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新規タンパク質成熟化機構の解明

阐明新型蛋白质成熟机制

基本信息

批准号：
19658129
负责人：
小林達彦
金额：
$ 2.3万
依托单位：
University of Tsukuba
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19658129/
关键词：
タンパク質成熟化アポタンパク質ホロタンパク質

项目摘要

本研究では、Jl菌の低分子量型ニトリルヒドラターゼで翻訳後成熟化に関わる新規タンパク質成熟化機構について、タンパク質成熟化前後の各タンパク質の挙動や、タンパク質成熟化機構で最も重要な役割を果たすと予想できる複合体中のタンパク質について機能解析し、本機構をより詳細に解明することを目的とした。本低分子量型ニトリルヒドラターゼのアポ酵素やホロ酵素は、担体および溶出条件など精製の過程で同じ条件を用いた場合に溶出パターンが異なるころを見いだした。そこで、アポ酵素とホロ酵素のそれぞれを清製し、それらの諸性質を比較した。可視紫外線吸収スペクトルならびに円偏光二色性スペクトルなどの分光学的解析を行った結果、両者の構造は異なり、成熟化前後での構造変化が起こることを確認した。また、低分子量型ニトリルヒドラターゼのホロはαβ両サブユニットからなる4量体構造をとることが既に判明していたが、アポ酵素についてゲル濾過により4次構造を測定した結果、4量体と2量体の2つのタイプが存在することを明らかにした。我々が発見した複合体と低分子量型ニトリルヒドラターゼのアポ酵素を混合したところ、ニトリルヒドラターゼ活性が上昇したことから本複合体は成熟化機構に重要な役割を果たすことを証明した、さらに、混合後に活性が上昇したタンパク質を清製し、可視紫外線吸収スペクトルならびに円偏光二色性スペクトルなどの分光学的解析を行ったところ、ホロ酵素を同一のスペクトルをそれぞれ示した。これらの結果より、成熟化の酵素は非活性だけではく構造の面からもホロ酵素を同一であることを証明した。

In this study, low molecular weight Jl bacteria, low molecular weight, low molecular weight, mature, mature, This agency is responsible for clarifying the purpose of the meeting. In this low molecular weight compound, the enzyme enzyme, the carrier enzyme, the dissolution condition, the process and the condition were the same as those of the low molecular weight compound. The enzyme, the enzyme. It can be seen that the ultraviolet ray absorbs light, dichroism, optical analysis, optical analysis and optical analysis. Low molecular weight, low molecular weight, high molecular weight, high molecular weight, low molecular weight, high molecular weight, high molecular weight, low molecular weight, high molecular We can see that the complex, low molecular weight, high molecular weight, low molecular weight, low molecular weight, high molecular weight, low molecular weight, enzyme, enzyme It can be seen that the ultraviolet ray absorbs the light, the dichroism, the optical analysis, the enzyme and the enzyme in the same way. The results show that the mature enzyme is not active to make noodles and the enzyme is the same as the enzyme.