細胞の極性形成、維持に関与する蛋白の欠失マウスの作成とその器官形成の解析

缺乏参与细胞极性形成和维持的蛋白质的小鼠的创建以及其器官发生的分析

• 批准号: 14034209
• 负责人: 原田 彰宏
• 金额: $ 4.35万
• 依托单位: Gunma University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14034209/
• 关键词: 細胞極性; TGN; rab; SNARE; ノックアウトマウス; Cre; loxP

細胞の極性は細胞の機能に重要な役割を持つ。例えば上皮細胞は頂端側(apical)、側底側(basolateral)という極性を持つことが分泌等の機能に必須であり、神経細胞も軸索、樹状突起という極性を持つことが刺激の伝達にとって必須である。合成された分泌蛋白や膜蛋白はTGN(トランスゴルジネットワーク)等においてapicalやbasolateralに行く輸送小胞に分配、濃縮された後、目的地に運ばれてその役割を果たす。この一連の方向性を持った輸送を選別輸送と呼ぶ。選別輸送は細胞の極性の形成、維持にも重要と考えられている。近年、選別輸送に重要と考えられている分子として、低分子量GTP結合蛋白質であるrab蛋白や、SNARE蛋白等が同定されている。しかし、これらの蛋白の研究は主に培養細胞を使って行われており、組織や個体における役割が明らかでないこと等から、蛋白の機能はこれらの蛋白を細胞から欠失させて再検討する必要がある。そこで本研究では、gene targeting法を用いて、これらの分子(具体的にはrab蛋白であるrab8やSNARE蛋白であるsyntaxin3, VAMP7等)の欠失マウスを作製し、その細胞の極性の形成、維持が正常に行われるか、器官形成にどのような影響を及ぼすかを解明しようとしている。これらの遺伝子を欠失したマウスは発生に異常を来し、胎生致死になる可能性があるため、Cre-loxPシステムを用いた組織、時期特異的gene targetingを行い、目的とする器官(神経、上皮組織など)における異常を解析する予定である。現在ノックアウトマウス作製用のベクターを作成中であり、近日中にES細胞に導入する予定である。

Cell <s:1> polarity に cell <s:1> function に important な function を support Example え ば epithelial cells は top side (apical), side bottom side (basolateral) と い う polarity を hold つ こ と が secretion の function に must で あ り, god 経 cell も axon, dendritic protrusions と い う polarity を hold つ こ と が stimulus の 伝 da に と っ て must で あ る. Synthetic さ れ た や secreted protein membrane protein は TGN (ト ラ ン ス ゴ ル ジ ネ ッ ト ワ ー ク) such as に お い て apical や basolateral に line く conveying vesicular に distribution, enrichment さ れ た, destination after に luck ば れ て そ の "を cut fruit た す. <s:1> continuous <s:1> directional を holding った conveying を selective conveying と call ぶ. The selection and delivery of <s:1> cell <s:1> polarity <e:1> is important for the formation and maintenance of に る and と. Important と examination in recent years, choose don't conveying に え ら れ て い る molecular と し て, low molecular weight GTP binding protein made で あ る rab protein や, c2-style protein が be さ れ て い る. し か し, こ れ ら の protein は の research main cultivation に cell を っ て line わ れ て お り, organization や individual に お け る service cut が Ming ら か で な い こ と etc か ら, protein の functional は こ れ ら の protein を cell か ら owe lost さ せ て again beg す 検 る necessary が あ る. そ こ で this study で は, gene targeting method を with い て, こ れ ら の molecule (specific に は rab protein で あ る rab8 や c2-style protein で あ る syntaxin3, VAMP7) の owe lost マ ウ ス を as し, そ の の cell polarity の line form, maintain normal に が わ れ る か, organ formation に ど の よ う な influence を and ぼ す か を interpret し よ う と し て い る. こ れ ら の heritage 伝 を owe son lost し た マ ウ ス は 発 に abnormal を to し, viviparous death に な る possibility が あ る た め, Cre - loxP シ ス テ ム を with い た organization, period of specific gene targeting を line い, purpose と す る organs (god 経, epithelial tissue な ど) に お け る abnormal を parsing す る designated で あ る. Now ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス for making の ベ ク タ ー を made in で あ り, recently に に ES cells in import す る designated で あ る.

项目成果

Akihiro Harada: "MAP2 is required for dendrite elongation, PKA anchoring in dendrites, and proper PKA signal transduction"Journal of Cell Biology. 158・3. 541-549 (2002)

Akihiro Harada：“MAP2 是树突伸长、PKA 锚定在树突中以及适当的 PKA 信号转导所必需的”Journal of Cell Biology 158・3 (2002)。

Takashi Sato: "Localization of cAMP-dependent protein kinase in the actin and microtubule cytoskeletons in mouse hippocampal neurons"Neuroscience Letters. 325・2. 83-86 (2002)

Takashi Sato：“小鼠海马神经元肌动蛋白和微管细胞骨架中 cAMP 依赖性蛋白激酶的定位”《神经科学快报》325・2（2002 年）。