細胞の極性を制御する遺伝子の組織、個体での機能とその分子機構の解明

阐明控制细胞极性的基因的组织和个体功能及其分子机制

• 批准号: 21H02658
• 负责人: 原田 彰宏
• 金额: $ 11.07万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21H02658/
• 关键词: 細胞極性; 極性輸送; 上皮細胞; Rab; 細胞極性; 極性輸送

（研究１）Rab8結合蛋白EHBP1L1に関する研究：EHBP1L1のKOマウスでは赤芽球の脱核に異常が生じ非常に重篤な貧血を呈した。今年度は以下の解析を行い脱核の分子機構の解明を行った。１．免疫染色によるEHBP1L1やその結合蛋白CD2AP等の赤芽球、赤血球での細胞内局在を解明した。２．CD2AP等のKO, KDにより核の異常が生じるか検討を行った。３．KOで赤血球膜への局在が変化する分子が脱核に関与する可能性が高いため、これらの脱核中の細胞内局在やEHBP1L1との相互作用の解明を行った。（研究２）apical面への輸送に重要な他の遺伝子のKOマウスを解析し、apical輸送の生体 での他の機能を解析した。：１．我々は小腸特異的syntaxin3 KOマウスにおいて、小腸上皮細胞の増殖亢進という表現型を見出したため以下A,Bを行った。A.KOと野生型の小腸でmRNAの種類と発現量をRNAseqやmicroarrayによって比較し、KOマウスでどのようなシグナル伝達系が亢進するかを解明した。B.小腸上皮細胞の初代培養で in vivoの現象が再現可能であることを確認し、knockdownによる解析を行った。２．Rab10について：既に我々はRab8とRab10が共に働くことが線毛形成に必要なことを示しているが、Rab10 KOマウスは胎生早期に致死のため 、その極性輸送における機能は明らかでない。そこで我々は小腸特異的KOマウスなどを作成したが、特に異常が見られなかった。（研究３）EHBP1L1結合蛋白に関する研究：我々はEHBP1L1の結合蛋白としてCD2APを同定し、さらにCD2APの結合蛋白として、apical面の膜蛋白質に結合する可能性のあるタンパク質を同定したため、その局在などを解析した。

(Study 1) Rab8 binding protein EHBP1 L1 related studies: EHBP1 L1 KO and its expression in red buds and abnormal enucleation, especially in severe anemia. This year's analysis of the molecular structure of nuclear DNA 1. Immunostaining for EHBP1 L1 and CD2AP in erythrocytes, erythrocytes and other intracellular structures 2. CD2AP and other KO, KD, nuclear anomaly generation, detection and discussion. 3. The interaction between EHBP1 and EHBP1 L1 in the intracellular structure of KO cells is highly probable. (2) Apical surface transport important for the analysis of other genes, apical transport of biological function analysis: 1. The expression pattern of small intestine specific syntaxin3 KO is shown below A and B. A. Comparison of mRNA expression levels in KO and wild-type small intestine, and clarification of mRNA expression levels in KO and wild-type small intestine. B. The phenomenon of intestinal epithelial cells in vivo can be reproduced. 2. Rab10: Rab 8: Rab10: Rab8: Rab10: Rab10: Rab 8: Rab10: Rab10: Rab I'm not going to be able to do that. (Study 3) EHBP1 L1 binding protein related studies: We analyzed the possibility of binding EHBP1 L1 binding protein to CD2AP, CD2AP binding protein to apical-surface membrane protein, and the relationship between binding protein and CD2AP binding protein.

项目成果

Loss of Rab6a in the small intestine causes lipid accumulation and epithelial cell death from lactation

小肠中 Rab6a 的缺失会导致脂质积累和哺乳期上皮细胞死亡

• DOI: 10.1096/fj.202000028r
• 发表时间: 2020
• 期刊: The FASEB Journal
• 作者: Iwaki Ayano;Moriwaki Kenta;Sobajima Tomoaki;Taniguchi Manabu;Yoshimura Shin‐ichiro;Kunii Masataka;Kanda Satoshi;Kamada Yoshihiro;Miyoshi Eiji;Harada Akihiro
• 通讯作者: Harada Akihiro

The Hypothalamic Paraventricular Nucleus Is the Center of the Hypothalamic?Pituitary?Thyroid Axis for Regulating Thyroid Hormone Levels

下丘脑室旁核是下丘脑、垂体、甲状腺轴调节甲状腺激素水平的中心

• DOI: 10.1089/thy.2021.0444
• 发表时间: 2021
• 期刊: Thyroid
• 影响因子: 6.6
• 作者: Kondo Yuri;Ozawa Atsushi;Kohno Daisuke;Saito Kazuma;Buyandalai Battsetseg;Yamada Sayaka;Horiguchi Kazuhiko;Nakajima Yasuyo;Shibusawa Nobuyuki;Harada Akihiro;Yokoo Hideaki;Akiyama Hideo;Sasaki Tsutomu;Kitamura Tadahiro;Yamada Masanobu
• 通讯作者: Yamada Masanobu