.11万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2005
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
2005 至 2006
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17659053/
关键词：
ラフト膜脂質ミクロドメイン点過程解析凍結割断レプリカ急速凍結法免疫電顕細胞膜フリーズフラクチャー定量コレステロール

项目摘要

项目成果

藤本 豊士的其他基金

相似基金

相关文献

中文摘要
翻译
点击翻译按钮获取中文摘要
英文摘要
膜脂質は膜構造のベースとなるだけでなく,ミクロドメインの形成,シグナル伝達など多様な機能を持つ.しかし脂質分子は通常の化学固定剤とは反応せず,また仮に反応したとしても時間がかかるため,脂質分子の正確な超微局在を従来の免疫電顕法で捉えることはほとんど不可能である.我々はSDS処理凍結割断レプリカ標識法(SDS-FRL)を基礎技術として用い,膜脂質の局在をnmレベルで定量的に捉えることを目指している.本研究では脂質ラフトのマーカーとして用いられるGM1について下記の結果を得た.正常マウス線維芽細胞ではGM1は半径47nm程度のクラスターを形成して分布していた.このことはRipleyのK関数を用いた点過程解析によって確かめられた.メチルβシクロデキストリンによるコレステロール除去,あるいは氷温,30分の浸漬により,クラスター形成の程度は顕著に低下し,ランダムに分布する領域がしたが,クラスター形成領域も残存した.またこれらの処理により,GM1の標識密度は有意に増加し,最近隣距離も増大した.最近隣距離は無処理群では標識密度によってほとんど変化しなかったが,コレステロール除去群,低温処理群では標識密度が大きくなると減少した.これらの結果は無処理細胞ではGM1がクラスターを作り,2つの処理により分散傾向を示すと考えることによって説明できる.モデル実験の結果,レプリカ上に固定される膜脂質の割合(保持効率)および標識されるGM1の割合(標識効率)はそれぞれ82.6%,19.4-27.7%であり,細胞膜に存在する脂質を非常に高い効率で補足していることが確かめられた.この方法は他の膜脂質にも応用可能であり,今後に多くの展開が期待できる.
期刊论文(6)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
組織細胞化学2005(超薄切片を用いた免疫電顕法)
组织细胞化学 2005（使用超薄切片的免疫电子显微镜）
DOI： --
发表时间： 2005
期刊：
影响因子： --
作者： [藤田秋一, 藤本豊士]
通讯作者： 藤本豊士
Anti-calreticulin Antibody Binds to a Membrane Protein in Caveolae
DOI： 10.1267/ahc.38.43
发表时间： 2005
期刊： Acta Histochemica Et Cytochemica
影响因子： 2.4
作者： [R. Nomura;T. Aoki;H. Hagiwara;T. Senda;T. Fujimoto]
通讯作者： R. Nomura;T. Aoki;H. Hagiwara;T. Senda;T. Fujimoto
Differential expression of caveolin-3 in mouse smooth muscle cells in vivo.
Caveolin-3在小鼠平滑肌细胞体内的差异表达。
DOI： --
发表时间： 2006
期刊： Cell Tissue Res. (In press)
影响因子： --
作者： [Kogo, H., S.Ito, Y.Moritoki, H.Kurahashi, T.Fujimoto]
通讯作者： T.Fujimoto
染色・バイオイメージング実験ハンドブック
染色/生物成像实验手册
DOI： --
发表时间： 2006
期刊：
影响因子： --
作者： [藤田秋一, 藤本豊士]
通讯作者： 藤本豊士
共 6 条
    Elucidation of nuclear lipid droplet functions
    • 批准号：
      22H00446
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
    • 资助金额：
      $26.96万
    • 财政年份：
      2022
    • 负责人：
      藤本 豊士
    • 依托单位：
      Juntendo University
    がん細胞の増殖,浸潤機構と脂質ドメイン
    • 批准号：
      20013018
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
    • 资助金额：
      $9.41万
    • 财政年份：
      2008
    • 负责人：
      藤本 豊士
    • 依托单位：
      Nagoya University
    定量的可視化法による癌細胞でのラフト破綻の解析
    • 批准号：
      18013024
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
    • 资助金额：
      $5.44万
    • 财政年份：
      2006
    • 负责人：
      藤本 豊士
    • 依托单位：
      Nagoya University
    イノシトール燐脂質分布の定量的解析
    • 批准号：
      18050012
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
    • 资助金额：
      $3.84万
    • 财政年份：
      2006
    • 负责人：
      藤本 豊士
    • 依托单位：
      Nagoya University
    海外基金