胃カルパインの粘膜特異的発現を応用した粘液分泌機構解析と食品の粘膜保護機能検索

应用胃钙蛋白酶粘膜特异性表达分析粘液分泌机制并寻找食物的粘膜保护功能

• 批准号: 19658057
• 负责人: 反町 洋之
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: Tokyo Metropolitan Organization for Medical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19658057/
• 关键词: カルパイン; 胃; 酵素; 蛋白質; プロテオリシス; カルシウム; ジフテリアトキシン; 表層粘液細胞

カルパインは細胞質をはじめ、内膜系の内外も含め、細胞内の様々なところに存在し、活性はCa^<2+>に制御されるシステインプロテアーゼである。基質に直接作用し、その活性・構造を変換・制御するため、モジュレータプロテアーゼと呼ばれる。ヒトでは15種類の遺伝子から数十種類のタンパク質が発現しており、スーパーファミリーを形成している。その中で、nCL-2/-2'は胃に発現が限定されるのみならず、興味深い構造をもつ選択的スプライス産物となって、同時に発現している。我々はnCL-2の胃での局在を解析した結果、nCL-2/-2'が胃の表層粘液細胞に限定的に局在する事、ゴルジから小胞体への逆輸送に関与するβ-COPと相互作用してこれを基質とし、ゴルジに存在する事を見出し、粘液分泌に重要な機能を果たすことが強く示唆された。そこで活性中心を点変異させることで不活性型nCL-2/2'を野生型の代わりに発現するノックインマウスを作出した結果、野生型に比べてストレス性胃出血傾向の著しいことが明らかとなった。さらに上記のノックインマウスと、発現細胞をジフテリアトキシンで特異的に殺傷する系を用いて、胃の保護機構を分子レベルで解析し、その機能を補助、強化する食品成分を検索することを目指した。そのために、マウスnCL-2遺伝子クローンを再びクローニングし、nCL-2の胃表層粘液細胞特異的発現のメカニズムなどを知るためにプロモータ領域の解析を試みた。

The cytoplasm of the cell, the inner and outer membrane of the cell, the existence of the cell, the activity of the Ca^<2+>, the control of the cell. The substrate acts directly on the substrate, and the activity and structure of the substrate are changed. 15 kinds of seeds, dozens of kinds of seeds and seeds are formed. In addition, nCL-2/-2'is found in the stomach, which is limited to the inside of the stomach. The structure of interest is deep in the middle of the stomach. The product of the selected species is found in the middle of the stomach. The results of the analysis of nCL-2 in gastric tissue show that nCL-2/-2'is a key factor in the regulation of gastric mucosal cells, and that β-COP interaction is related to the reverse transport of small cells. The active center is different from the wild type. In addition, it is noted that the development of cell specific killing system, gastric protective mechanism, molecular analysis, functional supplement, and enhancement of food ingredients The analysis of gastric mucus cell-specific development of nCL-2 and nCL-2 was conducted.

项目成果

Unconventional calpains.

非常规钙蛋白酶。

• 发表时间: 2007
• 作者: Sorimachi;H.
• 通讯作者: H.

The importance of conserved amino acid residues in protease sub-domain IIb and the IS2 region in p94 for constitutive autolysis.

蛋白酶亚结构域 IIb 中的保守氨基酸残基和 p94 中的 IS2 区域对于组成型自溶的重要性。

• 发表时间: 2008
• 期刊: FEBS Lett. 582
• 作者: Ono;Y.
• 通讯作者: Y.

Myogenic stage, sarcomere length, and protease activity modulate localization of muscle-specific calpain

• DOI: 10.1074/jbc.m610806200
• 发表时间: 2007-05-11
• 期刊: JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY
• 影响因子: 4.8
• 作者: Ojima, Koichi;Ono, Yasuko;Sorimachi, Hiroyuki
• 通讯作者: Sorimachi, Hiroyuki

Stomach-specific calpain, nCL-2/calpain 8, is active without calpain regulatory subunit and oligomerizes through C2-like domains

• DOI: 10.1074/jbc.m703168200
• 发表时间: 2007-09-21
• 期刊: JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY
• 影响因子: 4.8
• 作者: Hata, Shoji;Doi, Naoko;Sorimachi, Hiroyuki
• 通讯作者: Sorimachi, Hiroyuki