DNAトポイソメラ-ゼを標的とした癌化学療法開発のための基礎的研究

以DNA拓扑异构酶为靶点的癌症化疗开发的基础研究

基本信息

批准号：
02151083
负责人：
安藤俊夫
金额：
$ 12.8万
依托单位：
Aichi Cancer Center Research Institute
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Cancer Research
财政年份：
1990
资助国家：
日本
起止时间：
1990 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

基礎的研究:真核DNAトポイソメラ-ゼ(トポ)IのN端側の機能領域が狭められた。リン酸化によるトポIIの活性調節では相矛盾する結果を与え、結論に至っていない。ラットにおいてトポIIAとトポIIBの2種類のアイソザイムがある事が示された。DNAのトポロジ-と機能については、核マトリックス上にSAR領域を介してDNAを結合する120Kのタンパクがあり、cDNAが分離された。また超ラセンDNAを特異的にマトリックスに結合させる75Kタンパクが精製された。そして構造が解析されつつある。またDNAに超ラセンを導入し転写効率を上昇させるタンパク因子が精製された。応用的研究:抗癌剤MSTー16及び関連化合物が既知のトポII標的抗癌剤とは異なる新たな作用機作を持つトポII阻害剤である事が発見された。細胞に対してはM期特異的阻害を示した。これは哺乳類においてもトポIIの必須機能はM期における染色体の凝縮、伸展、分離の各段階にある事を強く示唆している。トポ標的抗癌剤に対する耐性獲得機構に関しては以下のようである。カンプトテシン耐性には二つの型があった。第一はトポI遺伝子変異による酵素の薬剤耐性化、第二は酵素の発現レベルの低下によるものであった。トポII標的薬剤(VPー16)では酵素の発現レベルの低下による耐性獲得であった。さて、抗癌剤の臨床使用に当たっては併用療法が通常である。上記基礎的及び応用的研究をふまえて、トポ標的薬剤を中心としたベストの組合せ、投与法を案出すべく、in vitro培養で検討した。その結果、細菌のトポIIであるジャイレ-スの阻害剤ニュ-キノロン系薬剤がカンプトテシンー11の殺細胞効果を濃度依存的、時間依存的に増強した。以上、基礎、応用両面において本年度は著しい進展が見られた。

基本研究：真核DNA拓扑酶（TOPO）I的N端侧的功能区域已被缩小。通过磷酸化对TOPO II活性的调节导致结果相互矛盾，并且没有得出结论。结果表明，大鼠中有两种类型的同工酶，托普IIA和托普IIB。关于DNA拓扑和功能，核基质上有一个120K蛋白，该蛋白通过SAR区域结合DNA，并分离了cDNA。另外，纯化了75K蛋白，该蛋白专门结合了超偏DNA与基质。并且正在分析结构。另外，通过将超吸收引入DNA来纯化提高转录效率的蛋白质因子。应用研究：抗癌剂MST-16和相关化合物已被发现是TOPO II抑制剂，具有与已知TOPO II目标抗癌剂不同的新作用机理。在细胞上证明了M期特异性抑制作用。这强烈表明，在哺乳动物中，Topo II的基本功能是在M相中的染色体凝结，延伸和分离的阶段。获得抗topo靶向抗癌药的耐药性的机制如下。 camptothecin耐药性有两种类型。第一个是由于拓扑基因突变引起的酶的耐药性，第二个是由于酶表达水平的降低所致。通过降低酶表达水平来实现TOPO II目标药物（VP-16）。现在，当使用抗癌药的临床使用时，通常会使用组合疗法。基于上述基础和应用研究，我们研究了体外培养物，以提出最佳组合和给药方法，主要用于靶向的药物。结果，Gyres的抑制剂，细菌Topo II（Neuquinolone）以浓度依赖性和时间依赖性方式增强了Camptothecin-11的细胞杀伤作用。今年在基本和应用领域都取得了重大进展。