新規Akt基質タンパク質の細胞運動・形態形成における機能の解明

阐明新型 Akt 底物蛋白在细胞运动和形态发生中的功能

• 批准号: 17659113
• 负责人: 高橋 雅英
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17659113/
• 关键词: Akt; キナーゼ; Girdin; アクチン結合蛋白; アクチンストレスファイバー; 細胞運動; 血管新生; siRNA

われわれはyeast two hybrid法により、Aktキナーゼの新規基質Girdinを同定した。昨年度までの研究により、Girdinはアクチン結合蛋白であり、Aktによりそのセリン1416がリン酸化を受け、アクチン線維の再構成を引き起こすことを明らかにした。さらにGirdin siRNA存在下において、細胞運動を著しく低下することから、Akt-Girdinシグナル伝達系の細胞運動における重要性を証明した。本年度はAkt-Girdinシグナル伝達系の血管新生における役割についてHUVEC細胞を用いて検討した。HUVEC細胞をVEGF-Aで刺激することによりAktを活性化させると、Girdinのセリン1416がリン酸化され、PI3キナーゼのインヒビターやAkt siRNAを用いるとそのリン酸化が抑制されることを確認した。GirdinはHUVEC細胞におけるストレスファイバーやラメリポデイアなどのアクチン線維に一致して存在し、siRNAによってGirdinをノックダウンすると、ストレスファイバーやラメリポデイアの形成が障害された。GirdinをノックダウンしたHUVEC細胞は、マトリゲル上での管腔形成やボイデンチャンバーでの細胞遊走能が著しく障害された。以上の結果より、Akt-Girdinシグナル伝達系が血管新生にける細胞遊走および管腔形成に重要な役割を果たすことが示唆された。現在、マウスを用いたin vivoにおける系を用いて、Girdinの血管新生における機能の解析を進めている。

わ れ わ れ は yeast two hybrid method に よ り, Akt キ ナ ー ゼ の new rules matrix Girdin を with fixed し た. Yesterday's annual ま で の research に よ り, Girdin は ア ク チ ン binding protein で あ り, Akt に よ り そ の セ リ ン 1416 が リ ン acidification を け, ア ク チ ン line d の constitute を lead き again こ す こ と を Ming ら か に し た. さ ら に Girdin presence of siRNA に お い て, cell movement を し く low す る こ と か ら, Akt - Girdin シ グ ナ ル 伝 da is の cell movement に お け る importance を prove し た. This year は Akt - Girdin シ グ ナ ル 伝 da is の angiogenesis に お け る service cut に つ い て HUVEC cells を using い て beg し 検 た. を VEGF HUVEC cells - A で stimulus す る こ と に よ り Akt を activeness さ せ る と, Girdin の セ リ ン 1416 が リ ン acidification さ れ, PI3 キ ナ ー ゼ の イ ン ヒ ビ タ ー や Akt siRNA を with い る と そ の リ ン acidification が inhibit さ れ る こ と を confirm し た. Girdin は HUVEC cells に お け る ス ト レ ス フ ァ イ バ ー や ラ メ リ ポ デ イ ア な ど の ア ク チ ン line agree d に し て し, siRNA に よ っ て Girdin を ノ ッ ク ダ ウ ン す る と, ス ト レ ス フ ァ イ バ ー や ラ メ リ ポ デ イ ア の form が handicap of さ れ た. Girdin を ノ ッ ク ダ ウ ン し た HUVEC cell は, マ ト リ ゲ ル on で の lumen formed や ボ イ デ ン チ ャ ン バ ー で の cells can wander が the し く handicap of さ れ た. の above results よ り, Akt - Girdin シ グ ナ ル 伝 da system が angiogenesis に け る cell wandering お よ び lumen formed に important な "を cut fruit た す こ と が in stopping さ れ た. Now, マ ウ ス を with い た in vivo に お け を る department with い て, Girdin の angiogenesis に お け る function analytical を の into め て い る.

项目成果

Dok-4 regulates GDNF-dependent neurite outgrowth through downstream activation of Rap1 and mitogen-activated protein kinase

• 发表时间: 2006
• 作者: 内田 真由実

Targeted mutation of serine 697 in the Ret tyrosine kinase causes migration defect of enteric neural crest cells

• DOI: 10.1242/dev.02616
• 发表时间: 2006-11-15
• 期刊: DEVELOPMENT
• 影响因子: 4.6
• 作者: Asai, Naoya;Fukuda, Toshifumi;Costantini, Frank
• 通讯作者: Costantini, Frank

Novel hairless RET-transgenic mouse line with melanocytic nevi and anagen hair follicles

具有黑素细胞痣和毛发生长初期毛囊的新型无毛 RET 转基因小鼠系

• 发表时间: 2006
• 期刊: Journal of Investigative Dermatology 126
• 作者: Uchida;M.;Enomoto;A.;Takahashi;M.;et al.;Masashi Kato
• 通讯作者: Masashi Kato

Activation of c-Jun amino-terminal kinase by GDNF induces G2/M cell cycle delay linked with action reorganization.

GDNF 激活 c-Jun 氨基末端激酶可诱导与动作重组相关的 G2/M 细胞周期延迟。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Genes to Cells 10
• 作者: Fukuda;T.;Asai;N.;Enomoto;A.,;Takahashi;M.;Yoshinori Kodama;Tetsuo Matsuura;Toshifumi Fukuda
• 通讯作者: Toshifumi Fukuda

Microspherule protein 1, Mi-2β,and RET finger protein associate in nucleolus and up-regulate ribosomal gene transcription.

微球蛋白 1、Mi-2β 和 RET 指蛋白在核仁中结合并上调核糖体基因转录。

• 发表时间: 2005
• 期刊: The Journal of Biological Chemistry 280(47)
• 作者: Fukuda;T.;Asai;N.;Enomoto;A.,;Takahashi;M.;Yoshinori Kodama;Tetsuo Matsuura;Toshifumi Fukuda;Takatoshi Morinaga;Atsushi Enomoto;Keiko Shimono
• 通讯作者: Keiko Shimono