自然耐性ヒト癌の耐性機構の解明とCPT-11耐性遺伝子を応用した遺伝子治療の試み

阐明天然耐药人类癌症的耐药机制并尝试使用CPT-11耐药基因进行基因治疗

• 批准号: 07274273
• 负责人: 安藤 俊夫
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Soka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 1996
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07274273/
• 关键词: DNAトポイソメラーゼ; CPT-11; VP-16; 化学療法; 耐性; SN-38

癌の化学療法の最大の問題点は癌の薬剤耐性と患者への副作用である。特に癌の自然耐性と再発時にしばしば見られる獲得耐性である。多くの耐性機構の研究から、そのメカニズムが明らかにされてきた。すなわち、薬剤の細胞内への蓄積・代謝・排出能の変化や標的酵素の変化である。これらの研究のほとんどはin vitro樹立株についての研究であり、患者体内での癌の自然耐性や獲得耐性の研究は少ない。そこで本研究はこれらのin vivoにおける耐性に注目し、そのメカニズムを明らかにし、その克服法を案出することを目的とする。まず、自然耐性の一例として、CPT-11に対する感受性の異なる大腸がん株2株Col1(感受性,S)とCol5(耐性,R)の担癌マウスにCPT-11を投与し腫瘍内へのCPT-11の取り込み、SN-38の代謝活性化とそれらの腫瘍外への排出能を調べた。またトポI、トポII、MDR-1のmRNAの発現量を調べた。その結果、Col1ではCol5に比べてトポIの発現量は低くトポIIの発現量は高かった。これはCPT-11やVP-16に対する感受性はその標的酵素や多剤耐性因子MDR-1の発現量によっては説明できないことを示している。そこで、両株細胞の担癌マウスにCPT-11を投与し、その腫瘍への取り込み、SN-38への代謝活性化、及びそれらの腫瘍外への排出速度を比較した。その結果、CPT-11の取り込みは両株で差はなかったが、その排出能は耐性株で著しく上昇していた。SN-38の消長もほぼCPT-11と同様であった。この結果はVP-16に対する逆転した感受性を考慮すると、いわゆる多剤耐性とは異なるCPT-11(SN-38)に特異的な排出機構があり、耐性株Col5ではそれが亢進していることを示している。そのメカニズムに関する今後の検討が待たれる。ヒト膵癌のCPT-11に対する自然耐性株PAN-13と感受性株PAN-9についても前項と同様の実験を行い腫瘍内の薬剤の消長を調べた結果、CPT-11の取り込みと排出において両株の間には有意な差は見られなかった。以上の結果、ヒト癌、特に大腸癌の自然耐性の重要な要因の一つが明らかにされた。今後、この現象が一般化できるか、どういう克服法があるか、等検討する必要がある。

