权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

各種キナーゼの活性化状態を可視化するシステムの開発

开发可视化各种激酶激活状态的系统

基本信息

批准号：
12878119
负责人：
稲垣昌樹
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Aichi Cancer Center Research Institute
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12878119/
关键词：
ビメンチンキナーゼ Rho Rho GEF 神経突起

项目摘要

ビメンチンのヘッド領域(VH)には、種々のキナーゼによる特異的リン酸化部位が存在する。そこで、VHをRhoキナーゼのN末端に付加したキメラ・キナーゼ(VH-Rhoキナーゼ)を構築した。ついで、細胞生物学的解析によりVH-RhoキナーゼのVHのSer71が活性型Rho特異的に分子内リン酸化されることがin vivoで確認された。この時、他のキナーゼ(PKA,PKC,Cdc2キナーゼ、CaMKII)によるリン酸化は起きていないことからこのリン酸化が特異的な現象であると結論した。さらにこの新規システムを用いて、Rho-Rhoキナーゼシグナル経路の活性化因子としてKIAA380を同定した。KIAA380はRhoを直接活性化することによりRhoキナーゼを活性化することが判明したので、我々が開発した新規システムは、キナーゼの活性化状態を時間的・空間的に可視化するツールになることの他に、特定のキナーゼ経路を活性化する蛋白質を同定するための有用なツールにもなり得ることが明らかになった。一方、神経突起の退縮にはRho-Rhoキナーゼシグナルが必須の役割を果たすことが報告されていたが、それを制御するRho活性化因子は未同定であった。そこで、KIAA380の特異抗体と不活性型変異体を作製して細胞生物学的解析を遂行した。その結果、神経系培養細胞Neuro-2A,においてはlysophosphatidic acid依存的な神経突起退縮をKIAA380が制御している可能性を示した。

There are some defects in the acidified parts of the field (VH) products and all kinds of special equipment. Please, VH, Rho, N-terminal, plus VH-Rho, please. Analysis of VH-Rho and cellular biology, intramolecular acidification, acidification, in vivo confirmation of active Rho specialties in VH Ser71. At the same time, other people (PKA,PKC,Cdc2 testing, CaMKII) are responsible for acidizing. The effect of acidizing on acidification characteristics is analyzed. The activation factor of the route is the same as that of KIAA380. The KIAA380 Rho system directly activates the equipment, the Rho device, the sensor, the operator, the user, the user, the user, The specific route is activated, the protein is the same, the protein is useful, the circuit is active, the protein is active, the protein is the same, and the protein is useful. On the one hand, it is necessary to make sure that the Rho-Rho activity factor is not the same as that of the Rho activation factor. The analysis of cell biology was carried out by the analysis of cell biology by using the inactive body of anti-KIAA380 specific antibody. According to the results of the experiment, the culture cell Neuro-2A, which is dependent on the lysophosphatidic acid, emerges and reverses, and the possibility of controlling the system is shown by the KIAA380.