細胞の極性を制御する遺伝子の組織、個体での機能とその分子機構の解明

阐明控制细胞极性的基因的组织和个体功能及其分子机制

• 批准号: 21H02658
• 负责人: 原田 彰宏
• 金额: $ 11.07万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21H02658/
• 关键词: 細胞極性; 極性輸送; 上皮細胞; Rab; 細胞極性; 極性輸送

（研究１）Rab8結合蛋白EHBP1L1に関する研究：EHBP1L1のKOマウスでは赤芽球の脱核に異常が生じ非常に重篤な貧血を呈した。今年度は以下の解析を行い脱核の分子機構の解明を行った。１．免疫染色によるEHBP1L1やその結合蛋白CD2AP等の赤芽球、赤血球での細胞内局在を解明した。２．CD2AP等のKO, KDにより核の異常が生じるか検討を行った。３．KOで赤血球膜への局在が変化する分子が脱核に関与する可能性が高いため、これらの脱核中の細胞内局在やEHBP1L1との相互作用の解明を行った。（研究２）apical面への輸送に重要な他の遺伝子のKOマウスを解析し、apical輸送の生体 での他の機能を解析した。：１．我々は小腸特異的syntaxin3 KOマウスにおいて、小腸上皮細胞の増殖亢進という表現型を見出したため以下A,Bを行った。A.KOと野生型の小腸でmRNAの種類と発現量をRNAseqやmicroarrayによって比較し、KOマウスでどのようなシグナル伝達系が亢進するかを解明した。B.小腸上皮細胞の初代培養で in vivoの現象が再現可能であることを確認し、knockdownによる解析を行った。２．Rab10について：既に我々はRab8とRab10が共に働くことが線毛形成に必要なことを示しているが、Rab10 KOマウスは胎生早期に致死のため 、その極性輸送における機能は明らかでない。そこで我々は小腸特異的KOマウスなどを作成したが、特に異常が見られなかった。（研究３）EHBP1L1結合蛋白に関する研究：我々はEHBP1L1の結合蛋白としてCD2APを同定し、さらにCD2APの結合蛋白として、apical面の膜蛋白質に結合する可能性のあるタンパク質を同定したため、その局在などを解析した。

（研究1）研究Rab8结合蛋白EHBP1L1：在具有EHBP1L1的KO小鼠中，会发生核细胞分裂的异常，并且发生了非常严重的贫血。今年，我们进行了以下分析，以阐明分裂的分子机制。 1。免疫染色显示EHBP1L1的亚细胞定位及其在红细胞和红细胞中的结合蛋白CD2AP。 2。我们研究了是否由于CD2AP等KO和KD引起的核异常。 3。由于将定位到红细胞膜与KO的分子可能参与分裂，因此我们研究了分裂过程中的亚细胞定位以及它们与EHBP1L1的相互作用。 （研究2）分析了KO小鼠的其他基因，这些基因对于向根尖表面的运输很重要，并分析了生物体中根尖转运的其他功能。 ：1。我们在小肠特异性语法小鼠中进行了以下A和B，因为我们发现了小肠上皮细胞增殖增加的表型。答：我们使用RNASEQ和微阵列比较了野生型小肠中的mRNA类型和表达水平，以阐明KO小鼠中哪些信号系统的增强。 B.我们证实，体内现象可以在小肠上皮细胞的一级培养物中再现，并通过敲低分析。 2。关于RAB10：我们已经证明，在Rab8和Rab10之间进行合作是Pili形成的必要条件，但是Rab10 KO小鼠在Vitalis早期致命，因此它们在极地运输中的功能尚不清楚。因此，我们创建了小肠特异性的KO小鼠和其他小鼠，但没有发现特殊的异常。 （研究3）对EHBP1L1结合蛋白的研究：我们将CD2AP鉴定为EHBP1L1的结合蛋白，并且还鉴定出一种蛋白质，该蛋白可以与顶部表面上的膜蛋白结合为CD2AP的结合蛋白，因此我们分析了其本地化和其他因素。

项目成果

The Hypothalamic Paraventricular Nucleus Is the Center of the Hypothalamic?Pituitary?Thyroid Axis for Regulating Thyroid Hormone Levels

下丘脑室旁核是下丘脑、垂体、甲状腺轴调节甲状腺激素水平的中心

• DOI: 10.1089/thy.2021.0444
• 发表时间: 2021
• 期刊: Thyroid
• 影响因子: 6.6
• 作者: Kondo Yuri;Ozawa Atsushi;Kohno Daisuke;Saito Kazuma;Buyandalai Battsetseg;Yamada Sayaka;Horiguchi Kazuhiko;Nakajima Yasuyo;Shibusawa Nobuyuki;Harada Akihiro;Yokoo Hideaki;Akiyama Hideo;Sasaki Tsutomu;Kitamura Tadahiro;Yamada Masanobu
• 通讯作者: Yamada Masanobu