ロドコッカス(Rhodococcus)属微生物の遺伝子組換え系(宿主・ベクター系)の開発
ロドコッカス(Rhodococcus)属微生物の遺伝子組換え系(宿主・ベクター系)の開発
批准号:
04F04200
负责人:
小林 達彦
金额:
$1.54万
依托单位:
依托单位国家:
日本
项目类别:
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份:
2004
资助国家:
日本
项目状态:
已结题
起止时间:
2004 至 2005
中文摘要
Rhodococcus属は難分解性化合物分解能が高く、環境浄化のみならず有用物質生産に利用されつつある。また、有機溶媒耐性と強い酸化還元能を有する為、特殊なバイオプロセス環境下の次世代宿主の候補として挙げられている。本研究では、昨年度構築に成功した(Rhodococcus rhodocurous J1菌由来のニトリラーゼ誘導発現系を基に開発した新規誘導発現ユニットを有する)Rhodococcus属用の誘導型高発現ベクターpREIT19の機能性を確認した。グラム陰性細菌Pseudomonas putida N19-2株のイソニトリルヒドラターゼを対象として発現検討を行った結果、誘導剤を添加した場合においてのみ本酵素がSDS-PAGE上で著量発現しているのを確認することが出来た。様々なロドコッカス属微生物を宿主として導入しpREIT19が利用可能なロドコッカス属微生物の宿主域を調査した。その結果、誘導剤を添加した場合においてのみ、R.erythropolis PR4株をはじめ、R.fascians、R.ruber、R.rhodochrous、R.percolatus、R.opacusや(R.erythropolis PR4株とは異なる)2種類のR.erythropolisの菌株で複製・機能することを実証した。誘導発現効果はイソバレロニトリルのみならず、ε-カプロラクタムの場合でも確認でき、これらの結果はロドコッカス属微生物で広く利用可能、即ち幅広い宿主域で機能できることを示唆している。
英文摘要
Rhodococcus属は難分解性化合物分解能が高く、環境浄化のみならず有用物質生産に利用されつつある。また、有機溶媒耐性と強い酸化還元能を有する為、特殊なバイオプロセス環境下の次世代宿主の候補として挙げられている。本研究では、昨年度構築に成功した(Rhodococcus rhodocurous J1菌由来のニトリラーゼ誘導発現系を基に開発した新規誘導発現ユニットを有する)Rhodococcus属用の誘導型高発現ベクターpREIT19の機能性を確認した。グラム陰性細菌Pseudomonas putida N19-2株のイソニトリルヒドラターゼを対象として発現検討を行った結果、誘導剤を添加した場合においてのみ本酵素がSDS-PAGE上で著量発現しているのを確認することが出来た。様々なロドコッカス属微生物を宿主として導入しpREIT19が利用可能なロドコッカス属微生物の宿主域を調査した。その結果、誘導剤を添加した場合においてのみ、R.erythropolis PR4株をはじめ、R.fascians、R.ruber、R.rhodochrous、R.percolatus、R.opacusや(R.erythropolis PR4株とは異なる)2種類のR.erythropolisの菌株で複製・機能することを実証した。誘導発現効果はイソバレロニトリルのみならず、ε-カプロラクタムの場合でも確認でき、これらの結果はロドコッカス属微生物で広く利用可能、即ち幅広い宿主域で機能できることを示唆している。
期刊论文(1)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
Nitrile degradation by Rhodococcus : Useful microbial metabolism for industrial production
红球菌的腈降解:工业生产中有用的微生物代谢
DOI:
--
发表时间:
2005
期刊:
Actinomycetol. 19
影响因子:
--
作者:
[Zhou, Z, Hashimoto, Y., Kobayashi, M.]
通讯作者:
M.
Elucidation of diverse curcumin metabolism by microorganisms
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批准号:23H00320
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
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资助金额:$30.53万
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财政年份:2023
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负责人:小林 達彦
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依托单位:
Elucidation and application of diverse catechin metabolism by microorganisms
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批准号:21K18218
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项目类别:Grant-in-Aid for Challenging Research (Pioneering)
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资助金额:$16.64万
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财政年份:2021
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负责人:小林 達彦
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依托单位:
様々な微生物の新規クルクミン代謝に関する研究
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批准号:11F01396
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项目类别:Grant-in-Aid for JSPS Fellows
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资助金额:$1.22万
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财政年份:2011
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负责人:小林 達彦
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依托单位:
ニトリル代謝関連酵素群の分子機能解析と有用物質生産への利用
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批准号:23248013
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
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资助金额:$11.73万
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财政年份:2011
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负责人:小林 達彦
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依托单位:
N3化合物分解代謝に関わる酵素の機能解析
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批准号:22651024
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项目类别:Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
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资助金额:$2.11万
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财政年份:2010
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负责人:小林 達彦
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依托单位:
微生物酵素の新規活性化機構の解析
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批准号:21658026
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项目类别:Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
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资助金额:$2.11万
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财政年份:2009
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负责人:小林 達彦
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依托单位:
アジ化物代謝系の分子機能解析
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批准号:07F07432
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项目类别:Grant-in-Aid for JSPS Fellows
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资助金额:$1.47万
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财政年份:2007
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负责人:小林 達彦
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依托单位:
新規タンパク質成熟化機構の解明
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批准号:19658129
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项目类别:Grant-in-Aid for Exploratory Research
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资助金额:$2.3万
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财政年份:2007
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负责人:小林 達彦
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依托单位:
アーキアにおけるRNA末端形成システムの解明
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批准号:16658033
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项目类别:Grant-in-Aid for Exploratory Research
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资助金额:$2.3万
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财政年份:2004
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负责人:小林 達彦
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依托单位:
大腸菌がD体のアミノ酸を単一炭素源として利用する!
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批准号:14656032
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项目类别:Grant-in-Aid for Exploratory Research
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资助金额:$2.11万
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财政年份:2002
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负责人:小林 達彦
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依托单位:
重金属コバルトをターゲティングするタンパク質の分子認識機構の解明と応用
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批准号:12019205
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
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资助金额:$1.22万
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财政年份:2000
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负责人:小林 達彦
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依托单位:
コバルト輸送タンパク質の構造と機能解析
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批准号:11876072
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项目类别:Grant-in-Aid for Exploratory Research
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资助金额:$1.34万
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财政年份:1999
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负责人:小林 達彦
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依托单位:
コバルト輸送タンパク質の構造と機能解析
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批准号:10876021
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项目类别:Grant-in-Aid for Exploratory Research
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资助金额:$1.02万
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财政年份:1998
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负责人:小林 達彦
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依托单位:
重金属含有酵素・ニトリルヒドラターゼの構造機能解析
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批准号:08249219
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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资助金额:$1.47万
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财政年份:1996
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负责人:小林 達彦
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依托单位:
重金属トランスポーターの構造と機能
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批准号:07276222
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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资助金额:$1.6万
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财政年份:1995
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负责人:小林 達彦
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依托单位:
アミド分解および合成酵素の構造解析とその応用
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批准号:05760068
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项目类别:Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
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资助金额:$0.58万
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财政年份:1993
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负责人:小林 達彦
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依托单位:
微生物におけるニトリル分解酵素の機能解析とその応用に関する研究
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批准号:04760080
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项目类别:Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
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资助金额:$0.58万
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财政年份:1992
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负责人:小林 達彦
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依托单位:
微生物ニトリラーゼの応用酵素学的研究
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批准号:02953061
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项目类别:Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (Research Fellowship)
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资助金额:$0.64万
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财政年份:1990
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负责人:小林 達彦
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依托单位:
海外基金