増殖応答を誘発する新規血清因子の同定

诱导增殖反应的新型血清因子的鉴定

• 批准号: 19659068
• 负责人: 横田 義史
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: University of Fukui
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19659068/
• 关键词: 増殖因子; 線維芽細胞; 転写因子; 早期応答遺伝子

bHLH型転写因子の機能抑制因子の1つであるId2は、c-junやc-mycなどと同様に早期応答遺伝子群に属しており、無血清培地で増殖停止させた細胞において血清刺激によって急激な遺伝子の発現誘導がかかる。このId2遺伝子の発現誘導が転写因子RFX1に依存していることをこれまでに見いだしている。本研究は、RFX1を介したId2遺伝子の発現誘導系を活用し、血清中に存在する新規の増殖因子を同定することにある。得られた成果は以下の通りである。1. Id2遺伝子発現の誘導に関わる細胞内シグナル伝達経路の探索血清飢餓状態のNIH3T3細胞でのId2遺伝子の発現は、血清に含まれるPDGFやリゾフォスファチジン酸(LPA)などの増殖因子では誘導できなかった。Id2の転写開始点の上流薬3kb上流の血清応答配列を介したレポーターを用いた解析結果では、チロシンキナーゼ阻害剤、JNK阻害剤、NF-kB阻害剤、PI3キナーゼ阻害剤、TGFβキナーゼ阻害剤によりレポーター活性が50〜60%程度抑制されたが、プロテインキナーゼA阻害剤、上皮細胞増殖因子受容体チロシンキナーゼ阻害剤、アクチン重合阻害剤、p38阻害剤、MEK阻害剤ではId2の血清応答配列を介したレポーター活性にほとんど影響が認められなかった。2. 血清飢餓状態におけるRFX1を介したId2遺伝子の発現抑制の機序NIH3T3細胞を血清飢餓状態にすると、12時間以内にRFX1によってId2遺伝子の発現はみられなくなる。この急激な発現抑制はフォルボールエステルによっても誘導されるものであり、この過程にタンパク質キナーゼC (PKC)δが関与していることを見いだした。

BHLH type planning write factor の function inhibition factor の 1 つ で あ る Id2 は, c - jun や c - myc な ど と with others early に 応 a heritage 伝 subgroup に genus し て お り, serum-free culture で raised colonization stop さ せ た cells に お い て serum stimulus に よ っ て nasty shock な heritage 伝 son の 発 now induced が か か る. こ の Id2 posthumous son 伝 の 発 induced が now planning to write factor RFX1 に dependent し て い る こ と を こ れ ま で に see い だ し て い る. は, this study RFX1 を interface し た Id2 posthumous son 伝 の 発 induction system now を use し, serum に す る new rules の raised を colonization factors might be す る こ と に あ る. The following is a られた result である. 1. Id2 posthumous son 伝 発 is の induced に masato わ る intracellular シ グ ナ ル 伝 da の 経 road to explore serum starvation の NIH3T3 cells で の Id2 posthumous son 伝 の 発 は now, serum contains に ま れ る PDGF や リ ゾ フ ォ ス フ ァ チ ジ ン acid (LPA) な ど の raised colonization factor で は induced で き な か っ た. Id2 の planning to write start の high-class 薬 3 kB high serum 応 の a match column を interface し た レ ポ ー タ ー を with い た analytical results で は, チ ロ シ ン キ ナ ー ゼ resistance against tonic, JNK resistance against tonic, NF - kB resistance against tonic, PI3 キ ナ ー ゼ resistance against tonic, TGF beta キ ナ ー ゼ resistance against tonic に よ り レ ポ ー タ ー inhibition さ が 50 ~ 60% degree れ た が , プ ロ テ イ ン キ ナ ー ゼ resistance against A tonic, epithelial cells raised colonization factors of body チ ロ シ ン キ ナ ー ゼ resistance against tonic, ア ク チ ン reclosing resistance against tonic, p38 lightning resistance against tonic, MEK resistance against tonic で は Id2 の serum 応 A match column を interface し た レ ポ ー タ ー active に ほ と ん ど influence が recognize め ら れ な か っ た. 2. Serum starvation に お け る RFX1 を interface し た Id2 posthumous son 伝 の 発 is の machine sequence NIH3T3 cell を serum starvation に す る と, 12 time within に RFX1 に よ っ て Id2 posthumous son 伝 の 発 now は み ら れ な く な る. こ の nasty shock な 発 now inhibit は フ ォ ル ボ ー ル エ ス テ ル に よ っ て も induced さ れ る も の で あ り, こ の process に タ ン パ ク qualitative キ ナ ー ゼ C (PKC) delta が masato and し て い る こ と を see い だ し た.