トランスポゼースを用いた新規点変異検出法の開発

使用转座酶开发新型点突变检测方法

• 批准号: 19657003
• 负责人: 中島 玲子
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Transdisciplinary Research Integration Center
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19657003/
• 关键词: RNA; 点変異; トランスポゾン

本知の遺伝子変異を検出するには、変異部位のシークエンス情報を用いない検出法が必要となる。このため、転移産物に対してアダプター配列つきoligo(dT)プライマーにより逆転写反応を行い、その後Muプライマーとアダプタープライマーを用いてPCRを行うことにより、Muの挿入された部位をMu配列とともに増幅できるかどうか検討した。分裂酵母のade6-M375アリルについては、すでに予備実験でRT-PCRによる検出が可能であることを確認しているが、PCRによる検出システムに比べ、実験条件により再現性が左右されるため、さらに詳細な条件検討を進めた。その後、前年度に行った線虫のRNA編集部位について、同様にRT-PCRによる検出を試みた。既知のRNA編集部位については、本方法により3つの変異部位のうち1つを検出できた。これにより、よりゲノムサイズの大きい材料を用いても、本方法により変異部位の同定が可能であることが示された。一方3つの部位のうち、1ヵ所しか検出できなかったことについては、変異部位の周辺配列や、分裂酵母に比較してより複雑なゲノム構造を持つことによる影響が予想される。この結果をふまえ、今後、より高等な生物種由来のゲノムDNAをスタート材料として用いる場合を想定して検討をしていく必要がある。

This knowledge is necessary for the identification of different parts of the information. The product of this shift is to be transferred to the position of Mu in the sequence of Mu in the reverse direction. Split Yeast Ade6-M375 is ready for RT-PCR detection, confirmation, PCR detection, comparison, reproducibility, detailed conditions, review, and review. In the following years, the RNA editing site of the line worm was detected in the previous year, and the RT-PCR was detected in the same year. We know that the RNA editing site is not detected, but the method is not detected. This method can be used to determine the identity of different parts. 3 parts of a square, 1 part of a square, 1 part of a The result is that the origin of higher biological species must be determined by DNA.

项目成果

Isolation of ARS plasmid and vector construction in S. japonicus

日本血吸虫ARS质粒的分离及载体构建

• 发表时间: 2008
• 作者: Ishikawa K;Onoda Y;Hikosaka K;川口達也・日浦勉・岩島範子・増永二之・大久保慎二・金子信博;笠原康裕;日浦勉;日浦勉;日浦勉;日浦勉;高叡瑞・明石典之・熊谷朋子・三部光男・今泉友希・外薗香菜・笠原康裕・島野智之;日浦勉;Reiko Nakajima
• 通讯作者: Reiko Nakajima

Muファージの転移標的選択機構

Mu噬菌体转移靶点选择机制

• 发表时间: 2007
• 作者: 柳原 克彦;中島 玲子
• 通讯作者: 中島 玲子