細胞の微細形態形成に関わる新規遺伝子を同定する手法の開発

开发一种方法来鉴定参与细胞微形态发生的新基因

• 批准号: 19659043
• 负责人: 原田 彰宏
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: Gunma University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19659043/
• 关键词: gene trap法; PC12細胞; シナプス小胞; Cre-loxP; レトロウイルス; 脳・神経; 神経科学; バイオテクノロジー; 細胞・組織; ウイルス

申請者は、神経細胞のモデルとして頻用されるPC12細胞を用いて、シナプス小胞の輸送や分布に関連する遺伝子を同定することを目的に、レトロウイルスを感染させて形態学的スクリーニングを行う新しいgene trap(遺伝子トラップ)法を開発し、現在いくつかの興味深い新規遺伝軸子の同定を始めている。そこで申請者はレトロウイルスベクターを用いたgene trap法のシステムを開発し、PC12細胞においてその応用に成功した。このシステムは、レトロウイルスベクターを、目的とする培養細胞のゲノムDNAに挿入することで遺伝子の機能を不活性化させるものである。ベクターは、ベクターの挿入された細胞を高率に濃縮できるように工夫されているため、それらの細胞を形態学的な特徴によってスクリーニングすることが初めて可能になった。そして、そのベクターの性質を利用してベクターが挿入された遺伝子を簡便に同定し、更にCre-loxP技術を用いて、その遺伝子が異常な表現型の原因か否か簡便に確認できるという優れた利点を持つ。申請者はこの技術を用いて、PC12細胞でシナプス小胞(正確にはシナプス小胞様小胞)の量や分布に異常を引き起こす遺伝子をいくうか同定した。更にそのうちのある遺伝子は脳に多く発現し、ヒトの神経疾患との関連がしられているため、その遺伝子の欠損マウスを作製し、その表現型を現在解析している。また他の細胞でもこのスクリーニングが行えるか、現在検討中である。

The applicant developed a new gene trap(gene trap) method for the identification of genes related to the distribution of transport and distribution of neurons in PC12 cells. The application of the gene trap method was successfully carried out in PC12 cells. The culture of these cells requires the insertion of DNA into the cells and the inactivation of their functions. The cell morphology characteristics of the cells were studied. The nature of the gene can be easily identified by using the gene, and the gene can be easily identified by using the Cre-loxP technology. The applicant applied this technology to PC12 cells, and the quantity distribution of cells (correct cells) was abnormal. In addition, there are many kinds of diseases in the brain, such as brain damage, and brain damage. He is the only one who has the ability to do so.

项目成果

Neuron-specific recombination by Cre recombinase inserted into the murine tau locus

• DOI: 10.1016/j.bbrc.2008.03.103
• 发表时间: 2008-06-06
• 期刊: BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS
• 影响因子: 3.1
• 作者: Muramatsu, Kazuhiro;Hashimoto, Yukiko;Harada, Akihiro
• 通讯作者: Harada, Akihiro

Involvement of Proton-Sensing TDAG8 in Extracellular Acidification-Induced Inhibition of Proinflammatory Cytokine Production in Peritoneal Macrophages

• DOI: 10.4049/jimmunol.0803466
• 发表时间: 2009-03-01
• 期刊: JOURNAL OF IMMUNOLOGY
• 影响因子: 4.4
• 作者: Mogi, Chihiro;Tobo, Masayuki;Okajima, Fumikazu
• 通讯作者: Okajima, Fumikazu

Rabil is required for synchronous secretion of chondroitin proteoglycans after fertilization in Caenorhabditis elegans.

秀丽隐杆线虫受精后同步分泌软骨素蛋白多糖需要 Rabil。

• 发表时间: 2008
• 期刊: Journal of cell science 121
• 作者: 亀井数正;他8名;Yukio Kato;Hisanobu Sadakata;Chihiro Mogi;Takefumi Uemura;Kazuhiro Muramatsu;Yukiko Hashimoto;Miyuki Sato
• 通讯作者: Miyuki Sato

The Rab8 GTPase regulates apical protein loclizationin in testinal cells

Rab8 GTPase 调节睾丸细胞中的顶端蛋白定位

• 发表时间: 2007
• 期刊: Nature 448
• 作者: 亀井数正;他8名;Yukio Kato;Hisanobu Sadakata;Chihiro Mogi;Takefumi Uemura;Kazuhiro Muramatsu;Yukiko Hashimoto;Miyuki Sato;Takashi Sato
• 通讯作者: Takashi Sato

tau-Creノックインマウスどtau-Cre PRマウスは神経細胞特異的及び時期特異的にCre recombinaseによる組換えを生じる

Tau-Cre 敲入小鼠和 tau-Cre PR 小鼠以神经元特异性和周期特异性方式产生 Cre 重组酶介导的重组。

• 发表时间: 2008
• 作者: 亀井数正;他8名;Yukio Kato;Hisanobu Sadakata;Chihiro Mogi;Takefumi Uemura;Kazuhiro Muramatsu;Yukiko Hashimoto;Miyuki Sato;Takashi Sato;Keisuke Yamamoto;村松一洋;村松一洋
• 通讯作者: 村松一洋