mRNA注入受容体発現モデルを用いた細胞内2次情報伝達系に対する麻酔薬の作用

采用mRNA注射受体表达模型研究麻醉剂对细胞内次级信号转导系统的影响

• 批准号: 05671246
• 负责人: 太田 善博
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05671246/
• 关键词: メッセンジャーRNA; アフリカツメガエル; 卵母細胞; 揮発性麻酔薬; 受容体

本研究では、細胞内二次情報伝達系に対する揮発性麻酔薬の影響を検討するためにラット脳より抽出したmRNAをアフリカツメガエルに注入し、中枢神経系モデルを作成した。このモデルでは代謝調節型受容体、G蛋白質、phospholipase C(PLC),inositoltrisphosphate(IP3)を介して,Ca^<2+>が放出されCl^-チヤネルが開口し、最終的にCl^-電流が観察される。このCl^-電流を指標として一連の細胞内情報伝達系に対する揮発性麻酔薬の影響の解析が可能となる。本研究では代謝調節型受容体のアゴニストとして5-hydroxy-triptamine(5-HT)を用いた。さらに直接細胞内にIP_3,Ca^<2+>を注入して誘発されるCl^-電流を指標に揮発性麻酔薬の作用点の同定を行った。揮発性麻酔薬であるハロタン,イソフルラン,メトキシフルランのいずれも、5-HT誘発性Cl^-電流を濃度依存性に抑制し、この変化は可逆的であった。メトキシフルレンによる濃度-反応曲線では、ED_<50>が右方偏位することなく最大値が抑制されたので非競合的抑制であることが示唆された。IP_3,Ca^<2+>注入によって誘発される電流応答はハロタン、イソフルラン、メトキシフルランのいずれによっても変化を認めなかった。本研究の成績から以下の2点が明かとなった。1)揮発性麻酔薬は代謝調節型受容体を介する細胞内二次情報伝達系を抑制した。2)代謝調節型受容体、G蛋白質、PLCなどの細胞膜に存在する成分が揮発性麻酔薬の重要な作用点であることが示唆された。

In this study, the effects of intracellular secondary information on intracellular secondary information are analyzed.脳より extracted and injected into the mRNA をアフリカツメガエルに, and the central nervous system モデルを was created.このモデルでは metabolism regulatory receptor, G protein, phospholipase C (PLC), inositoltrisphosphate (IP3) を中して, Ca^<2+>がrelease されCl^-チヤネルが开し, final にCl^-current が観看される.このCl^-Current を indicator と し て Continuous intracellular information 伝 Da system に対 す る Volatile hemp 酔 薬 の analysis の possibility と な る. In this study, 5-hydroxy-triptamine (5-HT), a metabolic regulatory receptor, was used. Direct intracellular IP_3,Ca^<2+>injection is used to induce irritation and Cl^-current is an indicator of the action point of the volatile anesthesia. Volatile anesthesia -HT-induced Cl^-current is concentration-dependent and can be inhibited and changed in a reversible manner.メトキシフルレンによるconcentration-reflection curveでは、ED_<50>がright deviationすることなくMaximum value suppressionされたのでnon-competing suppressionであることがshows instigationされた. IP_3.イソフルラン、メトキシフルランのいずれによっても変化を知めなかった. The results of this study are as follows: the following two points are clear. 1) Volatile anesthesia is a metabolism-regulated receptor that mediates intracellular secondary information and inhibits its expression. 2) Metabolic regulatory receptors, G proteins, and PLC are present in cell membranes and are important components of volatile anesthesia.

项目成果

岡村 篤: "細胞内二次情報伝達系に対する揮発性麻酔薬の抑制的作用の解析:mRNA注入アフリカツメガエル卵母細胞の受容体発現モデルを用いて" 北海道医学雑誌. 69(印刷中). (1994)

Atsushi Okamura：“分析挥发性麻醉剂对细胞内次级信号转导系统的抑制作用：使用注射 mRNA 的爪蟾卵母细胞的受体表达模型”北海道医学杂志 69（出版中）。

Yoshihiro Ohta: "Effects of putative neurotransmitlers and intravenous anesthetics on the activity of rat locus coeruleus neurons in vitro" Journal of Anesthesia. 8(印刷中). (1994)

Yoshihiro Ohta：“假定的神经递质和静脉麻醉剂对体外大鼠蓝斑神经元活性的影响”《麻醉杂志》8（出版中）。

Ma.Elena S.Alojado: "The effect of fentanyl and morphine on neurons in the dorsal raphe nucleus in the rat:an in vitro study" Anesthesia and Analgesia. 78(印刷中). (1994)

Ma.Elena S.Alojado：“芬太尼和吗啡对大鼠中缝背核神经元的影响：体外研究”麻醉与镇痛 78（出版中）。