课题基金 / 基金详情

相同的組換えによる遺伝子破壊に基づくDNAトポイソメラーゼの機能解析

相同的組換えによる遺伝子破壊に基づくDNAトポイソメラーゼの機能解析
基于同源重组基因破坏的 DNA 拓扑异构酶功能分析
批准号：
03454496
负责人：
安藤 俊夫
金额：
$3.39万
依托单位：
Aichi Cancer Center Research Institute
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)
财政年份：
1991
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
1991 至 1993
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-03454496/
关键词：
DNAトポイソメラーゼRFLV遺伝子破壊相同的組換えDNAポリメラーゼcDNADNAトポイソメラ-ゼ遺伝子

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哺乳類動物のDNAトポイソメラーゼ(トポ)Iの生理機能を細胞レベルと個体レベルで明らかにする事を目的とし、次の実験を順次行い次の結果を得た。(1)ヒトトポIのcDNAをプロープとしてマウストポIcDNAクローンを得た。塩基配列の決定、アミノ酸配列の推定を行い、ヒトトポIのそれと比較した所、96%同一アミノ酸で相同性を示した。その機能的重要性を示す。(2)クローン化cDNAを用いて、マウストポI遺伝子の染色体上の位置をRFLV法を用いて決定した。即ち、実験用マウスNOD,CBA/KIと野生マウスMOL-MITの間で制限酵素HindIII切断パターンの変化(Restriction endonuclease Fragment Length Variation,RFLV)と三点検定交配の解析より、トポI遺伝子は、第2染色体の54.5にユニーク遺伝子としてマップされた。ヒトゲノムで検出された擬遺伝子はマウスでは認められなかった。(3)マウスcDNAをプローブにして、マウスの精子DNAからのCharon4Aゲノムライブラリーをスクリーニングし、exon4から8までを含むクローン2個を得た。exon7に存在するEcoVのユニークな切断部位を利用して、Neo耐性遺伝子とTK遺伝子をそれぞれ挿入した遺伝子破壊に用いるためのプラスミドの構築を行った。マウスの胚性腫瘍EC細胞にこのプラスミドの導入を行い形質転換株〜30株を取得した。PCR法により相同組換えを検討したが、現在までの所、得られなかった。
期刊论文(48)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
Ishimi,Y.,Nishizawa,M.and Andoh,T.: "Characterization of a camptothecin-resistant human DNA topoisomerase I in an invitro system for Simian Virus 40 DNA replication." Eur.J.Biochem.202. 835-839 (1991)
Ishimi,Y.、Nishizawa,M. 和 Andoh,T.：“在猴病毒 40 DNA 复制的体外系统中表征喜树碱抗性人类 DNA 拓扑异构酶 I。”
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Ishimi,Y.,Ishida,R.& Andoh,T.: "Effect of ICRF‐193,a novel DNA topoisomerase II inhibitor,on Simian Virus 40 DNA and chromosome replication in vitro." Molecular and Cellular Biology. 12. 4007-4014 (1992)
Ishimi, Y.、Ishida, R. 和 Andoh, T.：“ICRF-193（一种新型 DNA 拓扑异构酶 II 抑制剂）对猿猴病毒 40 DNA 和染色体体外复制的影响。” 12. 4007-。 4014 (1992)
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Ono,K.,Ikegami,Y.,Nishizawa,M.& Andoh,T.: "Menogaril,an anthracycline derivative,inhibits DNA topoisomerase II by stabilizing clevable complexes." Jpn.J.Cancer Res.83. 1018-1023 (1992)
小野，K.，池上，Y.，西泽，M.
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Tanabe,K.,Ikegami,Y.,Ishida,& Andoh,T.: "Inhibition of topoisomerase II by antitumor agents bis(2,6-dioxopiperazine)derivatives." Cancer Res.51. 4903-4908 (1991)
田边，K.，池上，Y.，石田，
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
共 24 条
    イリノテカン治療による骨髄抑制のCPT耐性トポI遺伝子導入による保護の試み
    • 批准号：
      12217143
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
    • 资助金额：
      $2.18万
    • 财政年份：
      2000
    • 负责人：
      安藤 俊夫
    • 依托单位：
      Soka University
    DNAトポイソメラーゼIを標的とする抗癌剤の探索と開発
    • 批准号：
      10153264
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
    • 资助金额：
      $1.79万
    • 财政年份：
      1998
    • 负责人：
      安藤 俊夫
    • 依托单位：
      Soka University
    自然耐性ヒト癌の耐性機構の解明とCPT-11耐性遺伝子を応用した遺伝子治療の試み
    • 批准号：
      07274273
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
    • 资助金额：
      $1.54万
    • 财政年份：
      1995
    • 负责人：
      安藤 俊夫
    • 依托单位：
      Soka University
    自然耐性ヒト癌の耐性機構の解明とCPT-11耐性遺伝子を応用した遺伝子治療の試み
    • 批准号：
      06282271
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
    • 资助金额：
      $1.6万
    • 财政年份：
      1994
    • 负责人：
      安藤 俊夫
    • 依托单位：
      Aichi Cancer Center Research Institute