増殖応答を誘発する新規血清因子の同定

诱导增殖反应的新型血清因子的鉴定

• 批准号: 19659068
• 负责人: 横田 義史
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: University of Fukui
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19659068/
• 关键词: 増殖因子; 線維芽細胞; 転写因子; 早期応答遺伝子

bHLH型転写因子の機能抑制因子の1つであるId2は、c-junやc-mycなどと同様に早期応答遺伝子群に属しており、無血清培地で増殖停止させた細胞において血清刺激によって急激な遺伝子の発現誘導がかかる。このId2遺伝子の発現誘導が転写因子RFX1に依存していることをこれまでに見いだしている。本研究は、RFX1を介したId2遺伝子の発現誘導系を活用し、血清中に存在する新規の増殖因子を同定することにある。得られた成果は以下の通りである。1. Id2遺伝子発現の誘導に関わる細胞内シグナル伝達経路の探索血清飢餓状態のNIH3T3細胞でのId2遺伝子の発現は、血清に含まれるPDGFやリゾフォスファチジン酸(LPA)などの増殖因子では誘導できなかった。Id2の転写開始点の上流薬3kb上流の血清応答配列を介したレポーターを用いた解析結果では、チロシンキナーゼ阻害剤、JNK阻害剤、NF-kB阻害剤、PI3キナーゼ阻害剤、TGFβキナーゼ阻害剤によりレポーター活性が50〜60%程度抑制されたが、プロテインキナーゼA阻害剤、上皮細胞増殖因子受容体チロシンキナーゼ阻害剤、アクチン重合阻害剤、p38阻害剤、MEK阻害剤ではId2の血清応答配列を介したレポーター活性にほとんど影響が認められなかった。2. 血清飢餓状態におけるRFX1を介したId2遺伝子の発現抑制の機序NIH3T3細胞を血清飢餓状態にすると、12時間以内にRFX1によってId2遺伝子の発現はみられなくなる。この急激な発現抑制はフォルボールエステルによっても誘導されるものであり、この過程にタンパク質キナーゼC (PKC)δが関与していることを見いだした。

The functional inhibitor of bHLH-type transcription factor 1 is identified by Id2, c-jun, c-myc, and the like, and the early response gene subgroup belongs to the group consisting of serum-free culture, growth arrest, cell culture, serum stimulation, and induction of the emergence of an acute response gene. The occurrence of this Id2 gene is dependent on the factor RFX1. In this study, RFX1 and Id2 gene expression induction system were used, and new gene expression factors were identified in serum. The results of the study are as follows: 1. Induction of Id2 Gene Expression in NIH 3T3 Cells by Intracellular Pathway and Detection of Serum Starvation State; Detection of Id2 Gene Expression in NIH 3T3 Cells by Serum Containing PDGF and LPA; and Induction of Proliferation Factors. The analysis results of 3kb upstream serum anti-tumor alignment at the start point of Id2 include: anti-tumor inhibitor, JNK inhibitor, NF-kB inhibitor, PI3 inhibitor, TGFβ inhibitor, anti-tumor inhibitor, 50 ~ 60% inhibition of anti-tumor activity, anti-tumor inhibitor, epithelial cell growth factor receptor, anti-tumor inhibitor, anti-tumor inhibitor, anti-tumor inhibitor. p38 Inhibitor, MEK Inhibitor and Id2 Serological Response List 2. Mechanism of inhibition of RFX1 expression in serum starvation NIH3T3 cells and inhibition of RFX1 expression in serum starvation within 12 hours The rapid development of the phenomenon of inhibition of the occurrence of the disease, the process of the disease, the quality of the disease C (PKC)δ, and the incidence of the disease.