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脂質滴局在分子による脂質動態制御と細胞膜ミクロドメイン

脂滴定位分子对脂质动力学和细胞膜微区的控制

基本信息

批准号：
16022230
负责人：
藤本豊士
金额：
$ 3.14万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16022230/
关键词：
脂質滴 Rab18 ADRP 膜ミクロドメイン

项目摘要

脂質滴はほとんどの細胞に見られる構造であり,コレステロールエステルなどの中性脂質が集積する.脂質滴は膜脂質組成の調節に関係し,それにより膜ミクロドメインの構造やそこでのシグナル伝達制御にも関わると考えられる.脂質滴機能を明らかにする目的で,脂質滴成分を網羅的に解析し,新たな脂質滴蛋白質を同定した.今年度はRab18について解析した.抗Rab18抗体による標識,EGFP-Rab18の観察より,Rab18が脂質滴に特異的に局在することを確認した.脂質滴マーカーであるADRPとの二重標識により,両者は脂質滴表層に共存するが,その標識強度は相補的であった.EGFP-Rab18を強制発現させると,導入分子が発現した脂質滴でのみADRPの標識強度が低下し,Rab18はADRPを排除することが示された.EGFP-Rab18を発現した細胞を電顕観察すると,小胞体またはその延長部分が脂質滴と密着する構造が高頻度で観察された.ADRPをRNA干渉法で発現抑制した細胞,およびBrefeldin A処理でADRPを脂質滴表層から脱落させた細胞でも同様の密着構造が見られ,いずれの場合も対照群に比較して有意の差が認められた.これらの結果はGTP結合蛋白質であるRab18が脂質滴表層に結合する性質を持ち,さらにADRPを排除することで小胞体と脂質滴の密着構造形成を誘導することを示す.小胞体との密着構造はミトコンドリアや細胞膜でも観察され,いずれも膜間の脂質移動に関係すると考えられている.Rab18が誘導した小胞体・脂質滴間の密着構造についても同様の機能を持つと推測され,その結果として膜ミクロドメインに影響を与える可能性が考えられる.

The fat droplets, the cells, the cells, the fat, the fat. The lipids and lipids are grouped into membranes and membranes, so that you can make sure that you are in a good condition. Fat drip machine can be used to understand the purpose of fat drop, lipid drop into the analysis of the network, the new lipid drop protein profile is the same. This year's Rab18 analysis is in full swing. Anti-Rab18 antibodies were identified, EGFP-Rab18 was detected, and Rab18 lipids were detected in the laboratory. The fat droplet is sensitive to the double label of the ADRP label, the lipid droplet table is characterized by the coexistence of the label, and the label strength is related to each other. EGFP-Rab18 is used to force the detection of fat droplets, the ADRP label is low in molecular weight, and Rab18's ADRP is excluded from the label to show that the label is weak. EGFP-Rab18 shows that the cell phone detects the label The fat drop of the small cell body is closely related to the growth of the small cell body. The high temperature temperature is observed by the ADRP-RNA dry method. The cell is inhibited by the ADRP-RNA dry method, and the Brefeldin An is treated by the ADRP fat drop table. The cell density is the same as that of the cell. Results GTP binding protein Rab18 lipid droplet table combined with sex-sensitive lipid droplets, which excluded the presence of small cell body lipid droplets to form a guideband marker. The small cell bodies are closely linked to the cell membrane and the lipid transfer between the cell membranes. Rab18 leads that the lipid droplets of the small cell bodies are closely linked with each other, and the results show that the membrane tests show that the fat transfer between the cell membranes and the possibility of transmission is not possible.