癌浸潤・転移における中間径フィラメント蛋白質の役割解明

阐明中间丝蛋白在癌症侵袭和转移中的作用

• 批准号: 12215170
• 负责人: 稲垣 昌樹
• 金额: $ 2.82万
• 依托单位: Aichi Cancer Center Research Institute
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12215170/
• 关键词: 中間径フィラメント; ケラチン; 熱ショック蛋白質; TNF; TRADD

ケラチン18と結合する蛋白質としてDnaJ/Heat shock protein 40(Hsp40)familyに属するMrj蛋白質およびTNF receptor 1-associated death domain protein(TRADD)を同定した。Mrjはco-chaperoneとして、ケラチン8・18フィラメント構築の制御を行い、細胞運動時のフィラメントのリモデリングに関与している。中間径フィラメントの構築は、これまで私共が解析を進めてきたリン酸化・脱リン酸化によってgeneralに制御されているが、新しく見出されたMrj-Hsp70による制御は、ケラチン8・18に特異的な制御システムであると考えられた。TRADDはケラチンが発現している上皮細胞では、Type1ケラチンに特異的に結合している。ケラチンやビメンチンなどの中間径フィラメントを発現していないSW13細胞にケラチン8・18やケラチン18のN末端(TRADD結合部位)を強制発現させ、TNFによるアポトーシス誘導への影響を見ると、コントロールベクターに比してケラチン8・18やケラチン18のN末端(TRADD結合部位)をトランスフエクションしたものでは、TNFによるアポトーシス誘導が有意に減弱していた。これらのことより、上皮細胞では、ケラチンは、TRADDとの結合を介して、TNF receptor 1シグナル経路に影響を与えていることが示唆された。ケラチン8結合蛋白質を酵母two-hybrid法で探索し、得られた陽性クローンのうち、核膜のnuclear pore complexの構成分子であるnucleoporin p62およびその類縁の新規蛋白質をケラチン8結合候補蛋白質として同定し、現在さらに解析を進めている。

ケラチン18 binding protein としてDnaJ/Heat shock protein 40 (Hsp40) family genus Mrj protein およびTNF receptor 1-associated death domain protein (TRADD) を同定した. Mrjはco-chaperoneとして、ケラチン8・18フィラメントstructure Architectural control of the movement, cell movement of the time of the movement of the のフィラメントのリモデリングに关 and している. Intermediate diameter structure and structureいるが、新しく见出されたMrj-Hsp70によるcontrolは、 The unique ケラチン8・18にシステムであると卡えられた. TRADD はケラチンが発appears しているepithelial cell では, Type 1 ケラチンにspecific にcombination している.ケラチンやビメンチンなどの中区フィラメントを発开灗ていないSW13 cell にケラチン8・18やThe N-terminus of ケラチン18 (TRADD binding site) is forced to appear, TNF is induced and shadowed Hibiki Kaito, Konoントロールベクターに比してケラチン8・18やケラチン18のN-terminal (TRADD knot Combined parts) をトランスフエクションしたものでは, TNF によるアポトーシス induced and intentionally weakened していた. TNF receptor 1シグナル経路に Impact を and えていることがshows instigation された.ケラチンン8 binding proteinをYeast two-hybrid methodでExplorationし、られたpositiveクローンのうち、nuclear membraneのnuclear pore complexのconstructing moleculeであるnucleoporin The p62 およびそのをケラチン8 binding candidate protein として同定し, the current さらにanalytic を入めている.

项目成果

Ohtakara,K., et al.: "p21-activated kinase PAK phosphorylates desmin at thc different sites from those for Rho-associated kinase."Biochem.Biophys.Res.Commun. 272. 712-716 (2000)

Ohtakara,K. 等人：“p21 激活激酶 PAK 在与 Rho 相关激酶不同的位点磷酸化结蛋白。”Biochem.Biophys.Res.Commun。

Togashi,H., et al.: "Functions of a Rho-specificguanine nucleotide-exchange factor, in neurite retraction : Possible involvement of proline-rich motif of KIAA0380 in the localization."J.Biol.Chem.. 275. 29570-59578 (2000)

Togashi,H., et al.：“Rho 特异性鸟嘌呤核苷酸交换因子在神经突收缩中的功能：KIAA0380 富含脯氨酸的基序可能参与定位。”J.Biol.Chem.. 275. 29570-

Izawa,I., et al.: "Identification of Mrj,a DnaJ/Heat shock protein 40family protein,as a keratin 8/18 filament-regulatory protein."J.Biol.Chem.. 275. 34521-34527 (2000)

Izawa,I., et al.：“Mrj 的鉴定，一种 DnaJ/热休克蛋白 40 家族蛋白，作为角蛋白 8/18 细丝调节蛋白。”J.Biol.Chem.. 275. 34521-34527 (2000)

Nakamura,Y., et al: "Localized phosphorylation of vimentin by Rho-kinase in neuroblastoma N2a cells."Genes Cells. 5. 823-837 (2000)

Nakamura,Y. 等人：“神经母细胞瘤 N2a 细胞中 Rho 激酶对波形蛋白进行局部磷酸化。”Genes Cells。

InagaKi, N., et al.: "Activation of Ca2+/calmodulin-dependent protein kinase IIwithin post-synaptic dendritic spines of cultured hippocampal neurons."J.Biol.Chem. 275. 27165-27171 (2000)

InagaKi, N. 等人：“培养的海马神经元突触后树突棘内 Ca2/钙调蛋白依赖性蛋白激酶 II 的激活。”J.Biol.Chem。