コンディショナルノックアウトによる間葉系幹細胞から肝細胞への分化可塑性の解析

条件敲除间充质干细胞向肝细胞分化可塑性分析

• 批准号: 19659185
• 负责人: 汐田 剛史
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: Tottori University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19659185/
• 关键词: 間葉系幹細胞; 肝細胞分化; コンディショナルノックアウト; 分化可塑性; 再生医学; 肝細胞; コンディショナルノックアウトマウス; floxマウス; Cre発現トランスジェニックマウス; 再生医療

われわれは、間葉系幹細胞より肝細胞へ分化誘導する過程で、Wnt/beta-cateninシグナルが重要であることを報告した。すなわち、間葉系幹細胞から肝細胞へ分化誘導の過程で、Wnt/beta-cateninシグナルが低下し、逆にWnt/beta-cateninシグナルをshort hairpin RNAで抑制すると(siRNA)、肝細胞への分化が誘導されることを明らかにした。そこで、われわれはこの事実を、発生過程で間葉系細胞でにのみWnt/beta-cateninシグナルを抑制することで、個体レベルで分化可塑性のメカニズムを明らかにすることを目的に以下の検討を行っている。すなわち、Cre/loxPシステムにより、beta-cateninがノックアウトされるマウスと活性化されるコンディショナルノックアウトマウスの作成を行っている。具体的には、間葉系細胞に発現させる目的で、NGFRプロモーターCreトランスジェニックマウスを作成した。beta-cateninのエクソン4の両端にloxPサイトを有するマウスは、Creの作用によりbeta-cateninの遺伝子機能がノックアウトされる。エクソン2-3の両端にloxPサイトを有するマゥスは、Creの作用によりbeta-catenin機能が活性化される。現在、両マウスをそれぞれNGFRプロモーターCreトランスジェニックマウスと交配させており、間葉系細胞でbeta-catenin機能が活性化されるマウスとノックアウトされるマウスを作成している。

This paper reports the important role of Wnt/beta-catenin in the differentiation of mesenchymal stem cells and hepatocytes. Wnt/beta-catenin gene expression is reduced during induction of hepatocyte differentiation in mesenchymal stem cells, and short hairpin RNA (siRNA) is inhibited in reverse Wnt/beta-catenin gene expression. In the process of differentiation and development, mesenchymal cells are inhibited by Wnt/beta-catenin. Cre/loxP system, beta-catenin system, activity system The specific purpose of the development of mesenchymal cells is to create a new type of cell. Beta-catenin is a functional component of loxP at the end of the system. The function of beta-catenin is activated by the action of Cre. Now, it is possible to activate the beta-catenin function in mesenchymal cells by mating with NGFR.

项目成果

A role of Wnt/beta-catenin signals in hepatic fate specification of human umbilical cord blood-derived mesenchymal stem cells.

• 发表时间: 2007
• 期刊: American journal of physiology. Gastrointestinal and liver physiology
• 作者: Y. Yoshida;T. Shimomura;Tomohiko Sakabe;K. Ishii;K. Gonda;Saori Matsuoka;Yumi Watanabe;Kazuko Takubo;H. Tsuchiya;Y. Hoshikawa;A. Kurimasa;I. Hisatome;T. Uyama;M. Terai;A. Umezawa;G. Shiota

Hepatic differentiation of human bone marrow-derived mesenchymal stem cells by tetracycline-regulated hepatocyte nuclear factor 3beta

四环素调节肝细胞核因子3β对人骨髓间充质干细胞的肝分化

• 发表时间: 2008
• 期刊: Hepatology 48
• 作者: KYOKO ISHI I;et al.
• 通讯作者: et al.

ヒト間葉系幹細胞から肝細胞への分化誘導過程におけるWnt/β-catenin経路の意義

Wnt/β-catenin通路在人间充质干细胞向肝细胞分化诱导过程中的意义

• 发表时间: 2009
• 作者: 星川 淑子;他
• 通讯作者: 他