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新規Akt結合蛋白の機能解析

新型 Akt 结合蛋白的功能分析

基本信息

批准号：
16022229
负责人：
高橋雅英
金额：
$ 4.1万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16022229/
关键词：
Akt アクチン細胞運動 siRNA

项目摘要

Aktはセリン、スレオニンキナーゼであり、受容体型チロシンキナーゼの下流のシグナル伝達因子として、細胞増殖、生存などに重要な役割を果たしていることが明らかになっている。Aktは原癌遺伝子の一種であり、その恒常的な活性化は細胞の癌化と密接に関わっていることが多くの例で示されている。Aktシグナル伝達経路の役割をさらに解明する目的で、yeast two hybrid法を用いてAkt結合蛋白質の同定を行った。その結果、AktのC末端領域と結合するクローンを同定し、全長cDNAのクローニングに成功した。アミノ酸配列の解析では既知の機能ドメインはなく、全く新規の分子であり、ノーザンブロット法により本遺伝子は、どの臓器にもubiquitousに発現していることが判明した。C末端領域にAktによってリン酸化されるコンセンサス配列が存在し、in vitro kinase assayやEGF刺激により活性化されたAktによってリン酸化されることから、Aktの新規基質である可能性が示唆された。作製した抗体で細胞内局在を検討したところ、アクチン細胞骨格系と共局在すると同時に、特に移動する細胞の先端部で活性化Aktと共局在していた。さらにBoyden chamberを用いたmigration assayを行った結果、C末端領域の過剰発現あるいはsiRNA存在下で、細胞の運動、接着が阻害されることから、細胞の移動、接着あるいは浸潤を制御している可能性が示唆された。

Akt はセリン、スレオニンキナーゼであり、accepted type チロシンキナーゼの下のシグナル伝It is important to express factors such as cell proliferation and survival. Akt is a kind of original cancer legacy, a kind of constant activation and cancerization of cells, and a close connection with the cancer. Akt's シグナル伝达経路のservice cut をさらに解明するpurposeで, yeast two hybrid method uses いてAkt binding protein の同定を行った. As a result, the C-terminal domain of Akt was combined with the same determination, and the full-length cDNA was successful. Analyzes of aminic acid complexes, known functions, new molecules, and new functionsト法により本性伝子は、どの臓器にもubiquitousに発 appear していることが clarificationした. C-terminal domain にAkt acidification されるコンセンサス arrangement が presence し, in vitro kinase The assay is based on the EGF stimulation and activation of Akt and the acidification of Akt, and the possibility of Akt's new substrate. The intracellular localization of the antibody produced by the したところ, アクチンcytoskeletal system and the common localization are It also activates Akt by moving the tip of the cell at the same time and in a special way.さらにBoyden chamberを用いたmigration Assay results, C-terminal domain detection, cell movement, and connection in the presence of siRNA It prevents the movement of cells and controls the infiltration of cells.

项目成果

期刊论文数量（12）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Identification of RET autophosphorylation sites by mass spectrometry

DOI：
10.1074/jbc.m312600200
发表时间：
2004-04-02
期刊：
JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY
影响因子：
4.8
作者：
Kawamoto, Y;Takeda, K;Nakashima, I
通讯作者：
Nakashima, I

Biochemical and biological responses induced by coupling of Gab1 to phosphatidylinositol 3-kinase in RET-expressing cells.

DOI：
10.1016/j.bbrc.2004.08.095
发表时间：
2004-10
期刊：
Biochemical and biophysical research communications
影响因子：
3.1
作者：
Kengo Maeda;H. Murakami;Reiko Yoshida;M. Ichihara;A. Abe;M. Hirai;T. Murohara;Masahide Takahashi
通讯作者：
Kengo Maeda;H. Murakami;Reiko Yoshida;M. Ichihara;A. Abe;M. Hirai;T. Murohara;Masahide Takahashi

Induction of CRMP-2 by GDNF and analysis of the CRMP-2 promoter region