イリノテカン治療による骨髄抑制のCPT耐性トポI遺伝子導入による保護の試み

尝试通过引入CPT抗性拓扑I基因来保护伊立替康治疗引起的骨髓抑制

基本信息

批准号：
12217143
负责人：
安藤俊夫
金额：
$ 2.18万
依托单位：
Soka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

カンプトテシン(CPT)誘導体を用いた癌化学療法における耐性機構の解明と、副作用の軽減を目的として、種々の実験を行った。CPT誘導体の1つであるイリノテカン(CPT-11)は、有効な抗癌剤としてとりわけ欧米各国で広く使用され、胃癌、大腸癌、肺癌などの治療に実績をあげている。他の薬剤との併用により、さらなる抗腫瘍効果を発揮することからも、CPT-11の有用性は非常に高い。しかし骨髄抑制や下痢などの副作用が問題で、我が国における使用量は欧米と比較して少ないのが現状である。本研究では、重篤な副作用である骨髄抑制を軽減することを目的としている。CPTは、トポイソメラーゼI(トポI)とDNAとの反応中間体Cleavable Complex(CC)を安定化することで、トポIの触媒作用を阻害する。ヒト白血病細胞由来のCPT耐性株CPT-K5は、CPT耐性な変異型トポIを発現している。今回、野性型トポIを持つマウス繊維芽細胞NIH3T3にこの変異型トポIを発現させると、細胞が2倍以上のCPT耐性を獲得することを見いだした。一方、野性型トポI遺伝子を導入した細胞は、CPT感受性を増強していた。Band depletion assayの結果から、野性型トポI遺伝子導入細胞は、CPT存在下でのCC安定化が促進されていたのに対し、変異型トポI遺伝子導入細胞ではこれが阻害されていることが示された。これらの結果から、CPT-K5由来の変異型トポIは優性的に細胞をCPT耐性化することが示された。この耐性トポI遺伝子を骨髄幹細胞に導入することにより、骨髄抑制の軽減と、さらなる治療効果の向上が可能になると期待される。

进行了各种实验，以阐明使用Camptothecin（CPT）衍生物中癌症化学疗法的抗性机制，并减少副作用。 CPT衍生物之一Irinotecan（CPT-11）被广泛用作有效的抗癌剂，尤其是在欧洲和美国，并且在治疗胃癌，结肠癌，肺癌和其他癌症方面已证明成功。 CPT-11非常有用，因为与其他药物结合使用时会发挥进一步的抗肿瘤作用。但是，诸如骨髓抑制和腹泻之类的副作用是问题所在，目前的情况是日本使用的数量比欧洲和美国小。这项研究旨在减少骨髓抑制，这是严重的副作用。 CPT通过稳定可裂解的复合物（CC），托泊酶I（topoi）和DNA之间的中间体抑制托托伊的催化。 CPT-K5是一种源自人白血病细胞的CPT抗性菌株，表达了抗CPT的突变突变体Topo I.我们发现，在小鼠成纤维细胞NIH3T3中表达这种突变的topo I，该NIH3T3具有野生型TOPO I，可以使细胞获得超过两倍的CPT抗性。另一方面，用野生型基因转移的细胞提高了CPT敏感性。条带耗竭测定法的结果表明，在存在CPT的情况下，野生型Topoi转染的细胞促进了CC稳定，而突变的Topoi转染的细胞抑制了这种情况。这些结果表明，来自CPT-K5的突变体I主要使细胞抗CPT。可以预期，通过将这种抗性托托伊基因引入骨髓干细胞中，可以减少骨髓抑制并进一步改善治疗作用。