病態時に変動する転写因子活性のin vivoイメージングに基づく医薬品開発戦略

基于病理条件下转录因子活性变化的体内成像的药物开发策略

• 批准号: 19659038
• 负责人: 西川 元也
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19659038/
• 关键词: イメージング; 転写因子; 活性酸素; ハイドロダイナミクス法; 肝臓

炎症などの病態時に活性化するAP-1やNF-kappaBなどの転写因子の活性変動を評価することで、種々疾患の病態解明ならびに医薬品候補化合物のスクリーニングが可能と考えられる。本研究では、レポーターアッセイをin vivoに適用することで、転写因子活性の生体内評価システムの開発を試みた。昨年度開発した、NF-kappaB活性に依存してホタルルシフェラーゼを発現するプラスミド(pNFkappaB-Luc)を利用した肝臓NF-kappaB活性評価システムを用い、癌転移時のNF-kappB活性変動について評価した。作製したモデルマウスに対し、門脈からマウス結腸癌細胞を注入したところ、肝臓中ルシフェラーゼ活性の一過性増大が観察された。この活性増大は、予め肝臓マクロファージであるKupffer細胞を機能的に除去することで消失した。また、結腸癌細胞に代えてマウスマクロファージを注入した場合には活性上昇が認められなかった。さらに癌細胞を注入した際の活性上昇は、肝臓指向型カタラーゼの投与により有意に低下した。以上の結果から、癌細胞が門脈から肝臓に流入すると、おもにKupffer細胞がこれを認識し、その過程において活性酸素、中でも過酸化水素が産生されることで肝細胞でNF-kappaBが活性化することが示唆された。一方、癌細胞内での活性化を評価するために、pNFkappaB-Lucを安定に導入した結腸癌細胞colon26/NFkappaB-Lucを樹立した。この細胞でのルシフェラーゼ活性は、マウスへの移植により大幅に増大したことから、癌細胞中のNF-kappaB活性も、癌細胞が門脈内に流入し、Kupffer細胞などとの相互作用により活性化することが示唆された。以上、転写因子活性の生体内評価システムの開発に成功した。

When inflammation な ど の pathological に activeness す や る AP - 1 NF - kappaB な ど の planning write factor の activity - move を review 価 す る こ と で, kind of の 々 disease pathological interpret な ら び に medical 薬 product alternate compound の ス ク リ ー ニ ン グ が possible と え ら れ る. This study で は, レ ポ ー タ ー ア ッ セ イ を in vivo に applicable す る こ と で, planning to write factor activity の born in vivo evaluation of 価 シ ス テ ム の open 発 を try み た. Yesterday's annual open 発 し た に, NF kappaB activity dependent し て ホ タ ル ル シ フ ェ ラ ー ゼ を 発 now す る プ ラ ス ミ ド (pNFkappaB - Luc) を using し た routine liver NF kappaB - active review 価 シ ス テ ム を い, cancer planning の NF - kappB activity - move に つ い て review 価 し た. Cropping し た モ デ ル マ ウ ス に し seaborne, portal か ら マ ウ ス を colon cancer cells into し た と こ ろ in a routine, liver ル シ フ ェ ラ ー ゼ active の transient raised large が 観 examine さ れ た. <s:1> <s:1> increased activity た, め liver <s:1> ロファ ジである ジである ジである removal of を function of Kupffer cells する する とで とで disappearance of た た. ま た, colon cells に generation え て マ ウ ス マ ク ロ フ ァ ー ジ を injection し た occasions に は activity rise が recognize め ら れ な か っ た. The injection of さらに cancer cell を into the <s:1> た line increases the <s:1> activity た, while the injection of liver-directed カタラ ゼ ゼ <s:1> reduces the に activity た of によ <s:1>. の above results か ら, cancer cells が portal か ら routine liver に inflows す る と, お も に Kupffer cells が こ れ を し, そ の process に お い て in active acid, で も too acidic water element が produce さ れ る こ と で hepatocellular で NF - kappaB が activeness す る こ と が in stopping さ れ た. One side, the intracellular で <s:1> activation を evaluation 価するために, pNFkappaB-Lucを diadiotherapy に introduction of <s:1> た colon cancer cells colon26/NFkappaB-Lucを establishment of た. こ の cells で の ル シ フ ェ ラ ー ゼ active は, マ ウ ス へ の transplantation に よ り に sharply raised large し た こ と か ら, も の NF kappaB - activity in cancer cells, cancer cells が に inflows し, Kupffer cells within the portal な ど と の interaction に よ り activeness す る こ と が in stopping さ れ た. The above: 転 write the factor activity, in vivo evaluation of 価システム, development of に, success of た.

项目成果

Analysis of in vivo nuclear factor-kappaB activation during liver inflammation in mice : prevention by catalase delivery.

小鼠肝脏炎症期间体内核因子-κB 激活的分析：通过过氧化氢酶递送进行预防。

• 发表时间: 2007
• 期刊: Molecular Pharmacology 71(2)
• 作者: Shitara Y;Horie T;Sugiyama Y;設楽悦久;設楽悦久;設楽悦久;設楽悦久;永松佳子;設楽悦久;Yoshihisa Shitara,;Hyoudou K et al.
• 通讯作者: Hyoudou K et al.

Targeted delivery of catalase to liver cells for inhibition of NF-kappaB activation in tumor and liver cells during hepatic tumor metastasis.

将过氧化氢酶靶向递送至肝细胞，以抑制肝肿瘤转移过程中肿瘤和肝细胞中 NF-kappaB 的激活。

• 发表时间: 2007
• 作者: Kobayashi Y;Nishikawa M;et. al.
• 通讯作者: et. al.

Differntiation of immature myeloid cells by PEGylated catalase for cancer immunotherapy.

通过聚乙二醇化过氧化氢酶分化未成熟骨髓细胞用于癌症免疫治疗。

• 发表时间: 2007
• 作者: Kobayashi Y;Nishikawa M;Hashida M.
• 通讯作者: Hashida M.

等張溶液の血管内投与によるin vivo遺伝子発現の再活性化.

通过血管内施用等渗溶液重新激活体内基因表达。

• 发表时间: 2007
• 作者: 西川元也;他
• 通讯作者: 他

Inhibition of tumor cell growth in the liver by RNA interference-mediated suppression of HIF-1α expression in tumor cells and hypatocytes

通过 RNA 干扰介导的抑制肿瘤细胞和肝细胞中 HIF-1α 的表达来抑制肝脏肿瘤细胞的生长

• 发表时间: 2008
• 期刊: Gene Therapy 15
• 作者: Takahashi Y;et al.
• 通讯作者: et al.