超高速電子環状反応を用いた生体分子の標識化と陽電子断層撮影への応用

利用超快电子环反应标记生物分子及其在正电子断层扫描中的应用

• 批准号: 19651095
• 负责人: 深瀬 浩一
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19651095/
• 关键词: イメージング; 陽電子断層撮影; 標識化; 蛍光標識; 固相合成; 糖タンパク質; 放射性標識; 電子環状化

昨年度までに、4位にカルボニル基を有する1-アザトリエンのアミノ基に対する速やかなアザ電子環状反応を利用し、新規な蛍光標識法、放射性放射性標識法などの生体分子標識法を確立した。この反応を用いて、抗体、糖タンパク質の標識に成功した。さらに我々の見出した分子内補助基を利用した効率的メルダールーシャープレスクリック反応を利用して、分子量数万の糖鎖クラスターの合成に成功し、これをさらに上記標識化法による標識化に成功した。一方で、上記の標識剤にリガンドを結合させることにより、特定の機能性タンパク質の特定部位のみを標識する手法も確立していたので、標的タンパク質に選択的に結合する分子を、上記の効率的メルダールーシャープレスクリック反応を基盤とする新たに見出したダイナミックコンビナトリアル手法によって創製することを検討した。具体的なターゲットしては、Grb2結合リガンドであるチロシンリン酸化環状ペプチドを選び、リン酸構造を認識するテンプレート構造として先に見出していたビスリジン構造に対して、リガンド存在下で、ペプチドライブラリーとの問でクリック反応を行うことにより、リガンド分子に特異的に結合する人工レセプター分子群を創製した。この人工レセプター分子群と蛍光標識チロシンリン酸化環状ペプチドとの結合実験により、両者が強く結合していることを見出した。さらにこの分子が細胞内で特定のターゲット分子と相互作用していることも確認した。

到去年，已经建立了诸如新型荧光标记和放射性放射性标记等生物分子标记方法，利用1-余三的快速AZA-电子环状反应与位置4的氨基组的快速反应。使用该反应，抗体和糖蛋白成功地标记了这种反应。此外，我们通过使用我们发现的室内分子辅助组利用有效的Melderlusher Press单击反应，成功合成了具有数万分子量的糖链簇，并通过上述标签方法实现了标记。另一方面，还已经建立了一种方法，仅通过将配体与上述标签剂结合到特定功能蛋白的特定位点，因此，我们研究了基于上述有效的高效MelderDellusher Press-clips-corters Press-corpersperspersperspersperspersperspersperspersperspersperspersperspersperspersperspersperspersperspersperspersperspersperspersperspersperspersperspersperspersperspersperspersperspersperssperspersperssperspers perserpers perserpers perspers presplick Reations，它们选择性地结合了靶蛋白。作为一个特定靶标，我们选择了酪氨酸磷酸化的环状肽，一种GRB2结合配体，并创建了一组人造受体分子，该分子通过在鉴于双糖结构的配体中对配体进行配体的结构，该分子通过对physine结构的结构进行配体进行单击反应，该分子均以phassine结构的形式识别phosplate结构。通过在这组人造受体分子和荧光标记的酪氨酸磷酸化循环肽之间的结合实验，发现两者是强烈结合的。此外，已经证实该分子与细胞内的特定靶分子相互作用。

项目成果

Acceleration of Cu(I)-Mediated Huisgen 1.3-Dipolar Cycloaddition byHistidine Derivatives : Facile Synthesis of Glycodendrimers for PETImaging

通过组氨酸衍生物加速 Cu(I) 介导的 Huisgen 1.3-偶极环加成反应：轻松合成用于 PET 成像的糖树枝状聚合物

• 发表时间: 2008
• 作者: Tanaka;K.;柳澤雅之;深瀬浩一;南香莉;南香莉;Eric R. 0. Siwu;K. Fukase;K. Fukase;K. Fukase;K. Tanaka;K. Tanaka;深瀬浩一;南香莉;田中克典;景山知佳;深瀬浩一;K. Fukase;E. R. O. Siwu;田中克典;南香莉;E. Siwu
• 通讯作者: E. Siwu

自己活性化クリックペプチドのダイナミックコンビナトリル合成

自激活点击肽的动态组合合成

• 发表时间: 2008
• 作者: Tanaka;K.;柳澤雅之;深瀬浩一;南香莉;南香莉;Eric R. 0. Siwu;K. Fukase;K. Fukase;K. Fukase;K. Tanaka;K. Tanaka;深瀬浩一;南香莉;田中克典;景山知佳
• 通讯作者: 景山知佳

新規ヘキサトリエン-β-カルボニル化合物

新型己三烯-β-羰基化合物

• 发表时间: 2008

Site-selective and nondestructive protein labeling through azaelectrocyclization-induced cascade reactions

通过氮杂电环化诱导的级联反应进行位点选择性和无损蛋白质标记

• 发表时间: 2008
• 期刊: Chem. Bio. Chem. 9
• 作者: Tanaka;K.
• 通讯作者: K.

A Submicrogram-Scale PET Imaging of Biomolecules : New Labeling of Lysines via 6p-Azaelectrocyclization

生物分子的亚微克级 PET 成像：通过 6p-Aza 电环化对赖氨酸进行新标记

• 发表时间: 2008
• 作者: Tanaka;K.;柳澤雅之;深瀬浩一;南香莉;南香莉;Eric R. 0. Siwu;K. Fukase;K. Fukase;K. Fukase;K. Tanaka;K. Tanaka
• 通讯作者: K. Tanaka