课题基金 / 基金详情

イノシトール燐脂質分布の定量的解析

イノシトール燐脂質分布の定量的解析
肌醇磷脂分布的定量分析
批准号：
18050012
负责人：
藤本 豊士
金额：
$3.84万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2006
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
2006 至 2007
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18050012/
关键词：
イノシトール燐脂質凍結割断急速凍結カベオララフト膜脂質凍結割断レプリカ法

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项目成果

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ホスファチジルイノシトール(PI)のイノシトール基の3,4,5位が燐酸化されることによって生じるイノシトール燐脂質(PIs)は,細胞内小胞輸送やシグナル伝達に重要な役割を果たすことが知られている.PIsの膜内二次元分布をナノスケールで解析し,細胞内超微構造との関連を明らかにすることはPIsの生理的機能をさらに詳細に理解するために重要である.従来の方法では微細な脂質局在を解明することが原理的に困難であると考えられるため,我々は急速凍結した細胞膜を白金・カーボン薄膜で物理的に固定する凍結割断レプリカを用いてPIsの超微局在を可視化し,定量的に解析する方法を創出した.既に昨年度までの研究で特異性,標識効率性などが十分に確保されたPI(4,5)P2に対するプローブ(GST-PH)を用いて,急速凍結して得た培養細胞のレプリカを標識,解析した.その結果,平坦な細胞膜のPI(4,5)P2は弱いクラスターを形成して存在すること,上記のクラスターはコレステロール抽出でやや低下するが,アクチン脱重合でほぼ完璧に消滅すること,PI(4,5)P2は特にカベオラ周囲に顕著に集中すること,細胞内カルシウム上昇によって標識は激減するが,生理的リガンドによる刺激ではカベオラ周囲のPI(4,5)P2が保たれる場合が多いことなどが明らかとなった.これらの結果は生細胞でのPI(4,5)P2の分布をナノスケールで初めて明らかにしたものであり,カベオラが平坦な細胞膜部分とは異なる特殊な領域を形成することを示した点で重要である.
期刊论文(9)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
急速凍結電顕法による膜脂質の超微分布解析
使用快速冷冻电子显微镜分析膜脂的超细分布
DOI： --
发表时间： 2007
期刊：
影响因子： --
作者： [藤田秋一, 藤本豊士]
通讯作者： 藤本豊士
Recruitment of TIP47 to lipid droplets is controlled by the putative hydrophobic cleft
DOI： 10.1016/j.bbrc.2006.06.074
发表时间： 2006-08-18
期刊： BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS
影响因子： 3.1
作者： [Ohsaki, Yuki, Maeda, Takashi, Fujimoto, Toyoshi]
通讯作者： Fujimoto, Toyoshi
Gangliosides GM1 and GM3 in the living cell membrane form clusters susceptible to cholesterol depletion and chilling
DOI： 10.1091/mbc.e07-01-0071
发表时间： 2007-06-01
期刊： MOLECULAR BIOLOGY OF THE CELL
影响因子： 3.3
作者： [Fujita, Akikazu, Cheng, Jinglei, Fujimoto, Toyoshi]
通讯作者： Fujimoto, Toyoshi
Cytoplasmic lipid droplets are sites of convergence of proteasomal and autophagic degradation of apolipoprotein B
DOI： 10.1091/mbc.e05-07-0659
发表时间： 2006-06-01
期刊： MOLECULAR BIOLOGY OF THE CELL
影响因子： 3.3
作者： [Ohsaki, Yuki, Cheng, Jinglei, Fujimoto, Toyoshi]
通讯作者： Fujimoto, Toyoshi
共 9 条
    Elucidation of nuclear lipid droplet functions
    • 批准号：
      22H00446
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
    • 资助金额：
      $26.96万
    • 财政年份：
      2022
    • 负责人：
      藤本 豊士
    • 依托单位：
      Juntendo University
    がん細胞の増殖,浸潤機構と脂質ドメイン
    • 批准号：
      20013018
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
    • 资助金额：
      $9.41万
    • 财政年份：
      2008
    • 负责人：
      藤本 豊士
    • 依托单位：
      Nagoya University
    定量的可視化法による癌細胞でのラフト破綻の解析
    • 批准号：
      18013024
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
    • 资助金额：
      $5.44万
    • 财政年份：
      2006
    • 负责人：
      藤本 豊士
    • 依托单位：
      Nagoya University
    定量的可視化法による癌細胞でのラフト破綻の解析
    • 批准号：
      17014042
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
    • 资助金额：
      $3.39万
    • 财政年份：
      2005
    • 负责人：
      藤本 豊士
    • 依托单位：
      Nagoya University
    海外基金