The biggest problem point of cancer chemotherapy is drug resistance in と patients へ side effects である. The natural tolerance of the に cancer lesion is と. When it recur, it is に, ば, ば. When られる is observed, tolerance is である. Many く <s:1> patient institutions <e:1> study ら, そ メカニズムが メカニズムが and ら にされて にされて た た. Youdaoplaceholder0, drugs <s:1> accumulate, metabolize and excrete in cells へ, and enzymes that can change や target enzymes change である. こ れ ら の research の ほ と ん ど は in vitro set up plant に つ い て の research で あ り, patient で の の natural cancer patient や は less patience の research な い. そ こ で this study は こ れ ら の in vivo に お け る patience に attention し, そ の メ カ ニ ズ ム を Ming ら か に し, そ の overcome method を case out す る こ と を purpose と す る. ま ず, natural patience の case と し て, CPT - 11 に す seaborne る susceptibility の different な る e. が ん seedlings Col1 2 (sensitivity, S) と Col5 (patience, R) の bear carcinoma マ ウ ス に CPT - 11 を cast and し swollen sores へ の CPT - 11 の take り 込 み, SN - 38 の metabolic activation と そ れ ら の swollen sores outside へ の can discharge を adjustable Youdaoplaceholder0. The occurrence levels of またトポI, トポII, and MDR-1 mRNA <s:1> を adjust べた. The そ <s:1> results showed that the occurrence of Col1で and Col5に was <s:1> lower than that of べてトポI <s:1> and くトポII くトポ was <e:1> higher than that of った ii った. こ れ は CPT - 11 や VP - 16 に す seaborne る susceptibility は そ の target enzyme や tonic more patience factor MDR 1 の 発 now quantity に よ っ て は illustrate で き な い こ と を shown し て い る. そ こ で, struck の bear carcinoma cell strains マ ウ ス に CPT - 11 を cast and し そ の swollen sores へ の take り 込 み, SN - 38 へ の metabolic activity, and び そ れ ら の swollen sores outside へ の discharge velocity を compare し た. そ の results, CPT - 11 の take り 込 み は struck poor plant で は な か っ た が, そ の can discharge は patience で strains the し く rise し て い た. SN-38 <s:1> waxing and waning ほぼ CTP-11 と is the same as であった. こ の results は VP - 16 に す seaborne る inverse planning し た susceptibility を consider す る と, い わ ゆ る tonic more patience と は different な る CPT - 11 (SN - 38) に specific な eduction institutions が あ り, patience strains Col5 で は そ れ が hyperthyroidism し て い る こ と を shown し て い る. Youdaoplaceholder0 メカニズムに メカニズムに about する in the future そ 検 discuss が to たれる. ヒ ト Cui carcinoma の CPT - 11 に す seaborne る natural patience seedlings PAN PAN - 13 と susceptibility to 9 に つ い て も と referred to in the preceding paragraph with others の be 験 を い swollen sores and internal の 薬 tonic の changeing を adjustable べ た results, CPT - 11 の take り 込 み と discharge に お い て struck between strains の に は intentionally な poor は see ら れ な か っ た. The above <s:1> results, ヒト cancer, and the specific に colorectal cancer <s:1> natural tolerance <s:1> is an important な factor that <s:1> が が is clear ら にされた にされた にされた. In the future, こ の phenomenon が generalization で き る か, ど う い う overcome method が あ る か, beg す 検 る が necessary あ る.

项目成果

Nagai, S., Yamauchi, M. et al.: "Establishment and charcterization of CPT-11resistant human gastric and colonic xenograft lines." J. Surg. Oncol.59. 116-124 (1995)

Nagai, S., Yamauchi, M. 等人：“CPT-11 抗性人胃和结肠异种移植物系的建立和表征。”

Ishimi, Y., Ishida, R. and Andoh, T.: "Synthesis of SV40 C-family catenated dimers in vivo in the presence of ICRF-193." J. Molec. Biol.247. 835-839 (1995)

Ishimi, Y.、Ishida, R. 和 Andoh, T.：“ICRF-193 存在下体内 SV40 C 家族连锁二聚体的合成”。

安藤俊夫、有吉 寛: "「癌治療とBiomodulations」(漆崎一朗編 医薬ジャーナル社)" :DNAトポイソメラーゼI/CPT-11(塩酸イリノテカン)療法., 223(69-74) (1995)

Toshio Ando，Hiroshi Ariyoshi：“癌症治疗和生物调节”（由 Ichiro Urushizaki 编辑，Iyaku Journal）：DNA 拓扑异构酶 I/CPT-11（盐酸伊立替康）治疗。，223（69-74）（1995）

Takasuga,Y., Andoh, T. et al.: "ICRF-193, an inhibitor of topoisomerase II demonstrates that DNA replication in sperm nuclei reconstituted in Xenopus egg extracts" Exp. Cell Res.217. 378-384 (1995)

Takasuga,Y., Andoh, T. 等人：“ICRF-193，拓扑异构酶 II 的抑制剂，证明了非洲爪蟾卵提取物中重建的精子核中的 DNA 复制”。

Nevinsky, G. A., Bugreev, D. V. et al.: "High affinity interaction of mammalian DNA topoisomerase i with short single-and double-stranded oligonucleotides." FEBS Lett.368. 97-100 (1995)

Nevinsky, G. A.、Bugreev, D. V. 等人：“哺乳动物 DNA 拓扑异构酶 i 与短单链和双链寡核苷酸的高亲和力相互作用。”